摘要:目的:通过动态观察大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2磷酸化蛋白及基因表达变化,从p38信号通路角度探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的可能修复机制。方法:SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,依据文献造模,造模后第3天,7天,14天各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测p38、MK2磷酸化蛋白及其mRNA水平表达差异。结果:Western blotting与RT-PCR检测结果趋势相同,在整个实验过程中,各组pp38、p-MK2、p38 m RNA、MK2 mRNA表达量随时间均呈下降趋势;创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组各组差异无统计学意义(P>0.05);造模后第7天,MEBO组表达量高于贝复济组,差异有统计学意义(P<0.05);造模后第14天,MEBO组、贝复济组组间比较无统计学差异(P>0.05),但与模型组相比均有显著差异(P<0.01),模型组仍处于高表达。结论:MEBT/MEBO通过下调p-p38、p-MK2蛋白表达水平,阻断部分信号转导,抑制被过度激活的p38MAPK信号通路,这可能是MEBT/MEBO对慢性难愈合创面的修复机制之一。
摘要:目的动态观察大鼠难愈性创面组织ERK1/2、ATF2蛋白表达变化,从磷酸化ERK1/2对激活ATF2的交互作用(crosstalk)角度,阐明皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进慢性难愈合创面修复的分子机制。方法 96只SD大鼠随机分为MEBO组、贝复济(rb-bFGF)组、模型组、空白对照组4组,各24只,创建体表皮肤溃疡模型,观察创面愈合情况,并于造模后第3d、7d、14d各取相同部位创面组织,采用Western Blotting技术检测磷酸化ERK1/2、ATF2蛋白表达水平。结果 MEBO组可见淡红色新生上皮由四周向创面中心生长,创面恢复良好。MEBO组和贝复济组创面愈合时间差异无统计学意义(P>0.05),均小于模型组(P<0.01);经14d治疗后,磷酸化ERK1/2及ATF2含量增高,同组内不同时间点ERK1/2、ATF2的表达差异有统计学意义(P<0.01),同时间点内不同组间的磷酸化ERK1/2、ATF2的表达差异有统计学意义(P<0.01),组间比较MEBO组和贝复济组磷酸化ERK1/2、ATF2的表达差异无统计学意义(P>0.05),但与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MEBT/MEBO能加快大鼠慢性难愈合创面的愈合速度,提高修复质量;MEBT/MEBO可能通过激活ERK1/2信号通路,调控磷酸化ERK1/2、ATF2表达水平,使ERK1/2激活p38信号通路的下游底物ATF2产生交互作用,共同促进慢性难愈合创面的修复。
摘要:目的动态观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中BMP-4表达的影响。方法通过随机数字表将90只SPF雄性大鼠随机分为MEBO组、阳性药组(贝复济组)、模型组、急创组和空白组,构建大鼠慢性难愈合创面模型后,MEBO组创面局部涂用湿润烧伤膏,贝复济组创面局部涂用贝复济,模型组和急创组局部涂用生理盐水,于治疗后第3 d、7 d、14 d应用Western blotting检测大鼠创面组织中BMP-4表达情况,于治疗后第14 d,应用Masson染色,观察创面局部病理学形态。结果 (1)除空白组外,其余各组BMP-4的表达水平均呈先升高后降低的趋势(P<0.01),同一时间,MEBO组及阳性药组创面组织中BMP-4的表达水平均高于模型组(P<0.05);(2)MEBO组及阳性药组创面组织病理学形态优于模型组。结论 MEBT/MEBO能有效影响大鼠创面组织中BMP-4表达水平,从而影响慢性难愈合创面修复的质量。
摘要:目的:观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中PTEN的动态调控作用,并探讨PTEN在慢性难愈合创面修复过程中的作用。方法:90只SD大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、慢创组、对照组、空白组5组,每组18只,建立体表皮肤溃疡模型,并分别于造模后第3天,第7天,第14天取创面组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测PTEN蛋白以及基因表达水平。结果:除空白组外,其余各组大鼠创面组织中PTEN表达均随时间递增而变化,差异有统计学意义(P<0.01);除14 d的各组大鼠创面组织中PTEN表达差异无统计学意义外,其余各时间点组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO能通过降低创面中PTEN蛋白和mRNA的表达水平,从而加速创面愈合。这可能是MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面修复的机制之一。