摘要：目的:本研究以糖尿病小鼠皮肤溃疡模型为研究对象,观察湿润烧伤膏对模型小鼠皮肤愈合情况的影响,并通过皮肤肉芽组织细胞凋亡及组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平的检测,探讨湿润烧伤膏对糖尿病小鼠皮肤溃疡创面愈合作用机理,为临床治疗糖尿病皮肤溃疡提供实验依据。材料与方法:昆明种SPF级雄性小鼠40只,随机分为4组,分别是空白对照组、模型对照组、康复新液组、湿润烧伤膏组,每组10只。实验前一日,小鼠断食24小时,除空白对照组外,其余各组第二日采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导糖尿病小鼠模型,注射STZ72小时后,随机抽取检测血糖3次,若血糖≥16.7mmol/L,可确定糖尿病小鼠模型造模成功。将全部小鼠背中区域去毛,用手术刀将背中区域皮肤做长约l.5cm的切口,切口深度为暴露肉芽层为度。运用50%冰醋酸刺激创面,使其符合糖尿病皮肤溃疡特点。空白对照组和模型对照组小鼠创面均用无菌生理盐水处理,康复新液组和湿润烧伤膏组分别选取康复新液和湿润烧伤膏进行溃疡面外用干预,每天给药1次,连续7天。观察各组小鼠干预后溃疡面愈合情况;采集创面肉芽组织,制作HE染色切片,进行组织病理学观察;采用TUNEL检测法观察肉芽组织细胞凋亡变化,western-blot法和IHC法检测组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平。结果:1、溃疡面愈合情况与空白对照组相比,模型对照组创面愈合率明显降低,空白对照组与模型对照组创面愈合存在明显差异性(p<0.01);与模型组对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面愈合情况均明显升高,三组间存在明显差异(p<0.01),以湿润烧伤膏组创面愈合情况升高最为显著。2、HE染色情况与空白对照组比较,模型对照组的创面肉芽组织结构细胞杂乱无序排放,胶原纤维叠加呈团絮状;康复新液组的细胞排列为不整齐;湿润烧伤膏组仅见到纤维细胞肥大,细胞排列相对整齐。康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组更接近空白组。3、TUNEL检测法结果与空白对照组相比,模型对照组细胞凋亡数量明显升高,空白对照组与模型对照组细胞凋亡数量存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的皮肤肉芽组织中细胞凋亡数量明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),尤其是湿润烧伤膏组细胞凋亡数量显示最低。4、IHC法检测结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。5、WB检测法结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;结论:1.湿润烧伤膏外用可提高糖尿病小鼠皮肤溃疡的愈合率,加速溃疡面的愈合。2.湿润烧伤膏外用可明显抑制糖尿病皮肤溃疡小鼠细胞凋亡。3.湿润烧伤膏是通过降低糖尿病小鼠皮肤溃疡创面肉芽组织中fas、fasl、caspase3、caspase8蛋白表达,从而抑制细胞凋亡的。

摘要：目的以人体再生复原科学理论为应用研究基础,总结各类糖尿病皮肤溃疡在规范应用皮肤原位再生复原技术过程中的临床表现和相应处置方法,验证保留肢(趾)体,复原功能的临床治疗效果。方法对糖尿病皮肤溃疡规范采用皮肤原位再生复原技术治疗后的创面变化特点进行分析,总结糖尿病皮肤溃疡的治疗经验,分析其作用机制。结果皮肤原位再生复原技术为糖尿病皮肤溃疡创面的原位再生修复创造了生理修复的条件,达到了保留肢(趾)体、溃疡创面原位再生修复的效果。结论规范应用皮肤原位再生复原技术为糖尿病皮肤溃疡提供了全新的治疗方法,糖尿病的系统治疗具有可靠的疗效以及较强的实用性和先进性。

摘要：目的：探讨全蝎软膏对糖尿病皮肤溃疡大鼠模型EGF、PDGF及其受体表达的影响及创面愈合的机理。方法：60只大鼠随机分为对照组、模型组、湿润烧伤膏组和全蝎软膏组，每组15只。建立糖尿病皮肤溃疡大鼠模型，干预后7天及14天，观察并比较大鼠创面愈合率和血清中表皮生长因子(epidenllal giiilllh factor, EGF)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)及其受体水平。结果：全蝎软膏组、湿润烧伤膏组与模型组7 d、14 d同时间点比较创面愈合率，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；全蝎软膏组、湿润烧伤膏组7 d、14 d同时间点比较，差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示，EGF的表达水平，全蝎软膏组、湿润烧伤膏组与模型组比较，7 d差异有统计学意义(P<0.05);14 d差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR的表达水平，全蝎软膏组与湿润烧伤膏组、模型组、空白组7 d、14 d同时间点比较，差异无统计学意义(P>0.05)。PDGFB的表达水平，全蝎软膏组、湿润烧伤膏组与模型组7 d、14 d同时间点比较，差异有统计学意义(P<0.05)。PDGFRB的表达水平，7 d全蝎软膏组与湿润烧伤膏组、模型组、空白组比较，差异无统计学意义(P>0.05);14 d全蝎软膏组、湿润烧伤膏组与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论：全蝎软膏可影响糖尿病皮肤溃疡大鼠模型EGF、PDGF及其受体的表达，促进糖尿病创面愈合。

摘要：目的:探讨全蝎软膏治疗糖尿病皮肤创面愈合的作用及其机制。方法:采用SPF级SD大鼠构建糖尿病皮肤溃疡模型,将其随机平均分为对照组、模型组、全蝎软膏组和湿润烧伤膏组。造模后,分别在创面处涂抹全蝎软膏或湿润烧伤膏处理,空白组和模型组用PBS处理,观察和比较各组创面的愈合情况,并收集用药后3 d、7 d、10 d和14 d的创面肉芽组织进行HE染色,通过ELISA及荧光定量PCR检测肉芽组织内碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管性假血友病因子(v WF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与Smad 4基因的表达。结果:成功构建大鼠糖尿病皮肤溃疡模型,成模率为96.15%。创伤后第3 d、7 d、10 d和14 d,各治疗组创面愈合率均显著高于模型组(P<0.05),给药14 d时,全蝎软膏组创面愈合率已接近对照组水平。HE染色结果显示与模型组相比,全蝎软膏组中肉芽组织生长较快、毛细血管数量增多且组织纤维化程度较低。ELISA和荧光定量PCR检测结果显示与模型组和湿润烧伤膏组相比,全蝎软膏组肉芽组织内bFGF、v WF含量上调更显著(P<0.05),而TNF-α含量与Smad 4 m RNA显著降低(P<0.05)。结论:全蝎软膏可促进糖尿病皮肤溃疡创面肉芽组织的生长,可能与其抑制炎症反应并改善血管功能有关。