摘要：目的:观察MEBT/MEBO在糖尿病足溃疡大鼠创面愈合过程中的作用,探讨其促进创面愈合的作用机理。 方法:健康雄性SPF级SD大鼠100只,体重(200~250)g。常规饲养一周后,随机分为:空白对照组(20只)、糖尿病造模组(80只)。第一步,糖尿病大鼠模型制备:80只糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素STZ,制备糖尿病大鼠模型,7d后测血糖,血糖大于16.7mmol/L为糖尿病模型制备成功标准,成功64只,16只未达到糖尿病血糖值,从64只糖尿病模型制备成功的大鼠中随机选取60只,分为3组,每组20只:MEBT/MEBO组、贝复济组、模型组,以做进一步处理。第二步,全层皮肤缺损开放性创面模型制...

摘要：目的采用RT-PCR检测方法观察皮肤原位再生复原技术(Moist Exposed BurnTreatment/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法将100只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和糖尿病造模组(80只),糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),成功制备糖尿病大鼠模型64只,从中随机选取60只,并随机分为湿润烧伤膏(MEBO)组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只)。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应的药物治疗,并记录创面愈合时间;用药6 d后,采用RT-PCR法观察记录创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA的表达量。结果 (1)4组大鼠创面平均愈合时间对比,空白对照组愈合时间最短;MEBO组、贝复济组、模型组3组大鼠创面平均愈合时间对比,MEBO组愈合时间最短。(2)用药后第6天,模型组大鼠创面肉芽组织中β-catenin mRNA的表达显著低于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠创面肉芽组织中Smad3 mRNA的表达显著高于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可抑制Smad3 mRNA、增强β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达,缩短创面愈合时间,促进糖尿病足溃疡创面的愈合。

摘要：目的:通过对糖尿病大鼠创面中活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)、钙调神经磷酸酶(calcineurin,Ca N)以及白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)的表达水平进行研究,探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面中活化T细胞核因子-钙调神经磷酸酶信号通路表达的影响,以期为MEBT/MEBO在糖尿病创面治疗的相关基础研究与临床应用上提供更多有价值的参考数据。方法:(1)分笼饲养SPF级Wistar雄性大鼠48只,适应性喂养一周后根据随机数字表法将大鼠随机分为4组,依次为对照组、模型组、美宝组(MEBT/MEBO治疗组)、贝复新组,每组12只大鼠。各组大鼠均禁食不禁水12小时,将其中模型组、美宝组和贝复新组造糖尿病大鼠模型,腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液稀释的等剂量链脲佐菌素溶液,而对照组仅注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液;注射3天后从大鼠尾端采血检测其空腹血糖,以空腹血糖大于16.7mmol/L为标准制成糖尿病大鼠模型,随后将四组大鼠按全层皮肤缺损法制备创面,建成糖尿病大鼠创面模型(模型组、美宝组、贝复新组)和大鼠急性创面模型(对照组)。(2)各组模型建立完成后先用呋喃西林液清洁创面,将对照组大鼠和模型组大鼠创面外敷两层生理盐水纱布,美宝组大鼠创面外敷两层美宝纱布,贝复新组大鼠创面外敷两层贝复新纱布,随后所有组别大鼠均加盖两层消毒干纱布并以胶布固定,每日进行更换鼠笼及垫料1次、换药操作2次以保持环境与创面清洁。(3)于第3、7、14天共3个时相点各组分别随机取4只大鼠断颈处死并取材,用直尺测量创面直径并作为参照物拍照记录所有大鼠的创面愈合情况,收集所有时相点的照片后用Image J软件测算所有大鼠不同时相的创面大小,以时相为分组进行创面愈合率计算。取距离创缘0.5cm的整个创面及周围组织,取出的组织用组织剪将其剪为两半,其中一半组织用称量纸包裹并置于盛有4%多聚甲醛离心管中,24小时后转移至70%无水乙醇中,再制成组织石蜡蜡块以备后续HE染色实验和免疫荧光实验使用。另一半剪为合适大小的组织块放入冻存管中,随即迅速放置入装有液氮的容器内并转移至-80℃冰箱冻存。(4)HE染色观察创面肉芽组织生长形态及病...

摘要：目的 探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面中钙调神经磷酸酶(CaN)/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路表达的影响。方法 分笼饲养无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠48只，根据随机数字表法分为对照组、模型组(糖尿病大鼠创面模型)、美宝组(糖尿病大鼠创面模型+MEBT/MEBO治疗)、贝复新组(糖尿病大鼠创面模型+贝复新治疗),其中，治疗组于模型制作成功后立即给药。于3、7、14 d时各组随机抽取4只大鼠取材，拍照记录其创面愈合情况，进行创面愈合率计算、苏木精-伊红(HE)染色、实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)、免疫荧光染色检测，采用单因素方差分析法、LSD检验法做统计学分析。结果 3 d时，对照组和模型组创面愈合率有明显差异(P<0.05);7、14 d时，与模型组相比，对照组、美宝组和贝复新组创面愈合率更高(P<0.05)。3、7、14 d时，对照组、美宝组和贝复新组中NFAT、CaN表达水平明显高于模型组，对照组、美宝组中NFAT mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05);14 d时，对照组NFAT mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05)。3、7、14 d时，模型组IL-2表达水平较对照组、美宝组、贝复新组更高。结论 MEBT/MEBO可能通过上调CaN/NFAT信号通路的表达促进糖尿病大鼠创面愈合。