摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对糖尿病创面中TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路表达的影响。方法:将48只Wistar雄性大鼠随机平均分为对照组、模型组、美宝组和贝复新组。其中对照组构建急性创面模型,其余组构建糖尿病创面模型。随后美宝组和贝复新组分别采用湿润烧伤膏和重组牛碱性成纤维生长因子进行换药,对照组及模型组采取生理盐水进行换药。通过H&E染色、免疫荧光法及实时荧光定量PCR检测观察各组创面第3、7、14天愈合情况及TXNIP、NLRP3及Caspase-1表达情况。结果:(1)治疗第3天,对照组创面愈合率高于模型组,且具有统计学差异性(P<0.05);治疗第7、14天,对照组、美宝组和贝复新组创面愈合率高于模型组(P<0.05)。(2)治疗第3、7、14天,对照组、美宝组和贝复新组的TXNIP、NLRP3表达量低于模型组(P<0.05):治疗第3、7、14天,对照组和美宝组的Caspase-1表达量低于模型组(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO可通过抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路表达,减轻糖尿病创面的炎症反应,从而促进糖尿病创面的愈合。
摘要:目的 探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)是否通过调控糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞,影响α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-1)的表达水平,从而促进创面愈合。方法 90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为5组,空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组,每组18只,适应性喂养7 d后构建糖尿病模型,成模后统一制备创面。创面形成后第0天、第3天、第7天、第14天拍照记录创面愈合情况,每组随机取6只大鼠创面组织,进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化,免疫荧光观察创面组织α-SMA、COL-1的分布及表达情况,Western Blot检测创面组织α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。结果 (1)同一时间点组织学观察各组病理形态改善均优于模型组,治疗后期创面愈合率MEBO组、贝复新组优于模型组。(2)WB:与对照组比较,创面发生第3天、第7天、第14天过程中,模型组创面组织α-SMA、COL-1蛋白表达均明显下降(P<0.05);与模型组比较,创面第7天、第14天,MEBO组、贝复新组创面组织α-SMA、COL-1表达显著升高(P<0.05)。(3)免疫荧光:与对照组比较,第3天、第7天、第14天的模型组α-SMA蛋白表达均较低,其中第7天时具有显著性差异(P<0.05);模型组COL-1蛋白表达均显著偏低(P<0.05)。与模型组比较,第7天、第14天MEBO组、贝复新组α-SMA表达均较高(P<0.05),两用药组COL-1表达也较高,而贝复新组与模型组的比较差异有统计学意义(P<0.05),MEBO组COL-1表达介于模型组与对照组之间,但与模型组的比较差异不明显(P>0.05)。结论 MEBT/MEBO可能通过提高α-SMA和COL-1的蛋白表达水平,促进肌成纤维细胞转化及细胞外基质的沉积,从而加速糖尿病难愈合创面修复。
摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病难愈合创面的作用,并以α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平反映糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞转化程度,影响细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I,COL-1)的生成为切入点,通过动物及细胞实验探讨MEBT/MEBO促进糖尿病难愈合创面的具体机制,为MEBT/MEBO的临床应用及推广提供理论依据。方法:(1)90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为五组,空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组,每组18只,适应性喂养7天后应用STZ腹腔注射法诱导糖尿病大鼠模型,成模后再以全层皮肤缺损法统一制备创面。观察创面愈合情况,拍照记录创面形成后第0、3、7、14天的大鼠创面,并随机切取每组6只大鼠创面肉芽组织,进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化,免疫荧光观察α-SMA、COL-1的分布及表达情况,Western blot检测α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。(2)探讨MEBT/MEBO对大鼠真皮成纤维细胞(rat dermal fibroblasts,RDFs)的作用。首先用双酶法(中性蛋白酶+胰酶)分离提取Wistar大鼠幼崽皮肤真皮成纤维细胞,以HE染色观察细胞形态,免疫荧光法鉴定其波形蛋白(Vimentin)表达情况。以CCK8法摸索MEBO对RDFs的合适剂量,细胞实验分为低糖组、高糖组、溶剂组、低剂量MEBO组、高剂量MEBO组,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,实时定量PCR法检测α-SMA、COL-1的基因转录水平,Western blot法检测RDFs的α-SMA、COL-1蛋白表达水平。结果:(1)大鼠经STZ法诱导糖尿病模型后,出现典型“三多一少”症状,血糖明显升高达到糖尿病标准。与其他组相比,模型组大鼠出现创面愈合延迟(P<0.05),创面肉芽组织持续炎症浸润、血管新生不足、成纤维细胞数量低下及细胞外基质沉积减少等特征;治疗中后期创面愈合率:对照组(29)MEBO组=贝复新组(29)模型组。(2)WB:与对照组比较,创面发生第7、14天过程中,模型组创面组织α-...
摘要:目的 探讨皮肤再生医疗技术(湿润暴露烧伤疗法/湿润烧伤膏,MEBT/MEBO)治疗合并感染难愈合创面的疗效及对外周血内皮细胞生长因子(VEGF)、白细胞介素-4(IL-4)、IL-13及T淋巴细胞亚群的影响。方法选择2019年1月-2020年12月右江民族医学院附属医院收治的合并感染难愈合创面患者86例,随机分为研究组与对照组。对照组创面处外敷两层生理盐水纱布及两层消毒干纱布,研究组创面处涂抹MEBO后外敷两层生理盐水纱布及两层消毒干纱布。比较两组创面愈合情况,分析治疗前和治疗后3、7、14 d外周血VEGF、IL-4、IL-13及T淋巴细胞亚群水平变化。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析上述指标对创面愈合的预测价值。结果研究组愈合情况优于对照组(Z=-2.280,P=0.023)。治疗后3、7、14 d,研究组VEGF、CD4+、CD4+/CD8+均高于对照组(P<0.05),IL-4、IL-13、CD8+均低于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,治疗后3 d各指标对创面愈合不良均有较高的预测价值,联合检测的ROC曲线下面积(AUC)为0.904(95%CI:0.824~0.983)。结论 MEBT/MEBO治疗合并感染难愈合创面有更好的疗效,可更好降低创面炎症反应,增加创面免疫功能,促进肉芽组织增生及创面愈合,此外治疗后3 d多种指标联合对创面愈合有较好的预测价值。