摘要:目的:糖尿病皮肤溃疡是临床难愈性创面中比较公认的棘手问题,临床上综合治疗方法繁多,但中医中药方面治疗手段较匮乏,尤其愈合机制及抗氧化机制方面基础研究较少。本实验研究是通过观察外用烧伤中药湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病皮肤溃疡模型小鼠创面愈合情况、病理方面改变的影响,进一步评价MEBO对糖尿病皮肤溃疡小鼠创面愈合机制的干预作用。通过检测小鼠血清SOD、GSH-px含量,皮损处肌肉组织中Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平,探讨MEBO对糖尿病皮肤溃疡小鼠创面抗氧化作用及氧化应激的调控机制,为临床应用湿润烧伤膏治疗糖尿病皮肤溃疡提供更多的科学实验数据。材料与方法:SPF级雄性昆明种小鼠40只,实验前一天,禁食24小时,次日采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法,诱导糖尿病小鼠模型,注射STZ 72小时后,随机检测血糖2次或2次以上,大于或等于16.7mmol/L确定糖尿病小鼠模型成功复制。然后给予小鼠背部去毛,用手术刀于背部将皮肤做“井”字形切口,切口长1cm左右,深度至暴露肌肉层。同时将复制成功的糖尿病小鼠模型随机分为3组,每组10只:分别为模型对照组、湿润烧伤膏组(实验组)、康复新液对照组(阳性对照组),另设健康小鼠作为空白对照组。阳性对照组和实验组分别给予康复新液及湿润烧伤膏进行外用药物换药干预创面,每日一次,连续用药7天。1周后,连续观察伤口愈合情况并做详细记录;经小鼠球后静脉丛采集全血,检测血清中SOD、GSH-PX抗氧化酶含量;HE染色法观察肌肉组织的病理变化;采集伤口部位肌肉组织,分为两块,一块儿直接冻存,用于western-blot法检测Nrf2、NQO1、HO-1表达水平;另一块固定于4%多聚甲醛溶液中,用于IH C法检测Nrf2、NQO1、HO-1表达水平。结果:1.创面愈合情况:湿润烧伤膏组,康复新液组创面愈合量率明显优于模型组对照组(p<0.01),愈合速度较快。湿润烧伤膏组,康复新液组,模型对照组与空白对照组创面愈合率比较差异显著(p<0.01),具有统计学意义;2.HE染色观察:造模用药1周后肌肉组织镜下病理显示4组间观察有明显差异性;3.比色法检测:湿润烧伤膏组、康复新液组糖尿病小鼠血清中SOD、GSH-px抗氧化酶含量与模型对照组相比有明显差异性(p<0.01),湿润烧伤膏组、康复新液组,模型对照组SOD、GSH-px抗氧化酶含量与空白对照组相比有明显差异性(p<0.01),具有统计学...
摘要:目的:评价湿润烧伤膏和全蝎软膏联用治疗糖尿病皮肤溃疡创面愈合的效果并探讨其作用机制。方法:选择Wistar大鼠建立糖尿病皮肤溃疡模型,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、全蝎软膏组、湿润烧伤膏组和联用组,以连续饲喂高脂饲料、腹腔注射链脲佐菌素(STZ)及皮肤损伤法制备糖尿病皮肤溃疡大鼠模型。造模后,分别在创伤处进行药物干预处理,空白组和模型组用PBS处理并计算创面愈合率;采用免疫组化、创面组织超微病理结构观察给药后3 d、7 d、10 d和14 d的创面肉芽组织,western-blot检测Smad4蛋白的表达。结果:糖尿病皮肤溃疡模型组的大鼠体重、血糖与正常组相比有统计学差异,成模率为95.45%;经14 d连续治疗后,各治疗组创面愈合率均高于模型组(P<0.05),联用组创面愈合率与对照组水平接近。免疫组化染色结果显示与模型组相比,经药物干预后的创面组织内AGEs和RAGE的表达水平均明显下调(P<0.05);电镜观察结果表明联用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够促进胞内细胞器恢复正常水平,其改善效果较单独药物干预组效果更显著;Western-blot检测结果表明各治疗组创面组织内Smad 4蛋白水平较模型组显著降低,但联用组中Smad4蛋白水平下调更显著(P<0.05)。结论:联合应用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够有效促进大鼠糖尿病性皮肤溃疡创面的愈合,可能与调控组织中糖基化终末产物AGEs-RAGE信号通路及下调Smad4蛋白表达水平,抑制炎症反应有关。
摘要:目的 探讨湿润烧伤膏对糖尿病皮肤溃疡小鼠肌肉组织中核因子NF-E2相关因子(nuclear factor E2-related factor 2, Nrf2)、醌氧化还原酶-1(nadph:quinone oxidoreductase-1, NQO1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO1)蛋白表达水平的影响。方法 自2020年12月至2021年5月,北部战区总医院烧伤整形科选取40只健康小鼠,其中30只小鼠采用链脲佐菌素腹腔注射法诱导糖尿病小鼠模型成功,小鼠背部做溃疡创面。分组:湿润烧伤膏组(实验组)、康复新液组(阳性对照组)、模型对照组,空白对照组(健康小鼠),每组10只小鼠。实验组和阳性对照组分别给予湿润烧伤膏及康复新液外用换药干预创面,模型对照组和空白对照组不予处理。2周后,采用Western blot法和IHC法检测Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平,比较4组间的差异。利用凝胶成像分析系统测定目的蛋白灰度值/内参蛋白β-actin灰度值的比值代表该蛋白的相对表达水平,同时数码显微镜下随机视野观察蛋白的平均光密度值作为该蛋白的相对表达水平,并进行对比分析。结果 用药2周后实验组、阳性对照组中Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平高于模型对照组,其差异具有统计学意义(P<0.01);实验组、阳性对照组,模型对照组中Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平与空白对照组比较,其差异具有统计学意义(P<0.01);蛋白表达电泳图提示,实验组中蛋白表达灰度值/内参蛋白β-actin灰度值的对比最明显,数码显微镜下观察实验组胞浆内Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达数量明显增多,4组间差异明显。结论 湿润烧伤膏治疗糖尿病小鼠溃疡创面后,Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平均明显增高。
摘要:目的探讨湿润烧伤膏对糖尿病皮肤溃疡小鼠的创面愈合及抗氧化酶中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(gbutathione peroxidase,GSH-px)表达水平的影响。方法自2020年12月至2021年5月,北部战区总医院烧伤整形科选取40只健康小鼠,其中30只小鼠的腹腔内注射链脲佐菌素,诱导成糖尿病小鼠模型,然后将所有小鼠的背部制作溃疡创面。分组:湿润烧伤膏组(实验组)、康复新液对照组(阳性对照组)、模型对照组、空白对照组(健康小鼠),每组10只小鼠。对实验组和阳性对照组的创面分别给予湿润烧伤膏和康复新液进行外用处理,1次/d,连续处理14%d;模型对照组和空白对照组不予处理。2周后,观察小鼠创面的愈合情况及病理变化,采集小鼠球后静脉血,检测血清中抗氧化酶SOD、GSH-PX的表达情况,并比较四组间的差异。结果用药2周后,实验组、阳性对照组创面愈合率明显优于模型对照组,其差异具有统计学意义(P<0.01)。实验组、阳性对照组、模型对照组中SOD、GSH-px的表达与空白对照组比较降低,其差异具有统计学意义(P<0.01),实验组、阳性对照组中SOD、GSH-px的表达与模型对照组比较升高,其差异具有统计学意义(P<0.01)。HE染色结果显示,四组中的成纤维细胞、胶原纤维的再生及排列情况有明显差异。结论湿润烧伤膏处理糖尿病小鼠的溃疡创面后,抗氧化酶SOD、GSH-PX的表达明显升高,具有抗氧化作用。研究表明湿润烧伤膏可促进创面愈合。