摘要：目的:通过观察研究不同治疗方案下大鼠创面组织CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量。阐述皮肤原位再生医疗技术(Moist expose burn ointment/moist expose burn therapy,MEBT/MEBO)对慢性难愈合创面的治疗效果。同时进一步揭示MEBT/MEBO在改善慢性难愈合创面的部分作用机制。方法:本研究通过将90只SPF级wistar大鼠随机分为5组,分别为空白组(18只)、急创组(18只)、慢创组(18只)、rb-bFGF组(18只)及MEBO组(18只)。分别按照各组的要求对创面进行处理,于造模治疗后第3、7、14天采取大鼠创面组织。对3个时相点相同部位大鼠创面组织进行石蜡切片和Masson染色,观察对其各组大鼠创面组织形态学差异。运用western blot及RT-PCR法对第3、7、14天的大鼠创面组织的CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量进行检测并对比其差异。结果:(1)空白组大鼠创面组织镜下形态学未见明显改变。随着治疗周期的延长,大鼠创面组织水肿逐渐消退,新生血管明显增多,皮肤附属器官逐渐形成。在愈合过程中,急创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织明显优于慢创组大鼠创面组织。(2)Western Blotting:空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14的蛋白表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14蛋白的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7天、14天同组大鼠之间存在较明显的差异,不仅具有统计学意义(P<0.05),而且还呈现出一个逐渐增多的趋势。我们观察实验中第7天和第14天这两个时相点结果发现,rb-bFGF组和MEBO组这两组大鼠创面组织中所测得结果明显要优于慢创组,同样经过统计分析证明了其具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR:其表达结果和Western Blotting相符合,空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14 mRNA的表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14 mRNA的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7...

摘要：目的:我国有超过1.4亿糖尿病人,糖尿病药物研发在我国拥有巨大的市场需求,同时用于糖尿病药物研发的实验动物的需求也与日俱增。我们建立一种使用无脊椎动物家蚕(Bombyx mori)来构建糖尿病创面模型,探讨家蚕糖尿病创面愈合中PI3K-Akt信号通路的调控作用,为研究家蚕糖尿病创面模型提供一定的理论基础,为筛选治疗糖尿病创面的药物或疗法提供低成本的动物模型。方法:(1)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕36 h后,每间隔30 min测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,观察家蚕血淋巴葡萄糖耐量情况。(2)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕,每间隔12 h测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,称量家蚕的体重,观察建模后84 h家蚕体型变化,120 h结茧情况,评估不同浓度葡萄糖对家蚕生长的影响。(3)MEBT/MEBO作为阳性治疗对照组,收集家蚕创面组织进行苏木精-伊红染色和改良马松染色,观察家蚕创面组织的生长情况。(4)通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测家蚕创面组织中相关因子的转录及蛋白表达水平。结果:(1)家蚕血淋巴中葡萄糖浓度随着进食总体呈现先升高后降低,空腹时高糖各组血淋巴葡萄糖浓度高于空白组,高糖各组血淋巴葡萄糖达到峰值后快速下降,峰值2 h后血淋巴葡萄糖水平仍高于空腹值,表现出不同程度的糖耐量受损。(2)高糖各组家蚕与空白组的家蚕相比,体重增长缓慢,葡萄糖浓度越高,对生长影响越明显。(3)组织病理学结果显示空白组表皮、皮细胞和基膜层细胞无明显变化;对照组表皮增厚,皮细胞增多和基膜层完整,胶原纤维大量增生且排列致密;模型组表皮薄,基膜层不明显,皮细胞和胶原纤维增生,但是排列紊乱。(4)各组家蚕创面组织PI3K、Akt、m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量均先升高后降低;同时间段空白组表达量最低;12 h时MEBO组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);36 h时MEBO组PI3K、Akt的m RNA转录水平最高,对照组m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量最高,差异具有统计学意义(P<0.05);84 h时模型组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于MEBO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)用高浓度(35%和40%)葡萄糖混合桑叶喂养的家蚕更早表现出血淋巴葡萄糖耐量受损和生长受到抑制现象,能表现出稳...

摘要：目的:探索烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)治疗肉芽创面的疗效。方法:所属创面弃用常规外科换药和植皮手术疗法,应用MEBT/MEBO治疗,直至创面完全被新生皮肤覆盖。结果:MEBT/MEBO方法简便宜行、费用低,病人无痛苦,新生皮肤较平整。结论:MEBT/MEBO对任何损伤引起的难以愈合的肉芽创面,均有良好的治疗效果。

摘要：本文报告1994年3月至11月间以用MEBO治疗深度烧伤创面12例。烧伤面积在2％－98％，其中Ⅲ度烧伤在2％－82％。接受MEBO治疗观察的部位有胸部、背部、上臂、大腿、小腿、足背等处的深Ⅱ度浅Ⅲ度肉芽创面。所有病例均于用药前后取病理活检组织经光学镜和电镜观察，其结果从胶原纤维、纤维细胞到肥大细胞的变化均与国内外文献报道的结果对照有明显不同。说明MEBO对烧伤肉芽创面愈合后并不发生近期的增殖性疤痕。