摘要:目的采用RT-PCR检测方法观察皮肤原位再生复原技术(Moist Exposed BurnTreatment/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法将100只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和糖尿病造模组(80只),糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),成功制备糖尿病大鼠模型64只,从中随机选取60只,并随机分为湿润烧伤膏(MEBO)组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只)。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应的药物治疗,并记录创面愈合时间;用药6 d后,采用RT-PCR法观察记录创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA的表达量。结果 (1)4组大鼠创面平均愈合时间对比,空白对照组愈合时间最短;MEBO组、贝复济组、模型组3组大鼠创面平均愈合时间对比,MEBO组愈合时间最短。(2)用药后第6天,模型组大鼠创面肉芽组织中β-catenin mRNA的表达显著低于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠创面肉芽组织中Smad3 mRNA的表达显著高于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可抑制Smad3 mRNA、增强β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达,缩短创面愈合时间,促进糖尿病足溃疡创面的愈合。
摘要:目的:探讨皮肤医疗再生技术对慢性难愈合创面组织中核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响,来探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏影响慢性难愈合创面进程中是否涉及到NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα表达的相互作用,探讨MEBT/MEBO的部分作用机制,为临床应用MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面提供理论依据与技术壁垒。方法:(1)方法:选取SPF级别健康2月龄Wistar雄性大鼠,90只,体重范围235±15g,适应性喂养一周。用随机数法将90只大鼠分为5组,每组18只,分别是:空白组、对照组(急性全层皮肤缺损组)、模型组、MEBO组、贝复新组。慢性难愈合创面组包括模型组、MEBO组和贝复新组。空白组大鼠不作任何有损伤性处理;对照组大鼠行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;慢性难愈合创面组大鼠根据付小兵教授制备全层皮肤缺损模型结合沈氏改良塑料环肉芽肿定量法,经改进,建立大鼠慢性难愈合创面模型。所有组别除空白组外在造模后立刻用药处理。换药前,每组每天用1/5000呋西林溶液清洗两次。(2)在建立模型后的第3天、第7天、第14天分别每组麻醉6只大鼠取单侧标本,继续观察大鼠创面达到完全愈合时间,观察各组大鼠的创面情况、愈合时间及愈合率,通过HE染色观察大鼠模型创面内的炎症细胞变化及数量和Masson染色观察大鼠模型创面肉芽组织病理形态学变化、胶原蛋白的生成、组织中纤维以及炎性因子。(3)采用Western Blot检测细胞外基质成分中的NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达变化差异,观察各组受干预后对创面中NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα的表达的影响。(4)采用免疫荧光测定NF-κB p65入核荧光强度,间接性半定量观察炎症因子的表达趋势。结果:(1)干预第3、7天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P>0.05);干预第14天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P<0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异(P>0.05)。MEBO与对照组和贝复新组对比,创面愈合时间无明显差别(P>0.05),与模型组相比,MEBO组愈合时间明显短于模型组(P...
摘要:目的:探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及产品烧伤湿润膏(MEBO)对大鼠慢性皮肤溃疡肉芽组织 EGF、TGF-β1表达的影响,揭示MEBT/MEBO促进慢性皮肤溃疡愈合的机理。 方法:实验研究:健康成年SD雄性大鼠45只,简单随机抽样随机数字表法分为 MEBO组、凡士林组和模型组,每组15只。参照文献制成SD大鼠慢性皮肤溃疡模型,造模后第2天开始用药,观察用药后各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,记录创面愈合时间;换药后第7、14天取创面组织,在光学显微镜下观察创面生长情况,用免疫组织化学法(SP法)观察MEBO对创面肉芽组织EGF、TGF-β1表达的影响。 ...
摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对慢性创面组织信号转导和转录激活子6(STAT6)、细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)表达的影响。方法:取SPF级Wistar雄性大鼠54只,随机分为美宝组、贝复新组和模型组,每组18只。构建慢性难愈合创面大鼠模型,分别使用美宝、贝复新和生理盐水纱布覆盖创面。记录3组创面愈合时间及不同时点的创面愈合率,建模后第3、7、14天观察创面组织病理变化,实时定量PCR及免疫印迹法检测创面组织STAT6、SOCS1 mRNA及蛋白表达。结果:美宝组和贝复新组创面愈合时间均短于模型组(均P<0.05)。建模后第7天、第14天,美宝组和贝复新组创面愈合率均高于模型组(均P<0.05)。建模后第7天、第14天,Masson染色显示美宝组和贝复新组创面愈合情况优于模型组。免疫印迹及实时定量PCR显示,建模后第3天、第7天,美宝组和贝复新组STAT6 mRNA及蛋白表达均低于模型组,SOCS1 mRNA及蛋白表达均高于模型组(均P<0.05);建模后第14天,美宝组和贝复新组STAT6蛋白表达低于模型组(均P<0.05),STAT6 mRNA、SOCS1 mRNA及蛋白表达与模型组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:MEBT/MEBO可能通过调控STAT6、SOCS1表达而促进慢性创面愈合。