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学位论文
CK19、P63在超脉冲CO<sub>2</sub>点阵激光修复兔耳浅表性瘢痕中的表达及影响因素的实验研究
雷颖; 谭军 南华大学 南华大学 2012

摘要:目的:观察超脉冲CO2点阵激光Active FX、Deep FX治疗兔耳浅表性瘢痕的创面愈合情况并比较湿性创面护理技术和传统外科创面护理技术,创面愈合的差异性。研究CK19、P63在兔耳浅表性瘢痕点阵激光修复中的表达及不同创面护理技术对它们的影响,为临床采用超脉冲CO2点阵激光治疗瘢痕、寻找表皮干细胞参与瘢痕修复的证据。方法:选取新西兰大白兔20只,在兔耳腹侧面制作边长为1.5cm的正方形全层皮肤及软骨膜缺损创面,每只兔耳2个创面,共计80个创面,建立兔耳浅表性瘢痕模型。激光治疗分为两组: UltraPulse CO2Fractional(超脉冲CO2点阵)激光Active FX治疗组和UltraPulse CO2Fractional(超脉冲CO2点阵)激光Deep FX治疗组;激光治疗后创面修复分为两组:传统络合碘治疗方法组和湿润烧伤膏治疗方法组。每天观察创面愈合情况,记录每个创面的愈合时间;收集治疗前、治疗后即刻、1天、4天、7天、14天的瘢痕组织标本作病理组织切片,行HE染色镜下观察,并采用免疫组化检测皮肤干细胞标志分子角蛋白19(cytokeratinsCK19)、转录因子P63的表达,分析超脉冲CO2点阵激光两种不同模式和两种创面修复方法对CK19、P63的影响。结果:1、大体观察:络合碘组Active FX、Deep FX模式治疗后第2~3天创面开始干燥结痂、第9~10天痂皮开始脱落、第14天创面愈合,瘢痕较治疗前平整,颜色变浅;湿润烧伤膏组Active FX模式治疗后创面湿润,第2~3天创面可见散在点状结痂,第5~6天点状痂皮脱落,Deep FX模式治疗后创面未见明显结痂,治疗后第6~7天创面上皮化愈合。点阵激光Active FX模式治疗:络合碘组创面愈合时间为(13.7±0.65)天,湿润烧伤膏组创面愈合时间为(10.4±0.80)天,组间差异有统计学意义(P<0.05);点阵激光Deep FX模式治疗:络合碘组创面愈合时间为(9.4±0.28)天,湿润烧伤膏组创面愈合时间为(7.5±0.62)天,组间差异有统计学意义(P<0.05);Active FX模式和Deep FX模式治疗创面愈合时间对比,...

学位论文
ADAM-10在糖尿病创面修复中的作用机制研究
姜艳; 唐乾利 广西大学 广西大学 2022

摘要:研究背景和目的糖尿病创面是糖尿病常见并发症,具有病程长、易复发等特点,给患者带来极大困扰,探寻其病理机制及治疗具有重要意义。巨噬细胞和成纤维细胞是创面中的重要效应细胞。现发现ADAM-10调控细胞粘附、生长、迁移等过程。但ADAM-10在糖尿病创面中的具体机制尚不明确。本研究探究ADAM-10在巨噬细胞、成纤维细胞中的调控作用;及其在糖尿病创面愈合过程中的作用机制;结合药物治疗创面,验证研究结果。研究方法1.临床上筛选慢性难愈合创面,随机分组:湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MM)组、重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(rb-b FGF)组。在治疗第3、10天,取肉芽及少量上皮组织,免疫荧光(IF)染色ADAM-10、MMP-12,观察蛋白变化特点。2.对sh ADAM-10 RAW264.7细胞进行蛋白组学分析,筛选差异蛋白,并进行生物信息学分析。3.对RAW264.7和J774a.1细胞,进行sh ADAM-10(sh)或EX ADAM-10(EX)干预,随后给予脂多糖(LPS)或MMP-12抑制剂+LPS(MMP-12inh+LPS)刺激,检测细胞活力、基因转录、蛋白表达等情况。4.对L929成纤维细胞进行EX干预,随后LPS刺激,观察细胞活力、ADAM-10以及其它蛋白表达水平。5.正常、糖尿病大鼠分别制备创面,分组为急性(Acute)组、模型(Model)组、MM组以及rb-b FGF组。观察第3、7、10、14天的创面情况;创面率;病理结构;亚细胞结构;ADAM-10转录水平;蛋白表达及定位情况。结果1.慢性难愈合创面治疗第3天,MM组内ADAM-10、MMP-12表达均低于rb-b FGF组。相较于治疗第3天,第10天ADAM-10表达增加;MMP-12降低;MM增加ADAM-10作用低于rb-b FGF;rb-b FGF降低MMP-12作用明显。2.sh RAW264.7细胞蛋白组学检测结果显示:干扰ADAM-10影响创面愈合相关的多种生物学过程,并导致MMP-12和AKT降低。3.巨噬细胞中(1)对较于CON组,1000ng/ml的LPS作用9 h~24 h增加细胞活力(P<0.05);1.5μmol/L的MMP-12inh作用12 h~36 h对细胞活力无影响(P>0.05)。LPS作用12 h显著降低ADAM-10、增加MMP-12基因转录水平(P<0.01);LPS增加MMP-12、i NOS、T...

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