摘要：目的观察皮肤原位再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面TGF-β1、P-smad3表达的调控作用。方法100只SD大鼠随机分为糖尿病足造模组(80只)与空白对照组(20只),从糖尿病足造模组成功造模大鼠中取60只,随机分为模型组、贝复济组及MEBO组,各20只。于用药第5天、14天,各取相同部位创面组织,采用Western blotting技术检测TGF-β1、Smad3、P-smad3(磷酸化smad3)蛋白表达水平。结果四组大鼠Smad3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);MEBO组与贝复济组TGF-β1、P-smad3蛋白表达无差异(P>0.05),均低于空白对照组、高于模型组(P<0.05或P<0.01);与第5天相比,第14天时MEBO组与贝复济组TGF-β1、P-smad3表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在大鼠糖尿病足溃疡创面修复早期,MEBT/MEBO可能通过上调创面TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,促进创面损伤修复;而在创面修复后期,MEBT/MEBO可能通过下调创面TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,减少瘢痕愈合。

摘要：目的:建立糖尿病溃疡创面大鼠模型,以细胞自噬和PI3K-Akt-mTOR信号通路为研究切入点,探讨皮肤再生医疗技术(湿润暴露疗法,Moist exposed burn therapy,MEBT/湿润烧伤膏,Moist exposed burn ointment,MEBO)促进糖尿病溃疡创面修复的机制,为临床推广应用MEBT/MEBO治疗糖尿病溃疡创面提供理论依据。方法:将80只健康雄性wistar大鼠随机分成糖尿病溃疡创面组60只、对照组20只。糖尿病溃疡创面组先进行适应性喂养1周,再予高脂饲料喂养4周,禁食16小时,再腹腔注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)45mg/kg,以空腹血糖≥16.7mmol/L为糖尿病造模成功。1周后在大鼠背部建立直径约为2.5cm×2.5cm的全层皮肤切除模型,创面深度要求到达筋膜层,创面表面涂抹金黄色葡萄球菌悬浮液,造成糖尿病溃疡创面模型,再将其随机分为三组:MEBO组、康复新组和模型组,每组20只,分别采用MEBO、康复新液、生理盐水外敷进行创面处理。对照组大鼠在背部行全层皮肤切除,创面深度及大小与糖尿病溃疡创面组相同,但不予注射STZ,其创面也不涂抹金黄色葡萄球菌悬浮液。造模成功后各组动态观察创面的愈合情况,测量、计算各组大鼠的创面愈合率,并分别于第1天、第5天、第11天、第18天、第25天共5个时相点各组随机取4只大鼠,采集造模区创面组织后处死。将采集到的组织样品分别行常规病理技术观察创面组织形态学结构、电镜观察自噬体变化、Western blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)分析PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达情况。结果:1.创面愈合情况:对照组的创面修复最好,愈合时间最短;MEBO组、康复新组的创面修复情况显著优于模型组。创面愈合率:各组大鼠的创面愈合率均随着各时相点的增加呈逐渐升高趋势,在第5天,创面愈合率:对照组>康复新组>MEBO组>模型组,差异有统计学意义(P<0.05);第11天、第18天、第25天,创面愈合率:对照组>MEBO组>康复新组>模型组,差异有统计学意义(P<0.05),其中在第18天和第25天,MEBO组与康复新组之间对比差异均无统计学意义(P=0.76、0.23)。2.创面病理变化:第5天,MEBO组、康复新组及对照组的...

摘要：目的:本研究以糖尿病大鼠创面模型、临床糖尿病足创面为研究对象,观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病创面愈合情况的影响,并通过创面组织中BMP-2、BMP-7、BMPR-IA的检测,探讨其对糖尿病创面愈合作用的机理,为临床推广应用MEBO治疗糖尿病创面提供可靠的理论依据。方法:(1)糖尿病大鼠创面模型:按照随机数表法将125只Wistar雄性大鼠分为空白组(n=25)、对照组(n=25)、模型组(n=25)重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济)组(n=25)以及湿润烧伤膏(MEBO)组(n=25)。空白组大鼠备皮,不建立创面模型;对照组大鼠构建常规创面模型;模型组、贝复济组及MEBO组构建糖尿病模型。生理盐水外敷对照组及模型组创面,MEBO组和贝复济组创面分别予MEBO、贝复济外敷。各组于治疗后的第1、5、11、18、25天观察:(1)观察不同时点大鼠溃疡创面愈合情况,比较愈合率;(2)创面组织病理HE染色观察各组纤维细胞、创面组织炎症、肉芽生长、上皮化等情况。(3)免疫组化法观察溃疡创面BMP-2、BMP-7动态变化的影响。(4)Western Blot法测定BMP-2、BMP-7、BMPR-IA及BMPR-IA磷酸化蛋白表达。(5)q RT-PCR法测定BMP-2、BMP-7、BMPR-IA的表达。(2)临床糖尿病足创面:收集30例2型糖尿病足(T2DMF)患者治疗前和MEBO治疗两周的创面组织。资料收集主要包括以下两个部分:(1)跟踪测量、拍照记录每位患者创面愈合情况;(2)提取创面组织用福尔马林固定液收集并制成蜡块。蜡块切片行HE染色观察病理形态;免疫组化观察BMP-2、BMP-7的表达;免疫荧光定量测量治疗前后BMP-2、BMP-7的OD值。结果:(1)糖尿病大鼠创面模型:(1)创面愈合情况及愈合率:第5天四组的创面愈合率无明显差别。第11天模型组创面平均愈合率低于对照组、贝复济组、MEBO组;MEBO组与贝复济组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。第18天模型组创面平均愈合率仍低于对照组、贝复济组、MEBO组。第25天模型组尚可看到个别大鼠创面未完全愈合,模型组创面平均愈合率低于对照组、贝复济组、MEBO组(P<0.05)。(2)治疗第5天,与对照组比较,模型组可见大量炎症细胞...

摘要：目的：本课题在中医外科学理论指导下，在前期研究和临床应用的基础上，综合应用分子生物学、超微病理学、生物化学等现代多学科研究技术，进一步探讨烧伤湿性医疗技术/美宝湿润烧伤膏(Moist expose burn therapy/Moist expose burn ointment，MEBT/MEBO)对皮肤溃疡局部血管内皮细胞粗面内质网结构的影响，以期从不同层面揭示MEBT/MEBO改善微循环、祛腐生肌、促进创面再生与修复作用的分子生物学机制，并期望开辟“促进血管、细胞生长，加速创面愈合”的治疗新途径，为皮肤溃疡的治疗提供新的思路和方法，揭示MEBO促进溃疡部血管生长的部分本质。 方法：实验研究...