摘要：目的 基于miR-126a-3p调控探讨皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠慢性创面血管新生的影响。方法 72只SPF级Wistar雄性大鼠，随机均分为对照组、模型组及MEBO组。构建急性创面和糖尿病慢性创面模型，对照组和模型组均用生理盐水处理，MEBO组用MEBO处理。对比各组创面愈合率，形态学变化，毛细血管数及miR-126a-3p表达量。结果 治疗后第11天及第18天，各组创面愈合率从大到小排列为对照组、MEBO组、模型组，并且，治疗后第18天各组大鼠创面愈合率均高于第11天(P均<0.001)。治疗后第18天模型组和MEBO组毛细血管数量相对于治疗后第1天均明显增加(P<0.001),但MEBO组毛细血管数量增加比模型组更明显(P<0.001)。治疗后第18天，与模型组相比，MEBO组创面组织中miR-126a-3p表达量显著增加(P<0.001)。结论 MEBT/MEBO可能通过上调miR-126a-3p促血管新生，从而促进糖尿病慢性创面愈合。

摘要：目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的可能机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机分为对照组、模型组和MEBO组,每组30只,其中对照组大鼠建立常规创面模型,模型组和MEBO组大鼠建立糖尿病创面模型。模型建立后,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布外敷治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱外敷治疗。分别于治疗第1、11、18天采用Western blotting法检测ULK1蛋白及qRT-PCR技术检测ULK1 mRNA的表达水平,并对比观察3组大鼠创面愈合情况。结果(1)治疗第1天,3组大鼠创面均淤血水肿,无肉芽组织形成;治疗第11天,对照组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成,模型组大鼠创面高度水肿,无肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成;治疗第18天,对照组大鼠创面完全愈合,模型组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成。(2)治疗第11、18天,3组大鼠创面愈合率对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第1天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组=模型组,对照组与MEBO组及对照组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第11天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第18天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组=MEBO组<模型组,对照组与模型组及MEBO组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,提高创面组织中ULK1表达水平,诱导细胞自噬可能是其作用机制之一。

摘要：目的:建立糖尿病大鼠创面动物模型,以MMPs/TIMP系统为切入点,探讨皮肤再生医疗技术(湿润暴露疗法/湿润烧伤膏;Moist exposed burn therapy,MEBT/Moist exposed burn ointment,MEBO)促进糖尿病创面愈合的作用机制,为MEBT/MEBO干预糖尿病创面修复提供理论依据,进一步指导临床。方法:110只SPF级雄性SD大鼠,随机选取86只大鼠制备糖尿病模型,其余24只大鼠正常喂养。糖尿病模型采用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备,高脂高糖饲料喂养4周后,禁食12 h,腹腔注射STZ(40mg/kg,1ml/kg),48h后再一次腹腔注射STZ(40mg/kg,1ml/kg)。糖尿病造模后随机血糖≥16.7 mmol/L,且体重明显下降则视为糖尿病大鼠模型诱导成功。糖尿病模型诱导成功后进行大鼠创面模型的制备,随机选取造模成功的糖尿病大鼠(72只)和正常大鼠(24只)制备创面模型,在大鼠背部印出18mm大小圆形标记,剪除其全层皮肤,深至筋膜,制备创面模型。创面制备结束后,将糖尿病大鼠创面模型分成模型组、MEBO组、贝复济组,每组各24只;正常大鼠创面模型为空白组,24只。各组大鼠每日换药,于干预治疗后第4d、6d和12d分别选取8只大鼠,观察创面情况,并计算创面愈合速率,麻醉后取相同位点的创面组织,用于开展病理检测和实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western Bolt检测。结果:(1)大鼠体重、血糖水平情况:糖尿病造模前,正常组和糖尿病模型组体重、血糖比较差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病造模后,糖尿病模型组平均血糖大于16.7 mmol/L,血糖水平显著高于正常组,差异具有统计学意义(P<0.01),且体重显著低于正常组,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)创面愈合率:在第4d、6d和12d,空白组>MEBO组和贝复济组>模型组。第4d、6d和12d,空白组创面愈合率均高于模型组、MEBO组和贝复济组,差异均有统计学意义(P<0.01);MEBO组和贝复济组创面愈合率均高于模型组,差异均有具有统计学意义(P<0.01)。(3)创面病理显示:在第4d和第6d,模型组胶原纤维含量较少,炎性细胞浸润较多;空白组、MEBO组胶原纤维含量较多且炎性细胞浸润较少。第12d,空白组胶原纤维丰富致密、排列规整;...

摘要：目的 探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。方法 选取90只SPF级Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后，采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组，每组18只。其中空白组大鼠只做备皮处理，对照组大鼠建立急性创面模型，模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后，空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理，MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理，贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理，对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1蛋白与HO-1、NQO1 mRNA表达水平。结果 干预第3天，各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之(P均<0.05);干预第7、14天，各组大鼠创面愈合率尤以MEBO组最高、贝复新组次之(P均<0.05)。HE染色结果显示，干预第3、7、14天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少，成纤维细胞与毛细血管逐渐增多，而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显；Masson染色结果显示，干预第3、7、14天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整，而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多，但排列仍较紊乱。干预第7天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内MDA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第3、7天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内SOD表达水平均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7天，MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1、NQO1蛋白以及HO-1、NQO1 mRNA表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组(P均<0.05),且干预第7天，MEBO组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1蛋白以及HO-1 mRNA表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论 MEBT/MEBO可能能够通过激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤，促进创面再生修复。