摘要：目的 探讨象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面凋亡因子胱天蛋白酶（cysteine aspartic acid specific protease, Caspase）的影响。方法 36只SD大鼠建立肛瘘模型后，随机选取27只肛瘘大鼠构建肛瘘术后创面模型，随机分为象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组、模型组，每组9只，剩余9只肛瘘大鼠为假手术组。象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组使用生理盐水冲洗创面后外敷相应药物，模型组仅使用生理盐水冲洗创面，假手术组无特殊处理，每日1次，连续干预10 d。造模后3、5、7、10 d，观察创面愈合情况，计算创面愈合率。药物干预10 d后，从各组取创面组织，HE染色观察创面组织病理学变化，TUNEL法检测创面组织中细胞凋亡数目，免疫组织化学法检测创面组织中Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白的表达。结果 与模型组相比，象皮生肌膏组在干预后3、5、7、10 d时创面愈合率均显著升高（P<0.05,P<0.01），湿润烧伤膏组在干预后5、7、10 d时创面愈合率均显著升高（P<0.05,P<0.01），而象皮生肌膏组创面愈合率在干预后7、10 d均明显高于湿润烧伤膏组（P<0.01）。与假手术组比较，象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组、模型组细胞凋亡率均显著升高（P<0.01），创面组织中Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组细胞凋亡率均显著降低（P<0.01）,Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著下降（P<0.01）；与湿润烧伤膏组比较，象皮生肌膏组细胞凋亡率均显著降低（P<0.01）,Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著下降（P<0.01）。结论 象皮生肌膏能通过抑制肛瘘术后创面组织细胞凋亡，抑制凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12的表达，促进创面愈合。

摘要：目的:本研究以糖尿病小鼠皮肤溃疡模型为研究对象,观察湿润烧伤膏对模型小鼠皮肤愈合情况的影响,并通过皮肤肉芽组织细胞凋亡及组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平的检测,探讨湿润烧伤膏对糖尿病小鼠皮肤溃疡创面愈合作用机理,为临床治疗糖尿病皮肤溃疡提供实验依据。材料与方法:昆明种SPF级雄性小鼠40只,随机分为4组,分别是空白对照组、模型对照组、康复新液组、湿润烧伤膏组,每组10只。实验前一日,小鼠断食24小时,除空白对照组外,其余各组第二日采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导糖尿病小鼠模型,注射STZ72小时后,随机抽取检测血糖3次,若血糖≥16.7mmol/L,可确定糖尿病小鼠模型造模成功。将全部小鼠背中区域去毛,用手术刀将背中区域皮肤做长约l.5cm的切口,切口深度为暴露肉芽层为度。运用50%冰醋酸刺激创面,使其符合糖尿病皮肤溃疡特点。空白对照组和模型对照组小鼠创面均用无菌生理盐水处理,康复新液组和湿润烧伤膏组分别选取康复新液和湿润烧伤膏进行溃疡面外用干预,每天给药1次,连续7天。观察各组小鼠干预后溃疡面愈合情况;采集创面肉芽组织,制作HE染色切片,进行组织病理学观察;采用TUNEL检测法观察肉芽组织细胞凋亡变化,western-blot法和IHC法检测组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平。结果:1、溃疡面愈合情况与空白对照组相比,模型对照组创面愈合率明显降低,空白对照组与模型对照组创面愈合存在明显差异性(p<0.01);与模型组对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面愈合情况均明显升高,三组间存在明显差异(p<0.01),以湿润烧伤膏组创面愈合情况升高最为显著。2、HE染色情况与空白对照组比较,模型对照组的创面肉芽组织结构细胞杂乱无序排放,胶原纤维叠加呈团絮状;康复新液组的细胞排列为不整齐;湿润烧伤膏组仅见到纤维细胞肥大,细胞排列相对整齐。康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组更接近空白组。3、TUNEL检测法结果与空白对照组相比,模型对照组细胞凋亡数量明显升高,空白对照组与模型对照组细胞凋亡数量存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的皮肤肉芽组织中细胞凋亡数量明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),尤其是湿润烧伤膏组细胞凋亡数量显示最低。4、IHC法检测结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。5、WB检测法结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;结论:1.湿润烧伤膏外用可提高糖尿病小鼠皮肤溃疡的愈合率,加速溃疡面的愈合。2.湿润烧伤膏外用可明显抑制糖尿病皮肤溃疡小鼠细胞凋亡。3.湿润烧伤膏是通过降低糖尿病小鼠皮肤溃疡创面肉芽组织中fas、fasl、caspase3、caspase8蛋白表达,从而抑制细胞凋亡的。