摘要：目的:观察湿润烧伤膏(MEBO)对皮肤创伤模型大鼠创面中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响。方法:将SPF级实验动物54只SD雄性大鼠,根据付小兵的创伤创面模型的造模方法建立模型,待造模成功后,随机分为模型组、贝复济组、MEBO组,每组18只。造模后次日开始用药,各组创面分别予生理盐水、贝复济、MEBO换药,每日定时换药2次。在用药后3d、7d、11d,每组每时相点随机处死6只大鼠,观察各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,计算创面愈合率;HE染色观察创面炎症、成纤维细胞数量、血管情况;Western blot法检测创面肉芽组织中VEGF、bFGF蛋白表达情况。结果:①MEBO组大鼠的皮肤创面愈合率明显短于贝复济组(P<0.05)和模型组(P<0.01)差异有统计学意义;②病理学观察:换药后的第3d、7d、11d,MEBO组与贝复济组比模型组比较,炎症反应轻、肉芽生长良好,纤维增生程度低;③免疫印记法检测:MEBO组大鼠创面肉芽组织中VEGF、bFGF蛋白表达分别上升27.5%和34.7%相比模型组(P<0.01)和贝复济组(P<0.05)明显提高。结论:MEBO能提高皮肤创面肉芽组织中的VEGF、bFGF蛋白表达量,刺激表皮细胞生长,再上皮化修复创面;促进新生毛细血管的生成和成纤维细胞的增殖,改善炎症状态,加快肉芽组织的形成,从而促进皮肤创面愈合。

摘要：目的:本研究以糖尿病小鼠皮肤溃疡模型为研究对象,观察湿润烧伤膏对模型小鼠皮肤愈合情况的影响,并通过皮肤肉芽组织细胞凋亡及组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平的检测,探讨湿润烧伤膏对糖尿病小鼠皮肤溃疡创面愈合作用机理,为临床治疗糖尿病皮肤溃疡提供实验依据。材料与方法:昆明种SPF级雄性小鼠40只,随机分为4组,分别是空白对照组、模型对照组、康复新液组、湿润烧伤膏组,每组10只。实验前一日,小鼠断食24小时,除空白对照组外,其余各组第二日采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导糖尿病小鼠模型,注射STZ72小时后,随机抽取检测血糖3次,若血糖≥16.7mmol/L,可确定糖尿病小鼠模型造模成功。将全部小鼠背中区域去毛,用手术刀将背中区域皮肤做长约l.5cm的切口,切口深度为暴露肉芽层为度。运用50%冰醋酸刺激创面,使其符合糖尿病皮肤溃疡特点。空白对照组和模型对照组小鼠创面均用无菌生理盐水处理,康复新液组和湿润烧伤膏组分别选取康复新液和湿润烧伤膏进行溃疡面外用干预,每天给药1次,连续7天。观察各组小鼠干预后溃疡面愈合情况;采集创面肉芽组织,制作HE染色切片,进行组织病理学观察;采用TUNEL检测法观察肉芽组织细胞凋亡变化,western-blot法和IHC法检测组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平。结果:1、溃疡面愈合情况与空白对照组相比,模型对照组创面愈合率明显降低,空白对照组与模型对照组创面愈合存在明显差异性(p<0.01);与模型组对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面愈合情况均明显升高,三组间存在明显差异(p<0.01),以湿润烧伤膏组创面愈合情况升高最为显著。2、HE染色情况与空白对照组比较,模型对照组的创面肉芽组织结构细胞杂乱无序排放,胶原纤维叠加呈团絮状;康复新液组的细胞排列为不整齐;湿润烧伤膏组仅见到纤维细胞肥大,细胞排列相对整齐。康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组更接近空白组。3、TUNEL检测法结果与空白对照组相比,模型对照组细胞凋亡数量明显升高,空白对照组与模型对照组细胞凋亡数量存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的皮肤肉芽组织中细胞凋亡数量明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),尤其是湿润烧伤膏组细胞凋亡数量显示最低。4、IHC法检测结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。5、WB检测法结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;结论:1.湿润烧伤膏外用可提高糖尿病小鼠皮肤溃疡的愈合率,加速溃疡面的愈合。2.湿润烧伤膏外用可明显抑制糖尿病皮肤溃疡小鼠细胞凋亡。3.湿润烧伤膏是通过降低糖尿病小鼠皮肤溃疡创面肉芽组织中fas、fasl、caspase3、caspase8蛋白表达,从而抑制细胞凋亡的。

摘要：目的探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)干预磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B (Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路促进体表慢性难愈合创面的修复机制。方法将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组34只和MEBT/MEBO组34只。各组分别干预治疗后观察:(1)创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于第3、7、14天固定焦距拍照创面计算愈合率;(2)并同时于第3、7、14天取创面组织,石蜡切片HE常规染色观察第3、14天病理改变;(3)提取第3、7、14天创面组织蛋白,Western Blot法检测PI3K、p-Akt (S473)、p-mTOR (Ser2448)、p-p70 S6K (Thr389)、p-4E BP1 (Thr37/46)蛋白表达水平。结果 (1)与模型组比较,贝复新组及MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.05)。(2)造模及干预治疗14天后,贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织病理学形态学改善明显优于模型组。(3)与模型组比较,造模及干预治疗7天后贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织PI3K和磷酸化Akt蛋白高表达(P<0.05),MEBT/MEBO组mTOR及其下游效应分子p70 S6K和4E BP1磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可促进体表慢性难愈合性创面的愈合,较好改善其组织病理形态学改变,其作用机制可能与激活PI3K-Akt-mTOR信号通路,促进大量与愈合相关的蛋白质合成有关。

摘要：目的:考察水飞蓟喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烫伤组织病理学及血清白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）的影响。方法:建立深Ⅱ度烫伤模型大鼠,随机分成为模型组、美宝湿润烧伤膏组(24 g·kg-1)、水飞蓟小剂量组(24 g·kg-1)、水飞蓟中剂量组(48 g·kg-1)、水飞蓟大剂量组(96 g·kg-1)和空白组,连续给药21 d,分别在造模后3 d、7 d、14 d、21 d检测血清IL-1、TNF-α含量;HE染色检测烫伤创面病理学变化。结果:与模型组相比,烫伤后3 d、7 d、14 d、21 d,美宝湿润烧伤膏组和水飞蓟小、中、大剂量组血清TNF-α和IL-1均显著降低,其中水飞蓟大剂量组血清降低程度更大（P<0.05）。大鼠烫伤创面HE染色,水飞蓟喷雾剂可明显减轻表皮层、真皮层水肿,促进新生细胞增殖和皮肤组织修复。结论:水飞蓟喷雾剂对大鼠深Ⅱ度烫伤创面有修复作用,可促进烫伤创面的愈合,可能与降低血清IL-1和TNF-α抗炎作用有关。