摘要:目的:观察皮肤再生医疗技术(湿润暴露疗法,Moist exposed burn therapy,MEBT/湿润烧伤膏,Moist exposed burn ointment,MEBO)对糖尿病大鼠创面组织Smad信号通路中Smad1、Smad5表达的影响,探讨MEBT/MEBO促糖尿病创面愈合的机制。方法:将100只Wistar雄性大鼠随机分成空白组、对照组各20只,高血糖组60只,空白组不做干预,对照组建立创面模型,高血糖组先建立糖尿病模型,再建立创面模型,建模完成后随机分为模型组、贝复剂组和MEBO组各20只,模型组和对照组创面用生理盐水纱布湿敷,贝复济组创面使用重组牛碱性生长因子纱布湿敷,MEBO组使用MEBO药纱湿敷创面,分别在模型建立完成后的第1、5、11、18天,对比创面的愈合情况,记录创面体积大小,取创面肉芽组织进行实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-PCR)技术检测Smad1、Smad5m RNA的表达水平,蛋白印迹法(Western blot)技术测定了创面肉芽组织中Smad1、Smad5蛋白表达。结果:(1)创面愈合情况:对照组、MEBO组、贝复济组创面在造模第18天完全愈合,模型组造模第18天仍有部分创面未愈,对照组、MEBO组、贝复济组创面修复优于模型组,MEBO组较其余3组创面干燥,渗出较少。比较创面愈合率:造模第5天,MEBO组、贝复济组>对照组>模型组(P<0.05),造模第11天,MEBO组、贝复济组>对照组>模型组(P<0.05),造模第18天,MEBO组、贝复济组、对照组>模型组(P<0.05),对照组、MEBO组及贝复济组创面愈合率均高于模型组(P<0.05),对照组、MEBO组及贝复济组的创面愈合率在造模第5天达最高。(2)RT-PCR及Western blot结果显示,对照组、MEBO组及贝复济组的Smad1、Smad5m RNA及蛋白表达在造模第5天达高峰,表达量均高于模型组(P<0.05),后随时间逐渐降低,模型组Smad1、Smad5m RNA及蛋白表达随时间逐渐上升,造模第18天表达量最高(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO可有效促进糖尿病慢性创面愈合,其机制可能是MEBT/MEBO通过调控Smad1、Smad5表达,调控Smad信号通路,促进创面愈合。
摘要:目的 观察皮肤再生医疗技术[湿润暴露疗法(moist exposed burn therapy, MEBT)/湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)]对糖尿病大鼠创面骨形成蛋白(BMP)/Smad信号通路中Smad1表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的机制。方法 将90只Wistar大鼠随机分成对照组、模型组和MEBO组三个组,每组30只,对照组建立普通创面模型,模型组和MEBO组建立糖尿病创面模型,模型组和对照组采用生理盐水纱布湿敷换药,MEBO组采用MEBO干预创面,分别于治疗第1天、第5天、第11天,对比创面的愈合情况,取创面组织采用qRT-PCR技术检测Smad1的表达水平,免疫组化法检测大鼠创面中Smad1蛋白表达水平。结果 (1)治疗第5天、第11天,三组大鼠创面愈合率对比,MEBO组>对照组>模型组(P<0.05);(2)治疗第1天、第5天、第11天,模型组Smad1 mRNA表达均低于对照组,MEBO组Smad1 mRNA表达高于对照组(P<0.05),三组的Smad1 mRNA表达在治疗第5天降低,治疗第11天达到高峰;(3)免疫组化显示Smad1蛋白表达在第5天达到高峰。结论 MEBT/MEBO可促进糖尿病慢性创面愈合,其机制可能是通过调控Smad1表达和BMP/Smad信号通路。
摘要:目的 探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。方法 选取90只SPF级Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组,每组18只。其中空白组大鼠只做备皮处理,对照组大鼠建立急性创面模型,模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理,对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1蛋白与HO-1、NQO1 mRNA表达水平。结果 干预第3天,各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之(P均<0.05);干预第7、14天,各组大鼠创面愈合率尤以MEBO组最高、贝复新组次之(P均<0.05)。HE染色结果显示,干预第3、7、14天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少,成纤维细胞与毛细血管逐渐增多,而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显;Masson染色结果显示,干预第3、7、14天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整,而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多,但排列仍较紊乱。干预第7天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内MDA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第3、7天,对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内SOD表达水平均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7天,MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1、NQO1蛋白以及HO-1、NQO1 mRNA表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组(P均<0.05),且干预第7天,MEBO组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1蛋白以及HO-1 mRNA表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论 MEBT/MEBO可能能够通过激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤,促进创面再生修复。
摘要:目的研究探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的影响。方法将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(12只)、对照组(12只)、模型组(12只)、贝复新组(12只)及MEBO组(12只),其中,空白组大鼠做背部备皮处理后采用生理盐水纱布湿敷;对照组大鼠做深达筋膜层的全层皮肤缺损创面模型后采用生理盐水纱布覆盖治疗;模型组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用生理盐水纱布覆盖治疗;贝复新组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用贝复新治疗;MEBO组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用MEBO治疗。分别于治疗第3、7、14天取各组大鼠相同部位皮肤或创面组织进行HE染色,并用Western blot法检测组织中EGFR的含量,对比观察各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR的表达水平及组织病理变化。结果局部处理后第3、7天,除空白组外,其余各组大鼠创面组织HE染色病理切片均显示炎症细胞增多,有新生血管生成;局部处理后第14天,对照组、贝复新组、MEBO组大鼠创面组织中炎症细胞消失,创面再上皮化。局部处理后第3、7、14天,空白组大鼠背部皮肤组织中EGFR表达水平无明显变化,F=0.667,P>0.05,差异无统计学意义;对照组、模型组、贝复新组及MEBO组大鼠创面组织中EGFR表达水平变化均较明显,F值分别为79.546、89.600、63.036、56.628,P均<0.01,差异具有统计学意义,其中对照组、贝复新组及MEBO组大鼠创面组织中EGFR表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组则呈递增趋势;局部处理后第3、7、14天,各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR表达水平组间两两对比,除贝复新组与MEBO组对比,P>0.05,差异无统计学意义外,其余各组组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;局部处理后第3、7、14天,各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR表达水平多个样本均数对比,F值分别为57.036、134.368、92.829,P均<0.01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可通过上调大鼠慢性难愈合创面组织中EGFR的表达水平,促进慢性难愈合创面的愈合,能够为MEBT/MEBO治疗慢性难愈合...