摘要：目的:通过对大鼠慢性难愈性创面组织中基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-Derived Factor-l,SDF-1)、趋化因子受体4(C-X-C Chemokine Receptor Type 4,CXCR4)表达水平的研究,来探讨烧伤疮疡再生技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对加速慢性难愈合创面的修复进程的部分机制。方法:(1)SPF级雄性Wistar大鼠90只按随机数表法将实验动物随机分为空白组(KBZ组)、急性组(JXZ组)、模型组(MXZ组)、贝复新组(BFZ组)和MEBO组(MBZ组),每组十八只,空白组皮肤只剃毛,不作其他皮肤损伤处理,急性组做全层皮肤处理,建立急性创面,模型组、MEBO组和贝复新组参照付小兵等全层皮肤缺损法和沈氏改良塑料环肉芽肿定量法建立慢性难愈合创面模型。(2)造模成功后创面处理:JXZ组、MXZ组创面予以生理盐水纱布覆盖,BFZ组创面予以贝复新药物干预,MBZ组创面予以MEBT/MEBO干预。创面换药前均以1/5000呋喃西林液消毒处理,换药频率2次/日。(3)动物模型制备完成后,分别于3d、7d、14d,每组随机选取6只大鼠,麻醉后切取整个创面肉芽组织,标本一部分放入甲醛中固定,之后行HE染色、Masson染色,余创面组织置入-80℃冰箱,用于之后行Real-time q PCR、Western Blot检测创面组织中SDF-1、CXCR4m RNA表达水平及蛋白表达水平。结果:(1)创面愈合情况观察:造模第3天,四组创面基本未见明显愈合,JXZ组创面少量新鲜肉芽组织,MXZ组、MBZ组、BFZ组创面未见明显肉芽组织,其中MXZ组创面渗出较多,水肿明显。造模第7天,除MXZ组,其他三组创面有缩小,JXZ组最明显,JXZ组创面肉芽组织鲜红色,无渗液水肿,MBZ组与BFZ组创面肉芽较前新鲜,无渗液,MXZ组创面少量渗出、水肿,且可见坏死组织。造模第14天,JXZ组创面基本愈合,部分MBZ组、BFZ组创面接近愈合,创面肉芽组织新鲜,创面上皮化明显,MXZ组创面明显缩小,创面可见较多新鲜肉芽组织,无渗液、水肿。(2)创面愈合率:造模成功后,第3天、7天、14天,MXZ组创面愈合率与JXZ组、MBZ组、BFZ组均有差别(P<0.05),且MBZ组、BFZ组愈合率无明显差别(...

摘要：目的:观察皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、磷酸化smad3(P-smad3)表达及形态学结构的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、贝复济组和MEBT/MEBO组,每组各20只。模型组、MEBT/MEBO组和贝复济组大鼠参照糖尿病模型制备法,采用腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素,建立糖尿病动物模型;空白对照组大鼠则腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。分别于干预治疗后第5、14天各取相同部位创面组织,采用Western blot法检测TGF-β1、Smad3和P-smad3蛋白表达水平,常规病理技术观察溃疡创面组织形态学结构,各组间差异比较采用方差分析和秩和检验。结果:治疗后5 d,各组大鼠Smad3蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(F=1.036,P=0.388);MEBT/MEBO组、贝复济组的大鼠TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平则均明显低于空白对照组(P=0.005、P=0.026,P=0.001、P=0.005);而且,上述2组大鼠的TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平亦明显高于模型组(P=0.000);此外,与第5天结果相比,第14天MEBT/MEBO组与贝复济组的TGF-β1、P-smad3表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P=0.000)。治疗后第5天,MEBT/MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞形态、毛细血管新生情况优于模型组,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,空白对照组胶原纤维增生明显但排列紊乱,模型组胶原纤维呈团状增生。结论:MEBT/MEBO在创面愈合早期可激活TGF-β1/Smad3信号通路,促进创面损伤修复,而在愈合晚期则抑制该信号通路的活化,控制创面组织过度增生。

摘要：目的:我国有超过1.4亿糖尿病人,糖尿病药物研发在我国拥有巨大的市场需求,同时用于糖尿病药物研发的实验动物的需求也与日俱增。我们建立一种使用无脊椎动物家蚕(Bombyx mori)来构建糖尿病创面模型,探讨家蚕糖尿病创面愈合中PI3K-Akt信号通路的调控作用,为研究家蚕糖尿病创面模型提供一定的理论基础,为筛选治疗糖尿病创面的药物或疗法提供低成本的动物模型。方法:(1)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕36 h后,每间隔30 min测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,观察家蚕血淋巴葡萄糖耐量情况。(2)不同浓度的葡萄糖混合桑叶饲养家蚕,每间隔12 h测量家蚕餐后血淋巴葡萄糖水平,称量家蚕的体重,观察建模后84 h家蚕体型变化,120 h结茧情况,评估不同浓度葡萄糖对家蚕生长的影响。(3)MEBT/MEBO作为阳性治疗对照组,收集家蚕创面组织进行苏木精-伊红染色和改良马松染色,观察家蚕创面组织的生长情况。(4)通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测家蚕创面组织中相关因子的转录及蛋白表达水平。结果:(1)家蚕血淋巴中葡萄糖浓度随着进食总体呈现先升高后降低,空腹时高糖各组血淋巴葡萄糖浓度高于空白组,高糖各组血淋巴葡萄糖达到峰值后快速下降,峰值2 h后血淋巴葡萄糖水平仍高于空腹值,表现出不同程度的糖耐量受损。(2)高糖各组家蚕与空白组的家蚕相比,体重增长缓慢,葡萄糖浓度越高,对生长影响越明显。(3)组织病理学结果显示空白组表皮、皮细胞和基膜层细胞无明显变化;对照组表皮增厚,皮细胞增多和基膜层完整,胶原纤维大量增生且排列致密;模型组表皮薄,基膜层不明显,皮细胞和胶原纤维增生,但是排列紊乱。(4)各组家蚕创面组织PI3K、Akt、m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量均先升高后降低;同时间段空白组表达量最低;12 h时MEBO组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);36 h时MEBO组PI3K、Akt的m RNA转录水平最高,对照组m TOR的m RNA转录水平和PI3K、Akt的蛋白表达量最高,差异具有统计学意义(P<0.05);84 h时模型组m RNA转录水平和蛋白表达量高,对照组高于MEBO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)用高浓度(35%和40%)葡萄糖混合桑叶喂养的家蚕更早表现出血淋巴葡萄糖耐量受损和生长受到抑制现象,能表现出稳...