摘要:目的:用荧光定量PCR及超微病理技术观察MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合创面的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。 方法:将80只雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组、模型组、湿润烧伤膏组、康复新液组,每组20只。大鼠常规饲养1周后,各组建立全层皮肤缺损开放性创面模型。空白对照组建立开放性创面模型后不做处理,按常规饲养。其余三组在开放性创面模型的基础上肌注醋酸氢化可的松,制成难愈性创面模型。模型组按创面大小外敷单层生理盐水纱布;湿润烧伤膏组以药膏直接涂布于创面上;康复新液组创面外喷外敷康复新液,此三组均在上药后的创面上加盖两层消毒干纱布,用胶布“丰”字...
摘要:目的 探讨皮肤再生医疗技术(湿润暴露烧伤疗法/湿润烧伤膏,MEBT/MEBO)治疗合并感染难愈合创面的疗效及对外周血内皮细胞生长因子(VEGF)、白细胞介素-4(IL-4)、IL-13及T淋巴细胞亚群的影响。方法选择2019年1月-2020年12月右江民族医学院附属医院收治的合并感染难愈合创面患者86例,随机分为研究组与对照组。对照组创面处外敷两层生理盐水纱布及两层消毒干纱布,研究组创面处涂抹MEBO后外敷两层生理盐水纱布及两层消毒干纱布。比较两组创面愈合情况,分析治疗前和治疗后3、7、14 d外周血VEGF、IL-4、IL-13及T淋巴细胞亚群水平变化。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析上述指标对创面愈合的预测价值。结果研究组愈合情况优于对照组(Z=-2.280,P=0.023)。治疗后3、7、14 d,研究组VEGF、CD4+、CD4+/CD8+均高于对照组(P<0.05),IL-4、IL-13、CD8+均低于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,治疗后3 d各指标对创面愈合不良均有较高的预测价值,联合检测的ROC曲线下面积(AUC)为0.904(95%CI:0.824~0.983)。结论 MEBT/MEBO治疗合并感染难愈合创面有更好的疗效,可更好降低创面炎症反应,增加创面免疫功能,促进肉芽组织增生及创面愈合,此外治疗后3 d多种指标联合对创面愈合有较好的预测价值。
摘要:目的:通过对糖尿病大鼠创面中活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)、钙调神经磷酸酶(calcineurin,Ca N)以及白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)的表达水平进行研究,探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面中活化T细胞核因子-钙调神经磷酸酶信号通路表达的影响,以期为MEBT/MEBO在糖尿病创面治疗的相关基础研究与临床应用上提供更多有价值的参考数据。方法:(1)分笼饲养SPF级Wistar雄性大鼠48只,适应性喂养一周后根据随机数字表法将大鼠随机分为4组,依次为对照组、模型组、美宝组(MEBT/MEBO治疗组)、贝复新组,每组12只大鼠。各组大鼠均禁食不禁水12小时,将其中模型组、美宝组和贝复新组造糖尿病大鼠模型,腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液稀释的等剂量链脲佐菌素溶液,而对照组仅注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液;注射3天后从大鼠尾端采血检测其空腹血糖,以空腹血糖大于16.7mmol/L为标准制成糖尿病大鼠模型,随后将四组大鼠按全层皮肤缺损法制备创面,建成糖尿病大鼠创面模型(模型组、美宝组、贝复新组)和大鼠急性创面模型(对照组)。(2)各组模型建立完成后先用呋喃西林液清洁创面,将对照组大鼠和模型组大鼠创面外敷两层生理盐水纱布,美宝组大鼠创面外敷两层美宝纱布,贝复新组大鼠创面外敷两层贝复新纱布,随后所有组别大鼠均加盖两层消毒干纱布并以胶布固定,每日进行更换鼠笼及垫料1次、换药操作2次以保持环境与创面清洁。(3)于第3、7、14天共3个时相点各组分别随机取4只大鼠断颈处死并取材,用直尺测量创面直径并作为参照物拍照记录所有大鼠的创面愈合情况,收集所有时相点的照片后用Image J软件测算所有大鼠不同时相的创面大小,以时相为分组进行创面愈合率计算。取距离创缘0.5cm的整个创面及周围组织,取出的组织用组织剪将其剪为两半,其中一半组织用称量纸包裹并置于盛有4%多聚甲醛离心管中,24小时后转移至70%无水乙醇中,再制成组织石蜡蜡块以备后续HE染色实验和免疫荧光实验使用。另一半剪为合适大小的组织块放入冻存管中,随即迅速放置入装有液氮的容器内并转移至-80℃冰箱冻存。(4)HE染色观察创面肉芽组织生长形态及病...
摘要:目的:通过检测不同干预方案下大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白15(cytokeratin-15 CK15)与细胞角蛋白19(cytokeratin-19 CK19)的动态表达,探讨完善皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进创面愈合的部分分子学机制,从而为其在临床治疗上推广应用提供理论支持。方法:将90只健康成年Wistar雄性大鼠(SPF级)随机分为空白组(18只)、急创对照组(18只)、慢创模型组(18只)、MEBO组(18只)和Rb-b FGF(18只)。其中空白组不做损伤处理,急创对照组做急性全层皮肤缺损创面模型,慢创模型组、MEBO组和Rb-b FGF组在急创对照组基础上注射氢化可的松,制备慢性难愈合创面模型。模型建立后给予创面换药,每日两次。急创对照组与慢创模型组创面给予碘伏消毒,MEBO组碘伏消毒后涂抹MEBO治疗,Rb-b FGF组碘伏消毒后涂抹重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel Rb-b FGF)治疗。最后分别于治疗后第3,7,14天在各组中分别随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后,完整切取创面肉芽组织。一部分组织给予甲醛固定,之后进行HE染色。其余组织投入-80℃冰箱。所有时相点组织收集完毕后,应用Western Blotting技术以及Real Time PCR技术统一检测、对比各组大鼠创面组织中CK15、CK19蛋白表达量及CK15、CK19m RNA的转录水平。结果:(1)HE染色,各组样本HE染色后显微镜下观察,空白组未见变化,均为正常皮肤组织学形态。在造模后的第3天,急创对照组组织水肿,同时可见大量中性粒细胞浸润。慢创模型组,MEBO组,Rb-b FGF组组织间水肿,少量淋巴细胞浸润。在造模后的第7天,急创对照组镜下见中性粒细胞减少,组织间水肿减轻,少量毛细血管再生。MEBO组,Rb-b FGF组淋巴浸润情况亦有所减少,组织间水肿有所改善,除血管新生外,还可见少量毛囊。而慢创模型组淋巴细胞浸润程度未见减轻,组织水肿仍明显,缺乏新生毛细血管。在造模后的第14天,急创对照组,MEBO组,Rb-b FGF组组织无炎性细胞浸润,水肿不明显,可见新生的分层表皮结构,同时可见毛囊、皮脂腺...