摘要：目的:通过检测不同干预方案下大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白15(cytokeratin-15 CK15)与细胞角蛋白19(cytokeratin-19 CK19)的动态表达,探讨完善皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进创面愈合的部分分子学机制,从而为其在临床治疗上推广应用提供理论支持。方法:将90只健康成年Wistar雄性大鼠(SPF级)随机分为空白组(18只)、急创对照组(18只)、慢创模型组(18只)、MEBO组(18只)和Rb-b FGF(18只)。其中空白组不做损伤处理,急创对照组做急性全层皮肤缺损创面模型,慢创模型组、MEBO组和Rb-b FGF组在急创对照组基础上注射氢化可的松,制备慢性难愈合创面模型。模型建立后给予创面换药,每日两次。急创对照组与慢创模型组创面给予碘伏消毒,MEBO组碘伏消毒后涂抹MEBO治疗,Rb-b FGF组碘伏消毒后涂抹重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel Rb-b FGF)治疗。最后分别于治疗后第3,7,14天在各组中分别随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后,完整切取创面肉芽组织。一部分组织给予甲醛固定,之后进行HE染色。其余组织投入-80℃冰箱。所有时相点组织收集完毕后,应用Western Blotting技术以及Real Time PCR技术统一检测、对比各组大鼠创面组织中CK15、CK19蛋白表达量及CK15、CK19m RNA的转录水平。结果:(1)HE染色,各组样本HE染色后显微镜下观察,空白组未见变化,均为正常皮肤组织学形态。在造模后的第3天,急创对照组组织水肿,同时可见大量中性粒细胞浸润。慢创模型组,MEBO组,Rb-b FGF组组织间水肿,少量淋巴细胞浸润。在造模后的第7天,急创对照组镜下见中性粒细胞减少,组织间水肿减轻,少量毛细血管再生。MEBO组,Rb-b FGF组淋巴浸润情况亦有所减少,组织间水肿有所改善,除血管新生外,还可见少量毛囊。而慢创模型组淋巴细胞浸润程度未见减轻,组织水肿仍明显,缺乏新生毛细血管。在造模后的第14天,急创对照组,MEBO组,Rb-b FGF组组织无炎性细胞浸润,水肿不明显,可见新生的分层表皮结构,同时可见毛囊、皮脂腺...

摘要：目的:通过观察研究不同治疗方案下大鼠创面组织CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量。阐述皮肤原位再生医疗技术(Moist expose burn ointment/moist expose burn therapy,MEBT/MEBO)对慢性难愈合创面的治疗效果。同时进一步揭示MEBT/MEBO在改善慢性难愈合创面的部分作用机制。方法:本研究通过将90只SPF级wistar大鼠随机分为5组,分别为空白组(18只)、急创组(18只)、慢创组(18只)、rb-bFGF组(18只)及MEBO组(18只)。分别按照各组的要求对创面进行处理,于造模治疗后第3、7、14天采取大鼠创面组织。对3个时相点相同部位大鼠创面组织进行石蜡切片和Masson染色,观察对其各组大鼠创面组织形态学差异。运用western blot及RT-PCR法对第3、7、14天的大鼠创面组织的CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量进行检测并对比其差异。结果:(1)空白组大鼠创面组织镜下形态学未见明显改变。随着治疗周期的延长,大鼠创面组织水肿逐渐消退,新生血管明显增多,皮肤附属器官逐渐形成。在愈合过程中,急创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织明显优于慢创组大鼠创面组织。(2)Western Blotting:空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14的蛋白表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14蛋白的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7天、14天同组大鼠之间存在较明显的差异,不仅具有统计学意义(P<0.05),而且还呈现出一个逐渐增多的趋势。我们观察实验中第7天和第14天这两个时相点结果发现,rb-bFGF组和MEBO组这两组大鼠创面组织中所测得结果明显要优于慢创组,同样经过统计分析证明了其具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR:其表达结果和Western Blotting相符合,空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14 mRNA的表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14 mRNA的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7...

摘要：目的:通过对大鼠慢性难愈性创面组织中基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-Derived Factor-l,SDF-1)、趋化因子受体4(C-X-C Chemokine Receptor Type 4,CXCR4)表达水平的研究,来探讨烧伤疮疡再生技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对加速慢性难愈合创面的修复进程的部分机制。方法:(1)SPF级雄性Wistar大鼠90只按随机数表法将实验动物随机分为空白组(KBZ组)、急性组(JXZ组)、模型组(MXZ组)、贝复新组(BFZ组)和MEBO组(MBZ组),每组十八只,空白组皮肤只剃毛,不作其他皮肤损伤处理,急性组做全层皮肤处理,建立急性创面,模型组、MEBO组和贝复新组参照付小兵等全层皮肤缺损法和沈氏改良塑料环肉芽肿定量法建立慢性难愈合创面模型。(2)造模成功后创面处理:JXZ组、MXZ组创面予以生理盐水纱布覆盖,BFZ组创面予以贝复新药物干预,MBZ组创面予以MEBT/MEBO干预。创面换药前均以1/5000呋喃西林液消毒处理,换药频率2次/日。(3)动物模型制备完成后,分别于3d、7d、14d,每组随机选取6只大鼠,麻醉后切取整个创面肉芽组织,标本一部分放入甲醛中固定,之后行HE染色、Masson染色,余创面组织置入-80℃冰箱,用于之后行Real-time q PCR、Western Blot检测创面组织中SDF-1、CXCR4m RNA表达水平及蛋白表达水平。结果:(1)创面愈合情况观察:造模第3天,四组创面基本未见明显愈合,JXZ组创面少量新鲜肉芽组织,MXZ组、MBZ组、BFZ组创面未见明显肉芽组织,其中MXZ组创面渗出较多,水肿明显。造模第7天,除MXZ组,其他三组创面有缩小,JXZ组最明显,JXZ组创面肉芽组织鲜红色,无渗液水肿,MBZ组与BFZ组创面肉芽较前新鲜,无渗液,MXZ组创面少量渗出、水肿,且可见坏死组织。造模第14天,JXZ组创面基本愈合,部分MBZ组、BFZ组创面接近愈合,创面肉芽组织新鲜,创面上皮化明显,MXZ组创面明显缩小,创面可见较多新鲜肉芽组织,无渗液、水肿。(2)创面愈合率:造模成功后,第3天、7天、14天,MXZ组创面愈合率与JXZ组、MBZ组、BFZ组均有差别(P<0.05),且MBZ组、BFZ组愈合率无明显差别(...

摘要：作者应用MEBO治疗肛肠病术后患者,效果满意。本组53例,其中肛瘘7例、混合痔33例、肛裂8例、肛周脓肿5例。提出了术后控制大便二天,第三天开始用MEBO换药,每日2～3次。较传统其它换药方法提前3～5天治愈,且无任何并发症。愈合的创面皮肤弹性好、质轨、无疤痕挛缩。作者认为:(1)止痛效果明显。(2)有促进创面早期愈合而创面不发生水肿。(3)患者无痛苦,愈后无疤痕挛缩。(4)有较好的预防和控制感染的作用。