摘要：目的:通过对细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的表达水平研究,来探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过影响CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达水平,加快治疗慢性难愈合性创面修复进程,探讨MEBT/MEBO的部分作用机制,为其临床推广应用于慢性难愈合创面的治疗提供参考数据。方法:(1)健康成年SPF级Wistar雄性大鼠60只,用随机数字表法分为:空白组(KB组)12只、急性组(JX组)12只、模型组(MX组)12只、MEBO组(MB组)12只和贝复新组(BFX组)12只。KB组只剃毛,JX组只切除皮肤,后三组建立大鼠慢性难愈合创面模型。每日换药2次。(2)分别在造模后第3、7、14天,每组处死4只大鼠后,再取标本,观察各组大鼠的创面情况,并计算其愈合率,通过HE染色及Masson染色来观察创面组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测各组CollagenⅠ和CollagenⅢ的蛋白表达变化及CollagenⅠ和CollagenⅢ的mRNA转录水平的差异。结果:(1)疗效观察:MB组和BFX组创面修复效果好,创面修复情况与JX组无显著性差异(P>0.05)。HE染色及Masson染色:与MX组相比,JX组、MB组和BFX组的毛细血管、胶原纤维、皮肤及皮肤附属器新生较快。(2)各组大鼠创面组织中Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白表达:造模后第14天,JX组的CollagenⅠ和Collagen Ⅲ蛋白表达水平与KB组无统计学差异(P>0.05),JX组接近愈合状态。造模后第3天,JX组的两种蛋白表达水平最低(P<0.05);造模后第7天,MX组、MB组和BFX组三组的Collagen Ⅰ蛋白表达水平上升,JX组表达仍最低(P<0.05);造模后第14天,JX组的Collagen Ⅰ蛋白表达水平继续保持上升,而MX组、MB组呈下降趋势(P<0.05)。造模后第14天,MX组的CollagenⅢ蛋白表达水平下降,另外三组呈现上升趋势(P<0.05)。到愈合后期,计算Collagen Ⅰ:Collagen Ⅲ的比值,MX组高于MB组...

摘要：目的:探讨皮肤医疗再生技术对慢性难愈合创面组织中核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响,来探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏影响慢性难愈合创面进程中是否涉及到NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα表达的相互作用,探讨MEBT/MEBO的部分作用机制,为临床应用MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面提供理论依据与技术壁垒。方法:(1)方法:选取SPF级别健康2月龄Wistar雄性大鼠,90只,体重范围235±15g,适应性喂养一周。用随机数法将90只大鼠分为5组,每组18只,分别是:空白组、对照组(急性全层皮肤缺损组)、模型组、MEBO组、贝复新组。慢性难愈合创面组包括模型组、MEBO组和贝复新组。空白组大鼠不作任何有损伤性处理;对照组大鼠行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;慢性难愈合创面组大鼠根据付小兵教授制备全层皮肤缺损模型结合沈氏改良塑料环肉芽肿定量法,经改进,建立大鼠慢性难愈合创面模型。所有组别除空白组外在造模后立刻用药处理。换药前,每组每天用1/5000呋西林溶液清洗两次。(2)在建立模型后的第3天、第7天、第14天分别每组麻醉6只大鼠取单侧标本,继续观察大鼠创面达到完全愈合时间,观察各组大鼠的创面情况、愈合时间及愈合率,通过HE染色观察大鼠模型创面内的炎症细胞变化及数量和Masson染色观察大鼠模型创面肉芽组织病理形态学变化、胶原蛋白的生成、组织中纤维以及炎性因子。(3)采用Western Blot检测细胞外基质成分中的NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达变化差异,观察各组受干预后对创面中NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα的表达的影响。(4)采用免疫荧光测定NF-κB p65入核荧光强度,间接性半定量观察炎症因子的表达趋势。结果:(1)干预第3、7天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P>0.05);干预第14天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P<0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异(P>0.05)。MEBO与对照组和贝复新组对比,创面愈合时间无明显差别(P>0.05),与模型组相比,MEBO组愈合时间明显短于模型组(P...

摘要：目的探讨分析湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病溃疡大鼠创面组织中基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂-2 (TIMP-2)表达水平的影响。方法从160只健康雄性SD大鼠中随机选取120只制备大鼠糖尿病模型,其余40只正常喂养;最终选取90只造模成功大鼠随机分为模型组、MEBO组与bFGF组,每组30只,与此同时随机选取未予特殊处理的30只大鼠作为空白组,所有大鼠均做全层皮肤缺损创面,空白组与模型组大鼠创面予以凡士林油纱换药处理、MEBO组大鼠创面予以MEBO药纱换药处理、hFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)药纱换药处理,对比观察各组大鼠干预第4、6、12天时创面愈合率以及MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与胶原蛋白水平变化情况。结果 (1)干预第4、6、12天,模型组大鼠创面愈合率均明显低于其他各组(P均<0.05),空白组大鼠创面愈合率均明显高于其他各组(P均<0.05),而MEBO组与bFGF组间无明显差异(P均>0.05)。(2)干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中MMP-9及MMP-2 mRNA表达水平均明显高于其他各组(P均<0.05),TIMP-1及TIMP-2mRNA表达水平均明显低于其他各组(P均<0.05);除干预第6天MEBO组大鼠创面组织中TIMP-1 mRNA表达水平明显高于bFGF组(P<0.05)外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均无明显差异(P均> 0.05)。(3)干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显低于其他各组(P均<0.05);除干预第4天MEBO组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显高于bFGF组(P<0.05)外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中胶原蛋白水平均无明显差异(P均>0.05)。结论 MEBO可通过调控糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平改善胶原蛋白过度降解,维持细胞外基质代谢平衡,进而促进创面愈合,调节MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2的比例失衡可能是其促进糖尿病溃疡创面愈合的作用靶点。