摘要:目的 探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法(MEBT)/湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)表达水平的影响。方法 选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组,空白组、MEBO组、贝复新组和对照组,每组各12只,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(贝复新?)纱布,对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖。通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化,以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化。结果 (1)造模后第7、14天,MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组(P<0.05);(2)造模第3天,MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组,而Arg1 mRNA表达水平低于空白组;造模后第7、14天,与对照组相比,MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高,iNOS mRNA表达水平较低(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合,其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达,参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关。
摘要:湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)常应用于烧伤创面的治疗。临床上,MEBO还常与莫匹罗星软膏、自体富血小板凝胶、银离子敷料、自体皮移植、负压封闭引流技术、红外线、中药汤剂、艾炙或热敏炙等联合,用于烧伤残余创面、糖尿病创面以及压力性损伤创面等常见慢性难愈性创面的治疗,可以获得比单一治疗更好的效果。但MEBO与何种治疗方式联合的效果最优尚需探讨。
摘要:目的 探究湿润烧伤膏对糖尿病大鼠创面再上皮化过程的促进作用及其机制。方法 90只Wistar雄性大鼠用随机数字法分为5组:MEBO组、rb-bFGF组、模型组、对照组、空白组,每组18只。对照组建立急性创面模型;MEBO组、rb-bFGF组、模型组建立糖尿病创面模型。对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水外敷治疗;MEBO组、rb-bFGF组分别予以MEBO和rb-bFGF外敷治疗;空白组只做备皮处理。各组创面于第3、7、14天分别随机取6只大鼠,采集创面组织标本并保存。随后进行Masson染色,观察各组胶原纤维生成及再上皮化情况。免疫荧光、蛋白印迹和qRT-PCR方法检测创面组织FoxO1、E-cadherin及Vimentin等因子表达。结果 在造模第7、14天,对照组、MEBO组及rb-bFGF组创面愈合率高于模型组(P<0.05),且创面显示胶原纤维生成及再上皮化情况更好。在造模第3天,MEBO组中AKT蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05);第7天,MEBO组及rb-bFGF组中PI3K、AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量高于模型组(P<0.05),E-cadherin、Claudin1则低于模型组(P<0.05);第14天,与模型组相比,MEBO组及rb-bFGF组中AKT、FoxO1、Vimentin蛋白及mRNA表达量降低(P<0.05),E-cadherin、Claudin1表达量升高(P<0.05)。结论 湿润烧伤膏能促进糖尿病大鼠创面愈合,其可能作用机制是通过激活PI3K/AKT/FoxO1通路,并影响创面组织中E-cadherin、Claudin1、Vimentin表达及EMT转化过程实现的。
摘要:目的:本研究将从环鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(Cyclic guanine nucleotide adenine nucleotide synthetase-Stimulator of interferon genes,cGAS-STING)通路入手,明确湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过调控cGAS-STING信号通路减轻创面组织炎症反应状态,从而加快糖尿病创面修复的进程,为之后的临床治疗和科学研究提供可靠的参考数据。方法:1.通过网络药理学数据库筛选出MEBT/MEBO治疗糖尿病创面的活性成分和关键靶点,并对其进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析和蛋白质相互作用网络(Protein-protein interaction,PPI)分析,对活性成分和关键靶点进行分子对接验证其结合能力。2.动物实验验证:(1)选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组:空白组、MEBO组、贝复新组、对照组,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。(2)通过HE染色观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测cGAS-STING通路相关蛋白表达变化差异及mRNA转录水平差异。结果:(1)通过网络药理学方法筛选出77个湿润烧伤膏和糖尿病创面的交集靶点,显示刺槐素、汉黄芩素、槲皮素、吴茱萸次碱等为湿润烧伤膏核心活性成分,对交集靶点进行PPI网络分析筛选出TP53、TNF、HSP90AA1等关键靶点,KEGG富集分析结果显示TNF、PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路在湿润烧伤膏对糖尿病创面的治疗中起到重要作用,GO富集分析结果显示这些交集靶点的生物过程主要涉及炎症反应调节和血管新生过程。我们进一步对核心活性成分和关键靶点进行分子对接,结果显示均具有较强结合活性。(2)创面愈合情况:造模后第3天,各组之间的创面愈合率无明显差异(P>0.05);造模后第7、14天,与对照组相比,空白组、MEBO组和贝复新组的创面愈合...