摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠溃疡创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1表达的影响,探讨其作用机制,为推广临床应用提供理论依据。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组,每组50只。其中空白组大鼠仅予备皮处理,对照组大鼠建立常规创面模型,模型组、康复新组、MEBO组大鼠建立糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,对照组、模型组大鼠创面予生理盐水外敷治疗,康复新组、MEBO组分别予康复新、湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)外敷治疗。各组分别于治疗第1天、第5天、第11天、第18天、第25天观察:(1)创面愈合情况、记录创面面积并计算创面愈合率;(2)创面组织HE染色观察病理改变;(3)免疫荧光法检测创面组织ULK1、p70S6K、4EBP1的表达;(4)电镜观察创面组织细胞自噬体数量、形态、结构的变化;(5)Western blotting法检测ULK1、p70S6K、4EBP1及其磷酸化水平;(6)q RT-PCR分析ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA的表达。结果:(1)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面愈合情况及创面愈合率均优于模型组。(2)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面组织病理形态改善较模型组明显。(3)治疗过程中,各组创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1荧光染色阳性细胞数量及其平均光密度(OD)值均呈上升后下降的趋势,治疗早期MEBO组的阳性细胞数最多、OD值最高,模型组阳性细胞数最少、OD值最低。(4)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组细胞内自噬体数量升高后降低,治疗早期MEBO组胞内自噬体最多。(5)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组创面组织ULK1、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表达均上升后下降,治疗早期,模型组的表达量最低,p-ULK1表达呈下降后上升的趋势,治疗早期模型组的表达量最高。(6)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA表达均上升后下降,治疗早期模型组的表达量最低。结论:MEBT/MEBO可促进糖尿病溃...

摘要：目的 探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法（MEBT）/湿润烧伤膏（MEBO）对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg1）表达水平的影响。方法 选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组，空白组、MEBO组、贝复新组和对照组，每组各12只，其中空白组构建正常大鼠急性创面模型，MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。模型建立后，MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶（贝复新?）纱布，对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖。通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化，以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化。结果 （1）造模后第7、14天，MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组（P<0.05）;（2）造模第3天，MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组，而Arg1 mRNA表达水平低于空白组；造模后第7、14天，与对照组相比，MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高，iNOS mRNA表达水平较低（P<0.05）。结论 MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合，其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达，参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关。

摘要：目的通过湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)对骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic proteins 7,BMP-7)的调控来探讨其对糖尿病创面愈合的影响。方法按照随机数表将75只Wistar雄性大鼠分为空白组(n=15)、对照组(n=15)、模型组(n=15)、重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济)组(n=15)以及MEBO组(n=15),对模型组、贝复济组及MEBO组构建糖尿病模型。生理盐水外敷对照组及模型组创面,MEBO组和贝复济组创面分别给予MEBO、贝复济外敷。各组于治疗后的第1、5、11、18、25天观察创面大小变化及愈合情况,并于上述各个时间点各组随机取3只大鼠在麻醉后快速取创面组织并处死大鼠,标本行HE染色观察创面病理变化及免疫荧光法检测BMP-7的表达。结果 (1)在治疗过程中,对照组、贝复济组、MEBO组的病理形态明显改善。(2)BMP-7免疫荧光的变化:除了空白组,其他四组的阳染细胞均升高后降低,具体为第5天出现阳染细胞数的高峰是对照组、贝复济组和MEBO组,而第18天达到峰值的是模型组。(3)在模型组、对照组及MEBO组中,BMP-7表达有差异(P<0.05);而在贝复济组与MEBO组中无差异表达(P>0.05)。结论在糖尿病创面组织中,MEBO可能通过调控BMP-7的表达从而促进溃疡创面的愈合。

摘要：目的:本研究将从环鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(Cyclic guanine nucleotide adenine nucleotide synthetase-Stimulator of interferon genes,cGAS-STING)通路入手,明确湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过调控cGAS-STING信号通路减轻创面组织炎症反应状态,从而加快糖尿病创面修复的进程,为之后的临床治疗和科学研究提供可靠的参考数据。方法:1.通过网络药理学数据库筛选出MEBT/MEBO治疗糖尿病创面的活性成分和关键靶点,并对其进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析和蛋白质相互作用网络(Protein-protein interaction,PPI)分析,对活性成分和关键靶点进行分子对接验证其结合能力。2.动物实验验证:(1)选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组:空白组、MEBO组、贝复新组、对照组,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。(2)通过HE染色观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测cGAS-STING通路相关蛋白表达变化差异及mRNA转录水平差异。结果:(1)通过网络药理学方法筛选出77个湿润烧伤膏和糖尿病创面的交集靶点,显示刺槐素、汉黄芩素、槲皮素、吴茱萸次碱等为湿润烧伤膏核心活性成分,对交集靶点进行PPI网络分析筛选出TP53、TNF、HSP90AA1等关键靶点,KEGG富集分析结果显示TNF、PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路在湿润烧伤膏对糖尿病创面的治疗中起到重要作用,GO富集分析结果显示这些交集靶点的生物过程主要涉及炎症反应调节和血管新生过程。我们进一步对核心活性成分和关键靶点进行分子对接,结果显示均具有较强结合活性。(2)创面愈合情况:造模后第3天,各组之间的创面愈合率无明显差异(P>0.05);造模后第7、14天,与对照组相比,空白组、MEBO组和贝复新组的创面愈合...