摘要：目的用免疫组化法及超微病理技术探讨烧伤湿性医疗技术(Moist Exposed Burn Therapy,MEBT)及其配套产品湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功的大鼠并随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(每组20只)。4组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。治疗第5天和第14天,各组分别处死10只大鼠,利用电镜观察溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构,并用免疫组化技术测定TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,对比各组观察及测定结果。结果治疗第5天和第14天,MEBO组与贝复济组溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构逐步改善,细胞内各细胞器的形态结构逐渐恢复,MEBO组、贝复济组肉芽组织细胞的超微结构情况明显优于模型组。连续换药第5天,MEBO组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显高于模型组(P<0.001),且MEBO组、空白对照组、贝复济组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异;第14天,MEB0组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显低于空白对照组(P<0.001),且MEBO组、贝复济组、模型组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异。结论 MEBT/MEBO能改善细胞的超微结构,并通过动态调节TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,促进糖尿病足溃疡创面的愈合,同时可在一定程度上减少瘢痕形成。

摘要：目的采用RT-PCR检测方法观察皮肤原位再生复原技术(Moist Exposed BurnTreatment/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法将100只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和糖尿病造模组(80只),糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),成功制备糖尿病大鼠模型64只,从中随机选取60只,并随机分为湿润烧伤膏(MEBO)组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只)。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应的药物治疗,并记录创面愈合时间;用药6 d后,采用RT-PCR法观察记录创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA的表达量。结果 (1)4组大鼠创面平均愈合时间对比,空白对照组愈合时间最短;MEBO组、贝复济组、模型组3组大鼠创面平均愈合时间对比,MEBO组愈合时间最短。(2)用药后第6天,模型组大鼠创面肉芽组织中β-catenin mRNA的表达显著低于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠创面肉芽组织中Smad3 mRNA的表达显著高于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可抑制Smad3 mRNA、增强β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达,缩短创面愈合时间,促进糖尿病足溃疡创面的愈合。

摘要：目的 探讨糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化的病理变化及湿润暴露疗法/湿润烧伤膏（MEBT/MEBO）对其干预的机制。方法 80只Wistar雄性大鼠，随机取18只作为急性创面组，其余大鼠建立糖尿病创面模型。将糖尿病创面造模成功的54只大鼠随机分为糖尿病创面组、MEBT/MEBO组、贝复新组，每组18只。各组大鼠换药前均以呋喃西林液清洁创面，急性创面组和糖尿病创面组均外敷2层生理盐水纱布，MEBT/MEBO组外敷2层MEBO纱条（0.2 g/cm2）,贝复新组外敷2层贝复新浸透纱布（60 IU/cm2）,均每日换药2次。分别于造模后第3,7,14天，统计各组创面愈合率，HE染色和Masson染色观察创面病理变化，免疫荧光观察创面组织中层黏连蛋白3（LAMA3）蛋白表达情况，RT-PCR法检测创面组织中LAMA3、整合素α3（ITGA3）、E盒结合锌指蛋白1（ZEB1）mRNA表达量。结果 造模后第7,14天，糖尿病创面组创面愈合率均明显低于其他组（P均<0.05）,MEBT/MEBO组和贝复新组比较差异无统计学意义（P均>0.05）。HE染色和Masson染色显示：造模后第3天，各组创面均处于炎症浸润状态；造模后第7天，糖尿病创面组创面处于炎症浸润状态，胶原纤维稀疏，边缘表皮增厚且无明显迁移，其他组炎症浸润均减轻，表皮增厚并明显迁移；造模后第14天，糖尿病创面组创面仍有炎症浸润，表皮再上皮化不全，其他组创面表皮覆盖且再上皮化明显。造模后第3,7,14天，糖尿病创面组创面组织中LAMA3蛋白阳性表达光密度值和LAMA3、ITGA3 mRNA表达量均明显低于其他组（P均<0.05）,ZEB1 mRNA表达量均明显高于其他组（P均<0.05）,MEBT/MEBO组创面组织中LAMA3蛋白阳性表达光密度值和LAMA3、ITGA3、ZEB1mRNA表达量与贝复新组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化延迟，而MEBT/MEBO能促进创面再上皮化修复，其机制可能与上调再上皮化区LAMA3、ITGA3表达和下调ZEB1表达有关。

摘要：目的 基于miR-126a-3p调控探讨皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠慢性创面血管新生的影响。方法 72只SPF级Wistar雄性大鼠，随机均分为对照组、模型组及MEBO组。构建急性创面和糖尿病慢性创面模型，对照组和模型组均用生理盐水处理，MEBO组用MEBO处理。对比各组创面愈合率，形态学变化，毛细血管数及miR-126a-3p表达量。结果 治疗后第11天及第18天，各组创面愈合率从大到小排列为对照组、MEBO组、模型组，并且，治疗后第18天各组大鼠创面愈合率均高于第11天(P均<0.001)。治疗后第18天模型组和MEBO组毛细血管数量相对于治疗后第1天均明显增加(P<0.001),但MEBO组毛细血管数量增加比模型组更明显(P<0.001)。治疗后第18天，与模型组相比，MEBO组创面组织中miR-126a-3p表达量显著增加(P<0.001)。结论 MEBT/MEBO可能通过上调miR-126a-3p促血管新生，从而促进糖尿病慢性创面愈合。