摘要：目的观察美宝湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)棉片贴补法治疗外伤性鼓膜大穿孔的临床疗效。方法将2008-01～2015-06期间就诊的113例外伤性鼓膜大穿孔患者经知情同意后按照前瞻、随机的原则分为3组:湿润烧伤膏棉片贴补组(A组,42例)、单纯棉片贴补组(B组,38例)、干燥自愈法组(C组,33例)。A、B组在耳内镜下分别行湿润烧伤膏棉片贴补和单纯棉片贴补治疗,每3～5d取出棉片观察;C组每3～5d观察,分别记录穿孔愈合情况、有无感染及愈合时间。结果 A、B、C组分别愈合39例(92.9%)、17例(44.7%)、10例(30.3%),平均愈合时间分别为(11.8±2.8)d、(20.5±2.1)d、(28.7±6.2)d。A组愈合率明显高于B、C组,均差异有统计学意义(P<0.01);B组愈合率高于C组,差异无统计学意义(P>0.05)。3组患者的平均愈合时间有显著差异(P<0.01)。3组中无明显诱因分别出现感染3例(7.1%)、10例(26.3%)、9例(27.3%),A组感染率明显低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05);B组和C组的感染率接近,差异无统计学意义(P>0.05)。随访期间,未发生严重并发症。结论湿润烧伤膏棉片贴补治疗外伤性鼓膜大穿孔能够提高穿孔愈合率,缩短愈合时间,降低感染率,无严重并发症,可使多数患者避免了手术治疗,降低了医药费用。

摘要：目的 分析美宝湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)对高糖培养的成纤维细胞外泌体分泌的影响，探究MEBO促进糖尿病慢性创面愈合的机制。方法 首先将Wistar大鼠表皮于无菌环境中分离。培养分离后的成纤维细胞，等到第四代，根据课题组前期研究将细胞分成四组，分别为对照组(高糖培养基)、MEBO低浓度组(20 g/L)、MEBO中浓度组(40 g/L)、MEBO高浓度组(80 g/L)。药物干预3天后，收集细胞上清用超滤管浓缩后，用SBI试剂盒提取外泌体，采用Western blotting检测外泌体标记蛋白CD81、TSG101。结果 外泌体标记蛋白CD81、TSG101在MEBO组和对照组中均有表达。MEBO各浓度组外泌体分泌量均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),MEBO中浓度组(40 g/L)分泌外泌体最多，与MEBO低浓度组(20 g/L)、MEBO高浓度组(80 g/L)相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 MEBO可以促进高糖培养的成纤维细胞分泌外泌体。

摘要：目的:体外高糖培养成纤维细胞(fibroblasts,FB),观察美宝湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)对高糖培养的成纤维细胞生长的影响,通过观察MEBO对高糖培养的成纤维细胞自噬相关基因LC3、Beclin-1、p62的调控作用,探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn ointment/moist exposed burn therapy,MEBO/MEBT)促进高糖状态慢性溃疡创面修复的机制,为临床推广提供理论依据。方法:第一部分:首先建立糖尿病大鼠创面模型,待第11天后分离、培养创面成纤维细胞,并予免疫荧光对分离的成纤维细胞进行鉴定,再配置含有MEBO的高糖培养液,并摸索最适生长浓度,细胞经消化、传代至第3代后,随机将细胞分成两组:对照组、MEBO组,(1)采用CCK-8法检测第12小时、24小时、48小时、72小时、96小时细胞增殖情况;(2)采用细胞划痕试验来观察MEBO对成纤维细胞迁移的影响。第二部分:以上成纤维细胞经消化、传代至第3代后,取对数期(第3天)的细胞分为以下7组:空白组、模型组、MEBO低浓度组、MEBO中浓度组、MEBO高浓度组、雷帕霉素+MEBO组、雷帕霉素组(除了空白组用低糖培养基,其余组均用高糖培养基)。分别予:(1)免疫荧光检测LC3、Beclin-1、p62染色;(2)透射电镜检测细胞自噬体;(3)q RT-PCR检测LC3、Beclin-1、p62的m RNA表达;(4)蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)法检测LC3、Beclin-1、p62的蛋白表达。结果:第一部分:(1)细胞增殖试验:第48小时起MEBO组各个时间点的光密度(optical density,OD)值均高于对照组(P<0.05),细胞增殖率在第72小时最高;(2)划痕实验检测示:MEBO组促进成纤维细胞迁移能力比对照组强,差异有统计学意义(P<0.05)。第二部分:(1)免疫荧光检测示:与空白组相比,各组中LC3、Beclin-1的荧光染色OD值最高为MEBO高浓度组,最低为空白组,MEBO低、中、高浓度组的OD值逐渐升高,Beclin-1中的雷帕霉素+MEBO组的OD组高于雷帕霉素组;各组中p62荧光染色OD值最高为空白组,最低为MEBO高浓度组,MEBO低、中、高浓度组的OD值逐渐降低,雷帕霉素组的OD值高于雷帕霉素+MEBO组;(2)电镜检测示:与空白组相比,MEBO高浓度组、雷帕霉素组与雷帕霉素+MEBO组的自噬小体数量较多,且结构较为典型,MEBO低、中、高浓度组的自噬小体数量逐渐增多;(3)q RT-PCR显示:与空白组相比,各组中LC3的雷帕霉素+MEBO组与Beclin-1的MEBO高浓度组相对表达量最高,且MEBO组中有浓度升高表达量增大的趋势,LC3的雷帕霉素+MEBO组表达量明显高于雷帕霉素组;p62的雷帕霉素组相对表达量最低,MEBO组内比较有浓度升高表达量降低的趋势;(4)蛋白免疫印迹测定蛋白示:LC3、Beclin-1两者中的雷帕霉素+MEBO与MEBO高浓度组蛋白表达量均明显高各组,MEBO组中各因子表达随浓度升高,加入MEBO后雷帕霉素组的表达量均增高,而p62的蛋白表达情况相反。结论:MEBO可致高糖培养的成纤维细胞自噬相关基因LC3、Beclin-1表达量增高,p62表达降低,调控细胞自噬,促进成纤维细胞增殖,这可能是MEBT/MEBO促糖尿病慢性创面修复的机制之一。

摘要：目的探讨糖尿病性皮肤溃疡的再生修复治疗方法。方法对2014年5月2015年12月期间,采用美宝湿润烧伤膏(MEBO治疗的8例13处糖尿病足皮肤溃疡的治疗过程进行回顾性总结。结果 12处溃疡经MEBT治愈,1处溃疡经手术治疗愈合。同时观察到创面再生修复的规律性。结论 MEBO可促进糖尿病足皮肤溃疡再生愈合。