摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠溃疡创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1表达的影响,探讨其作用机制,为推广临床应用提供理论依据。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组,每组50只。其中空白组大鼠仅予备皮处理,对照组大鼠建立常规创面模型,模型组、康复新组、MEBO组大鼠建立糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,对照组、模型组大鼠创面予生理盐水外敷治疗,康复新组、MEBO组分别予康复新、湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)外敷治疗。各组分别于治疗第1天、第5天、第11天、第18天、第25天观察:(1)创面愈合情况、记录创面面积并计算创面愈合率;(2)创面组织HE染色观察病理改变;(3)免疫荧光法检测创面组织ULK1、p70S6K、4EBP1的表达;(4)电镜观察创面组织细胞自噬体数量、形态、结构的变化;(5)Western blotting法检测ULK1、p70S6K、4EBP1及其磷酸化水平;(6)q RT-PCR分析ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA的表达。结果:(1)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面愈合情况及创面愈合率均优于模型组。(2)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面组织病理形态改善较模型组明显。(3)治疗过程中,各组创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1荧光染色阳性细胞数量及其平均光密度(OD)值均呈上升后下降的趋势,治疗早期MEBO组的阳性细胞数最多、OD值最高,模型组阳性细胞数最少、OD值最低。(4)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组细胞内自噬体数量升高后降低,治疗早期MEBO组胞内自噬体最多。(5)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组创面组织ULK1、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表达均上升后下降,治疗早期,模型组的表达量最低,p-ULK1表达呈下降后上升的趋势,治疗早期模型组的表达量最高。(6)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA表达均上升后下降,治疗早期模型组的表达量最低。结论:MEBT/MEBO可促进糖尿病溃...

摘要：目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病溃疡创面愈合及血管生成的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的机制。方法 SPF级Wistar雄性大鼠24只,STZ注射建立糖尿病大鼠模型后随机分为对照组及MEBO组,各12只,背部切除建立创面,对照组创面给予生理盐水外敷治疗,MEBO组创面给予湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)外敷治疗。于治疗第5天、第11天观察创面愈合情况及病理变化,行微血管计数,并采用免疫荧光法检测创面组织CD31水平。结果第5天,两组创面愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05),第11天,MEBO组创面愈合率高于对照组(P<0.001);第5天,两组创面组织病理恢复情况及微血管计数比较差异无统计学意义(P>0.05),第11天,MEBO组创面病理恢复情况优于对照组,微血管计数高于对照组(P<0.001);血管标记物CD31显示第5天两组差异无统计学意义(P>0.05),第11天MEBO组明显高于对照组(P<0.001)。结论 MEBT/MEBO可通过促进糖尿病创面新生血管形成而促进创面愈合。

摘要：目的 探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法（MEBT）/湿润烧伤膏（MEBO）对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg1）表达水平的影响。方法 选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组，空白组、MEBO组、贝复新组和对照组，每组各12只，其中空白组构建正常大鼠急性创面模型，MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。模型建立后，MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶（贝复新?）纱布，对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖。通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化，以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化。结果 （1）造模后第7、14天，MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组（P<0.05）;（2）造模第3天，MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组，而Arg1 mRNA表达水平低于空白组；造模后第7、14天，与对照组相比，MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高，iNOS mRNA表达水平较低（P<0.05）。结论 MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合，其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达，参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关。

摘要：目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)干预糖尿病性溃疡创面愈合的作用机制。方法于2015年6月选取145只12周龄的SPF级健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法将其分为空白组(35只)和糖尿病模型组(110只),糖尿病模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,8周后选取空白组30只及糖尿病模型组成模大鼠90只,糖尿病模型组成模大鼠再采用随机数字表法分为模型组、MEBO组及贝复济组,每组30只,4组均制备溃疡模型。成功后MEBO组予MEBO纱条、贝复济组予重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液浸透纱条、空白组及模型组予0.9%氯化钠溶液纱条局部换药处理,1次/d。分别于创面干预后第3、6、12天,每次随机选取10只大鼠,观察创面愈合速率;取相同位点创面组织,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晚期糖基化终末产物(AGEs)、核因子κB(NF-κB)水平,荧光PCR技术检测AGE受体(RAGE)mRNA表达水平,HE染色观察创面组织炎性细胞浸润、成纤维细胞及血管生成情况。结果造模8周后,糖尿病模型组体质量低于空白组,血糖水平高于空白组(P<0.01)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面愈合速率比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中模型组、MEBO组、贝复济组创面愈合速率低于空白组,MEBO组、贝复济组创面愈合速率高于模型组;第6、12天时,贝复济组创面愈合速率低于MEBO组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面组织AGEs水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中模型组、MEBO组、贝复济组创面组织AGEs水平高于空白组,MEBO组、贝复济组创面组织AGEs水平低于模型组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面组织NF-κB水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中第6、12天时,模型组创面组织NF-κB水平高于空白组,MEBO组创面组织NF-κB水平低于模型组;第12天时,贝复济组创面组织NF-κB水平高于空白组、低于模型组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组、贝复济组第3、6、12天创面组织RAGE mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中第6、12天时,模型组、贝复济组创面组织RAGE mRNA表达水平高于空白组,MEBO组创面组织RAGE mRNA表达水平低于...