摘要:目的 通过网络药理学浅究湿润烧伤膏(MEBO)治疗糖尿病足(DF)的作用机制。方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库获取MEBO的活性化学成分及有效成分靶点信息,将获得靶点通过UniProt数据库统一基因名称;通过人类基因综合数据库(GeneCards)查询DF的相关靶标基因,利用Venny2.1将MEBO药物活性成分靶点与DF靶点相映射,获得潜在作用靶点。将交集靶点导入STRING网站进行分析,并使用Cytoscape3.10.0构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,选出关键靶点基因。将交集靶点导入Metascape进行GO和KEGG通路富集分析,并通过Cytoscape软件构建“药物-成分-靶点”网络图。结果MEBO治疗DF的主要化学成分是小檗碱、汉黄芩素、黄麻苷A、黄连碱、黄柏酮等;关键作用靶点为表皮生长因子受体(EGFR)、一氧化氮合酶3(NOS3)、蛋白激酶B1(AKT1)、白细胞介素-1B(IL-1B)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)等;关键作用通路为AGE-RAGE、HIF-1、VEGF、NF-κB等信号通路。结论 本研究初步揭示了MEBO的有效成分可以从多靶点、多通路治疗DF,发挥着改善微环境、抑制创面感染及促进组织修复再生等作用。
摘要:目的 探究湿润烧伤膏对糖尿病大鼠创面再上皮化过程的促进作用及其机制。方法 90只Wistar雄性大鼠用随机数字法分为5组:MEBO组、rb-bFGF组、模型组、对照组、空白组,每组18只。对照组建立急性创面模型;MEBO组、rb-bFGF组、模型组建立糖尿病创面模型。对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水外敷治疗;MEBO组、rb-bFGF组分别予以MEBO和rb-bFGF外敷治疗;空白组只做备皮处理。各组创面于第3、7、14天分别随机取6只大鼠,采集创面组织标本并保存。随后进行Masson染色,观察各组胶原纤维生成及再上皮化情况。免疫荧光、蛋白印迹和qRT-PCR方法检测创面组织FoxO1、E-cadherin及Vimentin等因子表达。结果 在造模第7、14天,对照组、MEBO组及rb-bFGF组创面愈合率高于模型组(P<0.05),且创面显示胶原纤维生成及再上皮化情况更好。在造模第3天,MEBO组中AKT蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05);第7天,MEBO组及rb-bFGF组中PI3K、AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05),E-cadherin、Claudin1则低于模型组(P<0.05);第14天,与模型组相比,MEBO组及rb-bFGF组中AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量降低(P<0.05),E-cadherin、Claudin1表达量升高(P<0.05)。结论 湿润烧伤膏能促进糖尿病大鼠创面愈合,其可能作用机制是通过激活PI3K/AKT/FoxO1通路,并影响创面组织中E-cadherin、Claudin1、Vimentin表达及EMT转化过程实现的。
摘要:目的:本研究将从环鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(Cyclic guanine nucleotide adenine nucleotide synthetase-Stimulator of interferon genes,cGAS-STING)通路入手,明确湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过调控cGAS-STING信号通路减轻创面组织炎症反应状态,从而加快糖尿病创面修复的进程,为之后的临床治疗和科学研究提供可靠的参考数据。方法:1.通过网络药理学数据库筛选出MEBT/MEBO治疗糖尿病创面的活性成分和关键靶点,并对其进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析和蛋白质相互作用网络(Protein-protein interaction,PPI)分析,对活性成分和关键靶点进行分子对接验证其结合能力。2.动物实验验证:(1)选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组:空白组、MEBO组、贝复新组、对照组,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。(2)通过HE染色观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测cGAS-STING通路相关蛋白表达变化差异及mRNA转录水平差异。结果:(1)通过网络药理学方法筛选出77个湿润烧伤膏和糖尿病创面的交集靶点,显示刺槐素、汉黄芩素、槲皮素、吴茱萸次碱等为湿润烧伤膏核心活性成分,对交集靶点进行PPI网络分析筛选出TP53、TNF、HSP90AA1等关键靶点,KEGG富集分析结果显示TNF、PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路在湿润烧伤膏对糖尿病创面的治疗中起到重要作用,GO富集分析结果显示这些交集靶点的生物过程主要涉及炎症反应调节和血管新生过程。我们进一步对核心活性成分和关键靶点进行分子对接,结果显示均具有较强结合活性。(2)创面愈合情况:造模后第3天,各组之间的创面愈合率无明显差异(P>0.05);造模后第7、14天,与对照组相比,空白组、MEBO组和贝复新组的创面愈合...
摘要:目的观察地榆膏对深Ⅱ度烫伤大鼠模型创面愈合的影响,并探讨其作用机制。方法选取SD大鼠,随机分为正常组、模型组、美宝湿润烧伤膏组、莫匹罗星组、地榆膏组。除正常组外其余大鼠制备深Ⅱ度烫伤模型,造模成功后观察各组大鼠创面基本情况、创面愈合率、组织病理学变化、CD31蛋白相对表达量以及血清中IL-6和TNF-α水平。结果烫伤后7、14、21 d,地榆膏组大鼠创面基本情况和组织病理学变化情况良好,美宝湿润烫伤膏组次之,莫匹罗星组和模型组欠佳。与正常组比较,模型组血清中IL-6、TNF-α及组织中CD31的表达明显升高(P<0.05);而各药物处理组创面愈合率及CD31相对表达量明显高于模型组(P<0.05),血清中IL-6、TNF-α水平明显低于模型组(P<0.05)。烫伤后14、21 d,地榆膏组创面愈合率和CD31表达量明显高于莫匹罗星组(P<0.05),但与美宝湿润烫伤膏组比较差异无统计学意义。结论地榆膏能抑制炎性因子IL-6和TNF-α释放、促进创面微血管生成,进而起到促进烫伤创面愈合的作用。