摘要：目的:通过检测不同干预方案下大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白15(cytokeratin-15 CK15)与细胞角蛋白19(cytokeratin-19 CK19)的动态表达,探讨完善皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进创面愈合的部分分子学机制,从而为其在临床治疗上推广应用提供理论支持。方法:将90只健康成年Wistar雄性大鼠(SPF级)随机分为空白组(18只)、急创对照组(18只)、慢创模型组(18只)、MEBO组(18只)和Rb-b FGF(18只)。其中空白组不做损伤处理,急创对照组做急性全层皮肤缺损创面模型,慢创模型组、MEBO组和Rb-b FGF组在急创对照组基础上注射氢化可的松,制备慢性难愈合创面模型。模型建立后给予创面换药,每日两次。急创对照组与慢创模型组创面给予碘伏消毒,MEBO组碘伏消毒后涂抹MEBO治疗,Rb-b FGF组碘伏消毒后涂抹重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel Rb-b FGF)治疗。最后分别于治疗后第3,7,14天在各组中分别随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后,完整切取创面肉芽组织。一部分组织给予甲醛固定,之后进行HE染色。其余组织投入-80℃冰箱。所有时相点组织收集完毕后,应用Western Blotting技术以及Real Time PCR技术统一检测、对比各组大鼠创面组织中CK15、CK19蛋白表达量及CK15、CK19m RNA的转录水平。结果:(1)HE染色,各组样本HE染色后显微镜下观察,空白组未见变化,均为正常皮肤组织学形态。在造模后的第3天,急创对照组组织水肿,同时可见大量中性粒细胞浸润。慢创模型组,MEBO组,Rb-b FGF组组织间水肿,少量淋巴细胞浸润。在造模后的第7天,急创对照组镜下见中性粒细胞减少,组织间水肿减轻,少量毛细血管再生。MEBO组,Rb-b FGF组淋巴浸润情况亦有所减少,组织间水肿有所改善,除血管新生外,还可见少量毛囊。而慢创模型组淋巴细胞浸润程度未见减轻,组织水肿仍明显,缺乏新生毛细血管。在造模后的第14天,急创对照组,MEBO组,Rb-b FGF组组织无炎性细胞浸润,水肿不明显,可见新生的分层表皮结构,同时可见毛囊、皮脂腺...

摘要：目的:通过对大鼠慢性难愈性创面组织中基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-Derived Factor-l,SDF-1)、趋化因子受体4(C-X-C Chemokine Receptor Type 4,CXCR4)表达水平的研究,来探讨烧伤疮疡再生技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对加速慢性难愈合创面的修复进程的部分机制。方法:(1)SPF级雄性Wistar大鼠90只按随机数表法将实验动物随机分为空白组(KBZ组)、急性组(JXZ组)、模型组(MXZ组)、贝复新组(BFZ组)和MEBO组(MBZ组),每组十八只,空白组皮肤只剃毛,不作其他皮肤损伤处理,急性组做全层皮肤处理,建立急性创面,模型组、MEBO组和贝复新组参照付小兵等全层皮肤缺损法和沈氏改良塑料环肉芽肿定量法建立慢性难愈合创面模型。(2)造模成功后创面处理:JXZ组、MXZ组创面予以生理盐水纱布覆盖,BFZ组创面予以贝复新药物干预,MBZ组创面予以MEBT/MEBO干预。创面换药前均以1/5000呋喃西林液消毒处理,换药频率2次/日。(3)动物模型制备完成后,分别于3d、7d、14d,每组随机选取6只大鼠,麻醉后切取整个创面肉芽组织,标本一部分放入甲醛中固定,之后行HE染色、Masson染色,余创面组织置入-80℃冰箱,用于之后行Real-time q PCR、Western Blot检测创面组织中SDF-1、CXCR4m RNA表达水平及蛋白表达水平。结果:(1)创面愈合情况观察:造模第3天,四组创面基本未见明显愈合,JXZ组创面少量新鲜肉芽组织,MXZ组、MBZ组、BFZ组创面未见明显肉芽组织,其中MXZ组创面渗出较多,水肿明显。造模第7天,除MXZ组,其他三组创面有缩小,JXZ组最明显,JXZ组创面肉芽组织鲜红色,无渗液水肿,MBZ组与BFZ组创面肉芽较前新鲜,无渗液,MXZ组创面少量渗出、水肿,且可见坏死组织。造模第14天,JXZ组创面基本愈合,部分MBZ组、BFZ组创面接近愈合,创面肉芽组织新鲜,创面上皮化明显,MXZ组创面明显缩小,创面可见较多新鲜肉芽组织,无渗液、水肿。(2)创面愈合率:造模成功后,第3天、7天、14天,MXZ组创面愈合率与JXZ组、MBZ组、BFZ组均有差别(P<0.05),且MBZ组、BFZ组愈合率无明显差别(...

摘要：目的:探讨不同干预措施对大鼠慢性难愈合创面细胞焦亡相关因子Caspase-1和IL-18表达的影响,完善皮肤再生医学技术在慢性难愈合创面中的作用机制,为临床应用及推广提供更多的理论依据。方法:(1)取健康成年SPF级Wistar雄性大鼠90只,12周龄,体重220g～250g,适应性喂养1周后,随机分为:空白组(Blank)、急创组(Acute)、美宝组(MEBO)、贝复济组(rb-b FGF)、模型组(Model),每组18只。其中空白组仅做背部脊柱两侧备皮处理,急创组直接进行背部皮肤剪除,建立急性损伤模型,并湿敷生理盐水纱布,其余三组大鼠制备慢性难愈合创面模型,分别用湿润烧伤膏、贝复济,生理盐水湿敷创面治疗。造模后第3、7、14天分别切取创面肉芽组织,部分置于甲醛液及电镜液中固定,待病理HE染色,免疫荧光及电镜实验时取用。其余创面标本置于-80℃冰箱,用于Western Blotting和Real-Time PCR检测,对比各组大鼠创面IL-18及Caspase-1蛋白表达情况及mRNA转录水平。结果:(1)创面愈合情况:治疗后第3天,各组大鼠创面愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后第7天和第14天,急创组、贝复济组、美宝组大鼠创面愈合率和模型组比较均明显升高(P<0.05),美宝组与贝复济组比较无差异(P>0.05)。急创组在第14天愈合效果最好。(2)HE染色情况:急创组、贝复济组、美宝组的组织形态学结构均优于模型组。(3)电镜观察情况:电镜观察显示模型组、美宝组中均存在细胞胀大、细胞破损、胞液稀疏、着色较浅、胞膜不连续,膜孔形成的细胞焦亡特征。(4)免疫荧光染色结果:Caspase-1在造模后第3天的急性组、贝复济组、美宝组,模型组中均有不同程度表达,其中模型组表达明显;造模后第7天和第14天,其余各组表达均明显减少,而模型组相对其他组仍然明显表达。(5)Western Blotting和Real-Time PCR检测情况:(1)治疗后第3、7、14天,空白组各时间点IL-18蛋白表达水平无明显变化,P>0.05,差异无统计学意义;急创组、贝复济组、美宝组、模型组:大鼠创面组织内IL-18蛋白表达水平先升高后降低;各组对比情况:第3天:空白组、模型组分别和其余四组比较有统计学差异P<0.05,急创组、贝复济组、美宝组两两比较无统计学差异。第7天:空白组、模型组分别和其余四组比较有统计学差异...

摘要：目的 :探讨一种在应用烧伤皮肤再生疗法 (BRT)中 ,效果好且能减少工作量、减轻劳动强度的烧伤创面处理方法。方法 :随机将 2 75例患者分为 :A组 12 8例 (治疗组 ) ,B组 14 7例 (对照组 ) ,B组采用单纯的创面涂药法 ,4～ 6h换药一次 ,A组采用MEBO药纱覆盖创面 ,8～ 12h换药一次 ,发现药膏不足适时补药。结果 :两组的止痛效果、创面愈合时间和愈合效果差异无显著性 (P >00 5 ) ,有效减少换药次数和减轻劳动强度。结论 :MEBO药纱具有网格固定药膏 ,避免药液流淌、丢失以及吸附、交换、引流分泌物及坏死组织液化物的作用 ,实现减少换药次数、减少工作量、减轻劳动强度 ,是一种应用BRT过程中可行的创面处理方法