摘要:目的观察外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)凝胶与注射用重组人生长激素(rhGH)联合应用对实验性烫伤动物的疗效。方法将脱毛的Wistar大鼠背部皮肤浸入(85±1)℃恒温水浴中持续15s,造成深Ⅱ度烫伤。大鼠烫伤部位分别涂抹外用rhGM-CSF凝胶、易孚凝胶、美宝湿润烧伤膏、磺胺嘧啶银、医用凡士林膏,金因肽组用金因肽喷湿创面,rhGH组和GM+GH组在烫伤后24h开始皮下注射rhGH。各组每天给药1次,连续用药25d。每5d用透明硫酸纸描绘烫伤皮肤面积,并称重,计算烫伤皮肤愈合率;烫伤后6h、9d和25d,各组随机选取3只大鼠,对其烫伤创面进行病理学检查。结果从给药第10天开始,各给药组大鼠烫伤皮肤愈合率均比模型组明显提高;以GM+GH组最高。病理学观察显示,烫伤后25d,各给药组大鼠绝大多数创面表皮细胞增生明显,真皮层可见毛囊、皮脂腺腺体修复,GM+GH组炎细胞浸润不明显,模型组多见化脓性炎症改变,并见脓肿灶形成。结论各给药组均可减轻烫伤后炎症反应,促进烫伤皮肤愈合,对深Ⅱ度烫伤大鼠皮肤有明显治疗作用,其中以外用rhGM-CSF凝胶联合应用rhGH的治疗效果最好。
摘要:目的 探讨复方雪莲烧伤膏对深Ⅱ度烫伤大鼠模型创面愈合的作用和机制,为临床应用其治疗深Ⅱ度烫伤提供可靠的数据支持。方法 将70只成年健康的SD大鼠随机分为A组(假烫伤组)10只、B组(单纯烫伤组)20只、C组(烧伤湿润膏对照组)20只和D组(复方雪莲烧伤膏组)20只,制备深Ⅱ度烫伤模型,A组除常规喂养外不做任何处理,B组给予创面外敷凡士林,C组给予创面外敷烧伤湿润膏,D组给予创面外敷复方雪莲烧伤膏。观察各组创面愈合时间和创面愈合率,于造模后第4、7、10、14天取材,检测各组创面组织含水量、CD68巨噬细胞含量、血管内皮生长因子(VEGF)、VEGFmRNA相对表达量和bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果 D组创面愈合时间短于B、C组,创面愈合率高于B、C组,创面组织含水量少于B、C组(均P<0.05);D组创面组织中VEGF含量、VEGFmRNA的相对表达量和bcl-2蛋白表达水平均高于A、B、C组,Bax蛋白表达水平低于A、B、C组(均P<0.05);D组的CD68巨噬细胞含量低于A组,高于B、C组(P<0.05),说明D组的CD68巨噬细胞含量调控在一定范围内。结论 复方雪莲烧伤膏对深Ⅱ度烫伤创面有收敛作用,其通过调控巨噬细胞含量,促进VEGF分泌、VEGFmRNA的表达,上调bcl-2的同时下调Bax蛋白,从而促进创面愈合。
摘要:目的 观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、趋化因子配体1(CXCL1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白表达的影响。方法 将72只SD大鼠随机分为急性皮损组、慢性创面组、贝复新组、美宝组各18只,除急性皮损组外,其余组皮下注射氢化可的松建立慢性难愈合创面,注射完成后用生理盐水清理创面,贝复新组创面敷贝复新凝胶,美宝组创面敷美宝烧伤膏,均每日上下午各换药1次。观察各组大鼠伤后第3,7,14天创面情况并取创面肉芽组织,Masson染色观察创面中胶原纤维生成情况,ELISA法检测肉芽组织中MMP-2含量,免疫组化法检测创面组织中CXCL1、GM-CSF蛋白表达情况。结果 美宝组大鼠创面愈合速度快于慢性创面组和贝复新组。Masson染色显示各组创面组织中胶原纤维含量随伤后时间的延长逐渐增加;伤后第3,7天,美宝组胶原纤维含量均明显高于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05);伤后第14天,各组胶原纤维含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。创面组织中MMP-2含量,贝复新组随伤后时间延长而增加(P<0.05),美宝组随伤后时间延长而减少(P<0.05);伤后第3天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显高于慢性创面组(P<0.05);伤后第7天,美宝组和贝复新组创面组织中MMP-2含量下降但与慢性创面组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第14天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显低于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05)。贝复新组伤后创面组织中CXCL1表达平均光密度随伤后时间延长降低,伤后第14天明显低于伤后第3天(P<0.05);伤后第3,7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度均明显低于伤后第3天(P均<0.05),且伤后第14天明显低于伤后第7天(P<0.05)。慢性创面组、贝复新组、美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度和伤后第7天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。伤后第3天,美宝组创面组织中GM-CSF表达平均光密度与慢性创面组比较差异无统计学意义...
摘要:第一部分:小鼠慢性创面愈合过程中巨噬细胞极化类型及影响创面愈合关键的信号通路研究目的:经由单细胞转录组测序技术(sc RNA-seq)对小鼠创面内巨噬细胞(Mac)极化类型与成纤维细胞(Fib)、上皮细胞(EC)之间的关系,还有影响创面愈合的主要信号途径展开探讨。方法:经由sc RNA-seq法探究小鼠愈合创面(Wound)与未愈合创面(Un_wound)组织在细胞亚群通讯强度、数量与互作方面的不同表现;对2类创面组织中特异性信号途径及其配体-受体加以明确,同时开展比较分析;并探讨小鼠Wound与Un_wound组织中Monocyte亚群类型及其几类关键亚群类型。结果:(1)小鼠2类创面(Wound、Un_wound)的单细胞质控Counts值皆未显示异常,细胞之间表现出较好的整体关联性。Wound组织中的细胞亚群以皮肤组织干细胞(Tissue SC)、EC、软骨细胞(Chondrocytes)、B细胞(B cells)、单核巨噬细胞(Monocyte)、Fib、内皮细胞(Endo)、角化细胞(KC)与T细胞(T cells)为主;Un_wound组织中相关的细胞亚群以皮肤组织SC、T细胞(T cells)、波纹管细胞(CMP)、Monocyte、神经元细胞(Neurons)、Endo、EC、KC、Fibroblasts、软骨细胞(Chondrocytes)与B细胞(B cells)为主;在Wound组织中,Monocyte同EC、Fib、Tissue sc细胞亚群之间皆存在紧密联系;在Un_wound组织内,就Monocyte同EC、Fib细胞亚群的通讯强度与数目而言,相较Wound组织皆偏低;(2)对于小鼠慢性创面组织Fib与Epithelial这2类细胞亚群,皆会受到Monocyte所含EGF信号途径CXCL1-Akr1信号轴的活化效应影响,CXCL信号途径内的不同配体-受体之间的作用性,对于整个信号途径,CXCL16-Akr6以及CXCL1-Akr1配体受体所具备的价值最高。对单个配体受体在不同细胞通信中的调控功能进行分析的结果显示,Cxcl3-Ark1配体受体于Mac与血管内皮细胞(VEC)的信号关联性更为显著,且更为关键;(3)Monocyte亚群由0、1、2、3、4、5这五类构成,前两类在Wound组织中占据主要位置,CD68与CD162特异性表达亚群存在比较明显的优势,同时CD163标记的Mono...