摘要:目的:观察应用MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡创面的临床疗效;运用Western-blot及常规病理技术探讨MEBT/MEBO促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法:(1)临床研究:将符合糖尿病足溃疡诊断的患者60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组外敷美宝湿润烧伤膏,对照组外敷贝复济。分别记录两组患者治疗第7天、第14天、第28天创面愈合率,观察治疗42天后两组患者临床疗效及两组患者创面愈合时间,评价其疗效、安全性。(2)动物实验:将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(各20只)。各组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷美宝湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。用药第5天、14天,各组分别处死10只大鼠,利用光镜观察溃疡创面组织形态学结构,Western-blot法测定TGF-β1、Smad3、P-smad3蛋白的表达量。结果:(1)临床研究:治疗第14天、第28天,观察组与对照组对比,患者创面愈合率提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在经过42天治疗后,观察组患者临床疗效优于对照组(P<0.05)。观察组患者创面愈合时间比对照组患者创面愈合时间短(P<0.05)。MEBO组未见明显毒副作用或不良反应。(2)动物实验:连续换药第5天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量均显著提高(P<0.01);与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量略高(P>0.05)。第14天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量均显著降低(P<0.01);且与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量略高,但差异无统计学意义(P>0.05)。用药第5天,MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞、毛细血管新生情况优于模型组,炎症细胞较模型组少,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;用药第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,可见皮肤附属器,空白对照...
摘要:糖尿病性溃疡的临床发病率较高,且发病机制较为复杂、愈合过程较为缓慢,已成为临床上需要迫切解决的难题。近年来,烧伤创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)等中医疗法在提高糖尿病性溃疡治疗效果、降低患者截肢率方面取得了较为显著的临床疗效。但相关研究资料显示,中医药作为我国传统的治疗方式虽具有其独特的优势,可临床上仅13%的患者会在治疗过程中联合应用。为提高中医药的关注度以及指导糖尿病性溃疡的临床治疗、为MEBT/MEBO治疗糖尿病性溃疡提供理论支持,笔者通过查阅大量基础研究资料,对MEBT/MEBO通过调节PI3K/Akt信号通路、 MAPK信号通路、 Wnt/β-catenin信号通路、 TGF-β1/Smad信号通路、 NF-κB信号通路和PI3K/Akt/mTOR信号通路的转导而参与糖尿病性溃疡修复的作用机制进行了综述。
摘要:目的:1.观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进体表慢性难愈合创面(简称“慢创”)愈合的药效作用。2.观察MEBT/MEBO对体表慢性难愈合创面组织的苏木精-伊红染色(HE)染色病理形态学的改善作用;并观察全层皮肤愈合过程中,其真皮再生模式及与表皮层、基底膜层再生的关系。3.探究MEBT/MEBO干预PI3K/Akt/mTOR信号通路调控创面蛋白质合成促进体表慢性难愈合创面愈合的修复机制。4.探讨MEBT/MEBO作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控创面血管生成促进慢创修复的机制。方法:1.将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和体表慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组(阳性对照组)34只和MEBT/MEBO组34只。并同时于第3、7、14 d取创面组织。各组分别干预治疗后,观察创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于干预治疗后第3 d、7 d和14 d固定焦距拍照创面计算愈合率。HE染色法观察病理学改变、PAS染色法观察创面基底膜层的生长情况。提取第3、7、14 d创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、mTOR(Ser2448)、p70 S6K(Thr389)、4E BP1(Thr37/46)的mRNA和蛋白转录及表达水平。2.145只雄性SD大鼠,随机分为空白组21只、对照组31只和慢创组93只,慢创组造模成功后再随机分为模型组、贝复新组和MEBT/MEBO组各31只,于干预治疗后第3 d、7 d和14 d取创面组织。碱性水浸泡法扫描电子显微镜技术(SEM)观察创面组织愈合过程中真皮全层再生过程。提取第3 d、7 d和14 d创面组织,分离上清液,ELISA法检测IGF-1含量;提取创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、eNOS(S1177)、VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平。结果:1.与模型组比较,MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.01)。2.造模及干预治疗14 d后,MEBT/...
摘要:目的用免疫组化法及超微病理技术探讨烧伤湿性医疗技术(Moist Exposed Burn Therapy,MEBT)及其配套产品湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功的大鼠并随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(每组20只)。4组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。治疗第5天和第14天,各组分别处死10只大鼠,利用电镜观察溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构,并用免疫组化技术测定TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,对比各组观察及测定结果。结果治疗第5天和第14天,MEBO组与贝复济组溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构逐步改善,细胞内各细胞器的形态结构逐渐恢复,MEBO组、贝复济组肉芽组织细胞的超微结构情况明显优于模型组。连续换药第5天,MEBO组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显高于模型组(P<0.001),且MEBO组、空白对照组、贝复济组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异;第14天,MEB0组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显低于空白对照组(P<0.001),且MEBO组、贝复济组、模型组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异。结论 MEBT/MEBO能改善细胞的超微结构,并通过动态调节TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,促进糖尿病足溃疡创面的愈合,同时可在一定程度上减少瘢痕形成。