摘要：烧伤创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)立足中西医结合理论,秉承中医整体观念,为创面营造生理性湿润环境的同时,通过转化生长因子β1 (TGF-β1)/Smad3、细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)等多种信号通路调控血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等多种细胞因子的表达,在糖尿病足、压疮、静脉性溃疡、神经性溃疡、痛风性溃疡等多种慢性难愈合创面的治疗中发挥了减轻创面疼痛、促进创面愈合、减少愈后瘢痕形成率及截肢率等作用,取得了良好的临床疗效。为更好地指导MEBT/MEBO的临床治疗,该研究对近年来MEBT/MEBO在慢性难愈合创面治疗中的基础与临床研究进展进行了综述。

摘要：目的通过动态观察大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2蛋白及基因表达变化,从p38信号通路角度探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的可能修复机制。方法实验一:以40只SD大鼠为研究对象,随机分为MEBO组、贝复济组、模型组、空白组,每组各10只,依据文献复制了大鼠体表皮肤溃疡模型。造模后第二天用药,观察创面愈合时间及愈合率;实验二:SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,同实验一造模方法,造模后第3d,7d,14d各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测p38、MK2蛋白及其mRNA水平表达差异。结果(1)Western blotting检测结果:①在整个创面愈合过程中,纵向比较,P38、MK2总蛋白表达量在同个时相点各组差异无统计学意义(P>0.05),横向比较,在造模后第3天表达最高,其次逐渐下降;②在创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组创面组织中p-p38、p-MK2表达差异无统计学意义(P>0.05);在造模后第7天,各组间的差异开始明显,空白组、MEBO组、贝复济组表达量开始显著下降,模型组下降趋势不明显,各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);造模后第14天,相比其他三组,模型组表达量仍处于较高水平(P<0.05),MEBO组和贝复济组差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR检测结果:①在整个实验过程中,与空白组相比,MEBO组、贝复济组、模型组的P38 mRNA、MK2 mRNA表达量在第3天时最多,随后持续下降;②造模后第3天,各组差异无统计学意义(P>0.05);造模后第7天,MEBO组、贝复济组的表达量下降趋势明显,两组之间有明显统计学差异(P<0.05);造模后第14天,MEBO组、贝复济组的表达量持续下降,两组之间无统计学差异(P>0.05),但与模型组相比均有差异(P<0.05),模型组仍处于高表达。结论(1)MEBO能明显缩短大鼠慢性难愈合创面的愈合时间,下调p38和MK2磷酸化及其mRNA表达水平。(2)慢性难愈合创面难迟缓愈合与p-p38和p-MK2高水平表达有关,MEBO能促进慢性难愈合创面的作用机制之一可能是通过下调p38MAPK信号通路中p38和MK2磷酸化水平,阻断部分信号转导,抑制p38MAPK信号通路被过度激活的状态,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。

摘要：第一部分:小鼠慢性创面愈合过程中巨噬细胞极化类型及影响创面愈合关键的信号通路研究目的:经由单细胞转录组测序技术（sc RNA-seq）对小鼠创面内巨噬细胞（Mac）极化类型与成纤维细胞（Fib）、上皮细胞（EC）之间的关系,还有影响创面愈合的主要信号途径展开探讨。方法:经由sc RNA-seq法探究小鼠愈合创面（Wound）与未愈合创面（Un＿wound）组织在细胞亚群通讯强度、数量与互作方面的不同表现;对2类创面组织中特异性信号途径及其配体-受体加以明确,同时开展比较分析;并探讨小鼠Wound与Un＿wound组织中Monocyte亚群类型及其几类关键亚群类型。结果:（1）小鼠2类创面（Wound、Un＿wound）的单细胞质控Counts值皆未显示异常,细胞之间表现出较好的整体关联性。Wound组织中的细胞亚群以皮肤组织干细胞（Tissue SC）、EC、软骨细胞（Chondrocytes）、B细胞（B cells）、单核巨噬细胞（Monocyte）、Fib、内皮细胞（Endo）、角化细胞（KC）与T细胞（T cells）为主;Un＿wound组织中相关的细胞亚群以皮肤组织SC、T细胞（T cells）、波纹管细胞（CMP）、Monocyte、神经元细胞（Neurons）、Endo、EC、KC、Fibroblasts、软骨细胞（Chondrocytes）与B细胞（B cells）为主;在Wound组织中,Monocyte同EC、Fib、Tissue sc细胞亚群之间皆存在紧密联系;在Un＿wound组织内,就Monocyte同EC、Fib细胞亚群的通讯强度与数目而言,相较Wound组织皆偏低;（2）对于小鼠慢性创面组织Fib与Epithelial这2类细胞亚群,皆会受到Monocyte所含EGF信号途径CXCL1-Akr1信号轴的活化效应影响,CXCL信号途径内的不同配体-受体之间的作用性,对于整个信号途径,CXCL16-Akr6以及CXCL1-Akr1配体受体所具备的价值最高。对单个配体受体在不同细胞通信中的调控功能进行分析的结果显示,Cxcl3-Ark1配体受体于Mac与血管内皮细胞（VEC）的信号关联性更为显著,且更为关键;（3）Monocyte亚群由0、1、2、3、4、5这五类构成,前两类在Wound组织中占据主要位置,CD68与CD162特异性表达亚群存在比较明显的优势,同时CD163标记的Mono...

摘要：目的 从细胞焦亡有关因子IL-18探讨大鼠慢性难愈合创面的修复机制。方法 取健康成年雄性大鼠60只，分笼饲养于右江民族医学院SPF级动物实验室1周后随机分为：空白组、急创组、贝复济组、美宝组、模型组，每组12只。其中空白组仅做背部脊柱两侧备皮处理，急创组直接进行背部创面造模，并湿敷生理盐水纱布。其余各组作慢性难愈合创面造模，分别用湿润烧伤膏（MEBO）、贝复济、生理盐水进行治疗。结果 治疗后第7天和第14天，急创组、贝复济组、美宝组大鼠创面愈合率均明显高于模型组（P <0.05），美宝组与贝复济组比较差异无统计学意义（P>0.05）。电镜结果显示模型组、美宝组中均存在细胞胀大，细胞破损，细胞内容物释放的细胞焦亡特征。分子生物学实验显示，造模后第3天、第7天、第14天，空白组大鼠皮肤组织中IL-18蛋白均无明显变化（P>0.05）。急创组、贝复济组、美宝组、模型组中IL-18表达水平变化明显（P <0.05），其中急创组、贝复济组、美宝组中IL-18表达水平呈先升高后降低趋势，模型组中IL-18表达水平在7d时先升高，14d后可维持在较高水平。但是急创组、贝复济组、美宝组IL-18表达水平均低于模型组，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 MEBO可以促进慢性难愈合创面的修复，愈合过程可能涉及创面细胞焦亡，其机制可能与调控IL-18蛋白表达水平有关。