摘要:目的:1.通过网络药理学分析对湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)治疗压疮进行机制研究,探讨MEBO治疗压疮潜在的分子靶点和信号通路,同时利用分子对接技术明确关键分子靶点与有效活性成分的结合稳定性。2.通过病例回顾性研究,总结MEBO在治疗压疮过程中所起的作用。方法:1.通过TCMSP数据库获取MEBO组成中药的有效化学成分及其对应靶点,再利用Uni Prot数据库将其转化为相对应的基因靶点名称(gene symbol)。通过Gene Cards、OMIM、Pharmgkb数据库,检索获取压疮相关基因并取交集。将MEBO对应靶点与Gene Cards、OMIM、Pharmgkb获得的压疮相关基因取交集,得到MEBO治疗压疮的靶点。将MEBO与压疮交集靶点导入至String数据库构建PPI网络,再利用Cytoscape 3.9.1软件中的Cyto NCA插件进行网络拓扑学分析,并基于R软件计算PPI网络中的DC、BC、CC、EC、LAC和NC平均值,基于这些平均值,筛选PPI网络中的核心靶点。运用Metascape数据库对MEBO与压疮交集靶点进行KEGG及GO富集分析,将得到的部分富集结果以气泡图形式可视化。利用Cytoscape 3.9.1软件构建“药物活性成分-作用靶点”网络图,通过计算网络中各成分的Degree值,分析MEBO治疗压疮的核心成分。然后利用CB-Dock平台对接核心成分与核心靶蛋白,预测关键活性成分与核心靶蛋白的结合活性,并对结果进行可视化。2.通过使用广西中医药大学第一附属医院的电子病历系统及临床一体化平台,收集和随访2019年12月至2021年12月入住创面修复科符合压疮诊断的患者的电子病历数据,探讨并总结该院使用MEBO治疗压疮的特点及效果。结果:1.基于TCMSP平台获取MEBO有效化学成分156个及其对应靶标基因282个,共得到1905个与压疮有关的疾病靶点。MEBO与压疮的共同靶点蛋白有182个,其中,预测MEBO治疗压疮的药物活性成分主要包括quercetin(槲皮素)、apigenin(芹菜素)、morphine(吗啡)、wogonin(汉黄芩素)、salutaridine(多花罂栗碱)、baicalein(黄芩苷)等,预测的核心靶点为TP53(细胞肿瘤抗原53)、ESR1(雌激素受体1)、MAPK3(丝裂原活化蛋白激酶3)、IL-6(...
摘要:目的 通过网络药理学浅究湿润烧伤膏(MEBO)治疗糖尿病足(DF)的作用机制。方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库获取MEBO的活性化学成分及有效成分靶点信息,将获得靶点通过UniProt数据库统一基因名称;通过人类基因综合数据库(GeneCards)查询DF的相关靶标基因,利用Venny2.1将MEBO药物活性成分靶点与DF靶点相映射,获得潜在作用靶点。将交集靶点导入STRING网站进行分析,并使用Cytoscape3.10.0构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,选出关键靶点基因。将交集靶点导入Metascape进行GO和KEGG通路富集分析,并通过Cytoscape软件构建“药物-成分-靶点”网络图。结果MEBO治疗DF的主要化学成分是小檗碱、汉黄芩素、黄麻苷A、黄连碱、黄柏酮等;关键作用靶点为表皮生长因子受体(EGFR)、一氧化氮合酶3(NOS3)、蛋白激酶B1(AKT1)、白细胞介素-1B(IL-1B)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)等;关键作用通路为AGE-RAGE、HIF-1、VEGF、NF-κB等信号通路。结论 本研究初步揭示了MEBO的有效成分可以从多靶点、多通路治疗DF,发挥着改善微环境、抑制创面感染及促进组织修复再生等作用。
摘要:目的 探究湿润烧伤膏对糖尿病大鼠创面再上皮化过程的促进作用及其机制。方法 90只Wistar雄性大鼠用随机数字法分为5组:MEBO组、rb-bFGF组、模型组、对照组、空白组,每组18只。对照组建立急性创面模型;MEBO组、rb-bFGF组、模型组建立糖尿病创面模型。对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水外敷治疗;MEBO组、rb-bFGF组分别予以MEBO和rb-bFGF外敷治疗;空白组只做备皮处理。各组创面于第3、7、14天分别随机取6只大鼠,采集创面组织标本并保存。随后进行Masson染色,观察各组胶原纤维生成及再上皮化情况。免疫荧光、蛋白印迹和qRT-PCR方法检测创面组织FoxO1、E-cadherin及Vimentin等因子表达。结果 在造模第7、14天,对照组、MEBO组及rb-bFGF组创面愈合率高于模型组(P<0.05),且创面显示胶原纤维生成及再上皮化情况更好。在造模第3天,MEBO组中AKT蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05);第7天,MEBO组及rb-bFGF组中PI3K、AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05),E-cadherin、Claudin1则低于模型组(P<0.05);第14天,与模型组相比,MEBO组及rb-bFGF组中AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量降低(P<0.05),E-cadherin、Claudin1表达量升高(P<0.05)。结论 湿润烧伤膏能促进糖尿病大鼠创面愈合,其可能作用机制是通过激活PI3K/AKT/FoxO1通路,并影响创面组织中E-cadherin、Claudin1、Vimentin表达及EMT转化过程实现的。
摘要:目的观察烧伤皮肤再生医疗技术[湿润暴露疗法(MEBT)/湿润烧伤膏(MEBO)]对糖尿病足部创面组织细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和p38信号通路分子及免疫表达的调控作用及关系,探讨MEBT/MEBO对糖尿病足溃疡的修复机制。方法糖尿病足患者40例予MEBT/MEBO干预治疗,留取治疗前后创面组织行免疫组化检测ERK1/2和p38信号通路关键分子ERK1/2、p38、促分裂原活化蛋白激酶(MAPKK6)、原癌基因(c-myc)、Akt、活化复制因子2抗体(ATF2)及免疫因子IgA、IgM、IgG、C3c、C4c表达情况,并观察二者间关系。结果经MEBT/MEBO治疗后,39例患者足部创面面积有不同程度缩小,仅1例患者无明显变化,显效14例(35.00%),有效25例(62.50%),无效1例(2.50%)。治疗前后信号通路分子全阳性表达、免疫阳性表达(任一指标)及免疫阳性表达(具体指标)比较差异均有统计学意义(P<0.05),在创面信号通路分子表达阳性率升高的同时,免疫因子阳性表达率亦升高。治疗前创面组织可见免疫因子极少量分布,治疗后创面组织免疫因子IgA、IgM、IgG、C3c、C4c呈广泛、弥漫分布。治疗前创面组织可见信号分子极少量分布,治疗后创面组织信号通路分子ERK1/2、p38、MAPKK6、c-myc、Akt、ATF2呈广泛、弥漫分布。结论 MEBT/MEBO可能促进了糖尿病足创面ERK1/2和p38信号通路分子及免疫表达,ERK1/2和p38信号通路及其交互作用可能通过增加创面组织免疫表达而促进了糖尿病足创面的愈合。