摘要：目的采用RT-PCR检测方法观察皮肤原位再生复原技术(Moist Exposed BurnTreatment/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法将100只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和糖尿病造模组(80只),糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),成功制备糖尿病大鼠模型64只,从中随机选取60只,并随机分为湿润烧伤膏(MEBO)组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只)。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应的药物治疗,并记录创面愈合时间;用药6 d后,采用RT-PCR法观察记录创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA的表达量。结果 (1)4组大鼠创面平均愈合时间对比,空白对照组愈合时间最短;MEBO组、贝复济组、模型组3组大鼠创面平均愈合时间对比,MEBO组愈合时间最短。(2)用药后第6天,模型组大鼠创面肉芽组织中β-catenin mRNA的表达显著低于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠创面肉芽组织中Smad3 mRNA的表达显著高于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可抑制Smad3 mRNA、增强β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达,缩短创面愈合时间,促进糖尿病足溃疡创面的愈合。

摘要：目的:观察MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的临床疗效;探索MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的部分机制。方法:将符合糖尿病足溃疡诊断的患者60例,随机分为实验组和对照组,每组30例。实验组运用MEBT/MEBO换药治疗,对照组贝复济(bFGF)换药治疗,14天为1个疗程,分别记录两组患者第1疗程结束时、第2疗程结束时的创面愈合情况,观察治疗2个疗程后两组患者临床疗效及两组患者创面愈合率,评价其疗效、安全性。将参与临床研究的两组患者分别于0d、14d、28d三个时相点取创面组织,通过酶联反应吸附测定法检测创面组织中VEGF和EGF的含量表达。结果:在经过28天治疗后,实验组患者溃疡面积、深度、治疗前后局部症状体征积分均优于对照组(P<0.05)。实验组临床疗效优于对照组(P<0.05)。实验组未见明显毒副作用或不良反应。治疗第14d、28d,实验组VEGF以及EGF含量均高于对照组(P<0.05)。结论:(1)MEBT/MEBO在治疗糖尿病足溃疡中临床效果明显,具有缩短愈合时间,改善创面局部症状的作用,且对患者无明显不良反应。(2)MEBT/MEBO的使用能够明显提升患者糖尿病足创面组织中VEGF、EGF两种细胞因子的含量,加快创面的修复过程。

摘要：目的观察皮肤原位再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面TGF-β1、P-smad3表达的调控作用。方法100只SD大鼠随机分为糖尿病足造模组(80只)与空白对照组(20只),从糖尿病足造模组成功造模大鼠中取60只,随机分为模型组、贝复济组及MEBO组,各20只。于用药第5天、14天,各取相同部位创面组织,采用Western blotting技术检测TGF-β1、Smad3、P-smad3(磷酸化smad3)蛋白表达水平。结果四组大鼠Smad3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);MEBO组与贝复济组TGF-β1、P-smad3蛋白表达无差异(P>0.05),均低于空白对照组、高于模型组(P<0.05或P<0.01);与第5天相比,第14天时MEBO组与贝复济组TGF-β1、P-smad3表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在大鼠糖尿病足溃疡创面修复早期,MEBT/MEBO可能通过上调创面TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,促进创面损伤修复;而在创面修复后期,MEBT/MEBO可能通过下调创面TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,减少瘢痕愈合。

摘要：目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的可能机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机分为对照组、模型组和MEBO组,每组30只,其中对照组大鼠建立常规创面模型,模型组和MEBO组大鼠建立糖尿病创面模型。模型建立后,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布外敷治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱外敷治疗。分别于治疗第1、11、18天采用Western blotting法检测ULK1蛋白及qRT-PCR技术检测ULK1 mRNA的表达水平,并对比观察3组大鼠创面愈合情况。结果(1)治疗第1天,3组大鼠创面均淤血水肿,无肉芽组织形成;治疗第11天,对照组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成,模型组大鼠创面高度水肿,无肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成;治疗第18天,对照组大鼠创面完全愈合,模型组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成。(2)治疗第11、18天,3组大鼠创面愈合率对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第1天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组=模型组,对照组与MEBO组及对照组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第11天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第18天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组=MEBO组<模型组,对照组与模型组及MEBO组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,提高创面组织中ULK1表达水平,诱导细胞自噬可能是其作用机制之一。