摘要：目的:观察皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、磷酸化smad3(P-smad3)表达及形态学结构的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、贝复济组和MEBT/MEBO组,每组各20只。模型组、MEBT/MEBO组和贝复济组大鼠参照糖尿病模型制备法,采用腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素,建立糖尿病动物模型;空白对照组大鼠则腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。分别于干预治疗后第5、14天各取相同部位创面组织,采用Western blot法检测TGF-β1、Smad3和P-smad3蛋白表达水平,常规病理技术观察溃疡创面组织形态学结构,各组间差异比较采用方差分析和秩和检验。结果:治疗后5 d,各组大鼠Smad3蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(F=1.036,P=0.388);MEBT/MEBO组、贝复济组的大鼠TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平则均明显低于空白对照组(P=0.005、P=0.026,P=0.001、P=0.005);而且,上述2组大鼠的TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平亦明显高于模型组(P=0.000);此外,与第5天结果相比,第14天MEBT/MEBO组与贝复济组的TGF-β1、P-smad3表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P=0.000)。治疗后第5天,MEBT/MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞形态、毛细血管新生情况优于模型组,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,空白对照组胶原纤维增生明显但排列紊乱,模型组胶原纤维呈团状增生。结论:MEBT/MEBO在创面愈合早期可激活TGF-β1/Smad3信号通路,促进创面损伤修复,而在愈合晚期则抑制该信号通路的活化,控制创面组织过度增生。

摘要：目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)及其产品湿润烧伤膏(MEBO)对SD大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。 方法:健康成年SPF级SD雄性大鼠80只,12周龄,体重220g~250g,适应性喂养1w后,按随机数字表法选出20只大鼠作为空白组,空白组大鼠建立全层皮肤缺损开放性创面模型后不予其他处理。其余60只大鼠制备成慢性难愈合创面模型,然后按处理办法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组20只。各组创面制备后立即用药治疗。各组首次换药前以1/5000呋喃西林液清洁创面,换2次药。观察各组大鼠创面愈合时间,以及在12h、3d、7d、14d共4个时...

摘要：目的:探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及产品湿润烧伤膏(MEBO)促进大鼠慢性难愈合皮肤创面组织愈合的机制。方法:建立慢性难愈合创面模型,观察MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。结果:①创面愈合大体情况:观察造模后创面肉芽组织生长情况,发现MEBO组、贝复济组大鼠创面内芽组织生长情况明显好于模型组,MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠创面较苍白,生长缓慢。②创面愈合时间:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合时间为16.28±1.19d,短于贝复济组17.52±1.20d(P<0.05),明显短于模型组27.10±2.90d(P<0.05),差异有统计学意义。③ATF2和p38蛋白的表达:模型组ATF2和p38蛋白的表达明显低于MEBO组、贝复济组(P<0.01),MEBO组在第14天高于模型组(P<0.05)。结论:MEBO能促进大鼠慢性难愈合皮肤创面愈合的速度和质量,功效优于模型组。MEBO能影响p38MAPK信号通路相关蛋白中ATF2和p38的表达,从而激活p38MAPK信号通路,影响和调控细胞效应,进而促进细胞因子的产生以及随后的细胞增殖,血管再生和基质修复,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。

摘要：目的:我国有超过1.4亿糖尿病人,糖尿病药物研发在我国拥有巨大的市场需求,同时用于糖尿病药物研发的实验动物的需求也与日俱增。我们建立一种使用无脊椎动物家蚕(Bombyx mori)来构建糖尿病创面模型,探讨家蚕糖尿病创面愈合中PI3K-Akt信号通路的调控作用,为研究家蚕糖尿病创面模型提供一定的理论基础,为筛选治疗糖尿病创面的药物或疗法提供低成本的动物模型。方法:(1)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕36 h后,每间隔30 min测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,观察家蚕血淋巴葡萄糖耐量情况。(2)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕,每间隔12 h测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,称量家蚕的体重,观察建模后84 h家蚕体型变化,120 h结茧情况,评估不同浓度葡萄糖对家蚕生长的影响。(3)MEBT/MEBO作为阳性治疗对照组,收集家蚕创面组织进行苏木精-伊红染色和改良马松染色,观察家蚕创面组织的生长情况。(4)通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测家蚕创面组织中相关因子的转录及蛋白表达水平。结果:(1)家蚕血淋巴中葡萄糖浓度随着进食总体呈现先升高后降低,空腹时高糖各组血淋巴葡萄糖浓度高于空白组,高糖各组血淋巴葡萄糖达到峰值后快速下降,峰值2 h后血淋巴葡萄糖水平仍高于空腹值,表现出不同程度的糖耐量受损。(2)高糖各组家蚕与空白组的家蚕相比,体重增长缓慢,葡萄糖浓度越高,对生长影响越明显。(3)组织病理学结果显示空白组表皮、皮细胞和基膜层细胞无明显变化;对照组表皮增厚,皮细胞增多和基膜层完整,胶原纤维大量增生且排列致密;模型组表皮薄,基膜层不明显,皮细胞和胶原纤维增生,但是排列紊乱。(4)各组家蚕创面组织PI3K、Akt、m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量均先升高后降低;同时间段空白组表达量最低;12 h时MEBO组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);36 h时MEBO组PI3K、Akt的m RNA转录水平最高,对照组m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量最高,差异具有统计学意义(P<0.05);84 h时模型组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于MEBO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)用高浓度(35%和40%)葡萄糖混合桑叶喂养的家蚕更早表现出血淋巴葡萄糖耐量受损和生长受到抑制现象,能表现出稳...