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学位论文
默克尔细胞局部注射联合MEBO外用对大鼠足底创面神经再生的实验研究
游兴; 魏在荣 遵义医学院 遵义医学院 2017

摘要:目的:通过对S D大鼠默克尔细胞(merkel cell,MCs)的提取、分离、培养及鉴定,观察局部注射MCs联合美宝湿润烧伤膏(MEBO)外用对大鼠足底创面神经再生的影响。方法:1)取新生SD大鼠(1~3d)足垫、须垫及背部皮肤,采用酶消化法分离提取MCs,接种于多聚赖氨酸(PLL)包被的培养瓶内,通过细胞免疫组织化学法测定细胞角蛋白CK20的表达,qPCR检测MCs中Piezo2 mRNA的表达,ELISA法检测培养第2d、4d、6d、8d、10d细胞分泌CGRP情况。2)建立SD大鼠足底创面模型,按照干预方式的不同分为如下五组:A组(MCs注射+MEBO组);B组(MCs局部注射组);C组(MEBO外用组);D组(阴性对照组);E组(鼠神经生长因子注射阳性对照组)。细胞组用MCs 1×106个/mL分别注射于创面基底中央及创缘3、6、9、12点标记处,24小时后追加1次,每次每个部位25μL;MEBO组按相应分组给予MEBO外用,每日换药一次,直至创面愈合。阳性及空白对照组分别予等体积鼠神经生长因子及PBS注射。观察创面愈合时间,计算各组创面各时间点愈合率,棉拭子检测足底感觉恢复情况,分别于干预后7d、14d、21d三个时相各组分别随机抽取6只大鼠,切取组织,制作石蜡切片,免疫荧光染色观察新生皮肤神经纤维生长情况。3)每组大鼠均于造模后第7d、14d、21d时用棉拭子检测大鼠足底缩足反射,记录、统计缩足次数并计算百分比。结果:1)采用中性蛋白酶和胰酶依次消化SD大鼠足底及须垫部位所取皮肤组织可得到较多MCs,以CK20做细胞免疫化学染色可见MCs呈阳性反应。2)实验中应用中性蛋白酶及胰酶双酶消化法可得到MCs,以Ham,s F-12培养基为基础培养基,加入20ng/ml bFGF可使MCs稳定增殖;qPCR结果示MCs中Piezo2 mRNA的表达量为:0.0270±0.0042;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测检测MCs上清液中降钙素基因相关肽(CGRP)在培养第2、4、6、8、10天浓度随培养时间的延长逐渐增加,培养第6d到8d时增加速率更快,间接提示默克尔细胞增殖情况。3)创面愈合方面,大体观察肿胀程度及炎性反应程度无明显区别,总愈合时间上应用MEBO的两组创面较其他实验组提前,A组E组愈合时间分别为14.33±0.69天、16.44±0.86天、14.83±0.71天、1...

期刊论文
黄蜀葵提取物对大鼠背部深Ⅱ度烫伤的治疗作用
宋必卫; 刘洁琼; 章方珺; 杨轶安; 付再林 浙江工业大学药学院; 浙江工业大学学报 2017

摘要:为观察黄蜀葵提取物(HSK)促进SD大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合作用,利用超级控温烫伤仪制备大鼠深Ⅱ度烫伤模型,以美宝湿润烧伤膏(MEBO)为阳性药,观察烫伤皮肤创面外涂HSK后开始结痂和脱痂时间、愈合时间、创面愈合率和瘢痕形成情况,并取烫伤部位全层皮肤做HE染色切片观察组织损伤和修复状况.结果显示:与模型组相比,HSK给药组大鼠烫伤创面开始结痂、脱痂及完全愈合的时间均明显缩短,各时间点创面愈合率显著提高,烫伤创面愈后瘢痕面积显著减小,烫伤皮肤病理形态显著改善.结果表明:HSK能显著促进烫伤创面的愈合,是一种良好的外用烫伤治疗药物.

瘢痕 疤痕
期刊论文
铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素对深Ⅱ度烧伤模型大鼠皮肤修复作用的研究
王军杰; 王静; 许天人; 娄艳红; 任丽君; 周水勇; 徐茗圆 河南省直第三人民医院整复外科; 医药论坛杂志 2024

摘要:目的 探究铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(pseudomonas aeruginosa mannose-sensitive hemagglutinin, PA-MSHA)对深Ⅱ度烧伤模型大鼠皮肤的修复作用,通过对不同剂量PA-MSHA的应用,观察其对烧伤创面愈合速度以及组织病理学变化,以期为烧伤治疗提供新的治疗思路。方法 采用控温烫伤仪构建深Ⅱ度烧伤模型大鼠,将造模成功的大鼠随机分为生理盐水组、湿润烧伤膏组、PA-MSHA 8×10~8/mL组、20×10~8/mL组、50×10~8/mL组、125×10~8/mL组,每组10只。各给药组大鼠分别给予相应药物,每天上、下午给药2次,持续给药至伤口愈合,观察各组大鼠烧伤创面愈合情况和烧伤皮肤组织病理形态学变化。结果 与生理盐水组相比,PA-MSHA 125×10~8/mL组在第7天、第14天可见烧伤面积的缩小,差异具有统计学意义(P<0.05);与生理盐水组相比,湿润烧伤膏组烧伤面积增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。烧伤治疗后期,生理盐水和PA-MSHA药物治疗组的烧伤面积未见显著性差异(P>0.05)。与生理盐水组比较,湿润烧伤膏组和PA-MSHA各剂量组皮肤组织可见较厚的新生表皮层,真皮层中结缔组织和新生血管均明显增多。结论 PA-MSHA可修复深Ⅱ度烧伤模型大鼠皮肤,其机制可能与减轻烧伤创面炎症反应,促进血管新生有关。

期刊论文
迪康凝胶对大鼠烫伤创面的治疗作用及可能机制研究
崔博慧; 李龙; 黄凌远; 罗丹; 赵婵娟; 孙小青; 牟妍希; 王志军 大连大学整形外科研究所;成都里来生物科技有限公司;四川大学华西第二医院; 成都医学院学报 2017

摘要:目的探讨迪康凝胶对烫伤大鼠创面愈合的效果及作用机制。方法将SD大鼠随机分为模型组、美宝烫伤膏组、迪康凝胶组,3组均采用超级控温烫伤仪,造背部深Ⅱ度烫伤。模型组不给药,其余给药1次/d,连续21d。连续考察21d内创面愈合情况及创面病理组织形态。ELISA法检测组织TNF-α和IL-8及Ⅰ、Ⅲ型胶原。RT-PCR检测组织TNF-α和IL-8表达水平。结果与模型组比较,迪康凝胶组愈合时间缩短(P<0.05,P<0.01),创伤愈合率增高(P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义。组织学观察证明,迪康凝胶具有良好的组织损伤修复作用。ELISA检测表明,烫伤后两药物组创面组织TNF-α和IL-8含量均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);而胶原Ⅰ、Ⅲ组织含量均高于模型组。RT-PCR检测表明,两药物组组织TNF-αmRNA和IL-8mRNA表达水平均与其蛋白浓度水平基本一致。结论迪康凝胶能促进大鼠皮肤烫伤后创面愈合,是治疗烫伤创面的有效药物。

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