摘要：目的:基于课题组前期基础研究,本课题从AKT/EGF信号通路进一步探讨MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面修复的机制方法:健康成年SPF级Wistar雄性大鼠60只,12周龄,体重220g250g,适应性喂养1周后,按数字表法随机分为:空白组、急性全层皮肤缺损组（对照组）、模型组、美宝组（Moist Exposed Burn Ointiment Group,MEBO组）和贝复新组各12只。空白组大鼠不作任何有损伤性处理;对照组大鼠在造模部位行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;模型组、美宝组和贝复新组大鼠在造模部位行全层皮肤切除后腹腔注射氢化可的松,模型组大鼠只敷生理盐水,美宝组大鼠敷美宝湿润烧伤膏,贝复新组大鼠敷贝复新进行治疗。各组创面制备后立即用药治疗。在造模后第3天、第7天、第14天每组各处死4只,取新鲜创面组织,立即放于液氮罐中,并在取材完毕后迅速转入-80℃超低温冰箱。待标本全部收集完成后进行病理检测,用Western Blotting、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR方法检测AKT、EGF、MMP-2的蛋白及基因表达。结果:（1）创面大体情况及光镜观察:对照组创面恢复最好,愈合时间最短,MEBO组、贝复新组愈合情况显著优于模型组（2）Western Blotting:（1）MEBO组、贝复新组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中MMP-2表达量都呈现升高-降低的趋势（P<0.01）;模型组则显示呈递增趋势（P<0.01）;MEBO组、贝复新组、对照组和模型组各组三个时相点的MMP-2表达量均有显著差异（P<0.01）;空白组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故MMP-2表达量未有明显变化（P>0.05）。（2）MEBO组、贝复新组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中EGFR表达量都呈现出升高-降低的趋势（P<0.01）;模型组则显示呈递增趋势（P<0.01）;MEBO组、贝复新组、对照组和模型组各组三个时相点的EGFR表达量均有显著差异（P<0.01）;空白组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故EGFR表达量未有明显变化（P>0.05）。（3）MEBO组、贝复新组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中p-AKT表达量都呈现出升高-降低的趋势（P<0.01）;模型组则显示呈递增趋势（P<0.01）;MEBO组各组三个时相点的p-AKT表达量均有显著差异（P<0....

摘要：目的观察皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平的影响。方法将54只慢性难愈合创面模型SD大鼠随机分为观察组、贝复济组、模型组各18只,造模成功后以湿润暴露疗法(MEBT)创面分别贴两层湿润烧伤膏(MEBO)纱条、贝复济浸透纱布、生理盐水纱布;空白组建立全层皮肤缺损模型,不加任何干预措施。造模后第3、7、14天各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用HE染色观察创面组织病理,ELISA法检测创面组织匀浆中的TNF-α、IL-6水平。结果造模后第14天,观察组、贝复济组大鼠创面组织中大量微血管生成,炎症细胞消失,创面恢复良好。各组大鼠创面组织匀浆中TNF-α、IL-6水平随时间延长均呈下降趋势,但以观察组下降最明显,模型组下降最缓慢;观察组、贝复济组创面组织匀浆中TNF-α、IL-6水平始终高于空白组(P均<0.01);且造模后第7天,观察组创面组织匀浆中TNF-α、IL-6水平低于贝复济组(P均<0.01);造模后第14天,观察组与贝复济组创面组织匀浆中TNF-α、IL-6水平比较无统计学意义(P均﹥0.05)。结论 MEBT/MEBO可以合理控制炎症因子TNF-α、IL-6的释放,改变病理炎症反应状态,从而促进创面愈合。

摘要：目的动态观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed bum ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中VEGFR-2表达水平的影响,探讨MEBT/MEBO促进创面愈合的分子学机制。方法按照随机数表法将90只健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(18只)、对照组(18只)、模型组(18只)、MEBO组(18只)和贝复济组(18只),其中空白组仅做备皮处理,对照组做全层皮肤缺损创面模型,模型组、MEBO组和贝复济组做慢性难愈合创面模型;模型建立后,空白组大鼠备皮后皮肤予以生理盐水纱布湿敷,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布覆盖治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱覆盖治疗,贝复济组大鼠创面予以贝复济药纱覆盖治疗,并分别于治疗后第3、7、14天检测、对比各组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA的表达水平。结果创面处理后第3、7、14天,空白组大鼠皮肤组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均无明显变化,P均>0.05,差异无统计学意义;而对照组、模型组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平变化均较明显,P均<0.05,差异具有统计学意义,其中对照组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组则呈递增趋势。治疗第3、7、14天,MEBO组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白和VEGFR-2 mRNA表达水平均高于模型组,P均<0.05.差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可通过上调创面组织中VEGFR-2的表达水平,促进创面愈合。

摘要：目的动态观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中BMP-4表达的影响。方法通过随机数字表将90只SPF雄性大鼠随机分为MEBO组、阳性药组(贝复济组)、模型组、急创组和空白组,构建大鼠慢性难愈合创面模型后,MEBO组创面局部涂用湿润烧伤膏,贝复济组创面局部涂用贝复济,模型组和急创组局部涂用生理盐水,于治疗后第3 d、7 d、14 d应用Western blotting检测大鼠创面组织中BMP-4表达情况,于治疗后第14 d,应用Masson染色,观察创面局部病理学形态。结果 (1)除空白组外,其余各组BMP-4的表达水平均呈先升高后降低的趋势(P<0.01),同一时间,MEBO组及阳性药组创面组织中BMP-4的表达水平均高于模型组(P<0.05);(2)MEBO组及阳性药组创面组织病理学形态优于模型组。结论 MEBT/MEBO能有效影响大鼠创面组织中BMP-4表达水平,从而影响慢性难愈合创面修复的质量。