摘要：目的:通过对S D大鼠默克尔细胞（merkel cell,MCs）的提取、分离、培养及鉴定,观察局部注射MCs联合美宝湿润烧伤膏（MEBO）外用对大鼠足底创面神经再生的影响。方法:1)取新生SD大鼠（1～3d）足垫、须垫及背部皮肤,采用酶消化法分离提取MCs,接种于多聚赖氨酸（PLL）包被的培养瓶内,通过细胞免疫组织化学法测定细胞角蛋白CK20的表达,qPCR检测MCs中Piezo2 mRNA的表达,ELISA法检测培养第2d、4d、6d、8d、10d细胞分泌CGRP情况。2)建立SD大鼠足底创面模型,按照干预方式的不同分为如下五组:A组（MCs注射+MEBO组）;B组（MCs局部注射组）;C组（MEBO外用组）;D组（阴性对照组）;E组（鼠神经生长因子注射阳性对照组）。细胞组用MCs 1×106个/mL分别注射于创面基底中央及创缘3、6、9、12点标记处,24小时后追加1次,每次每个部位25μL;MEBO组按相应分组给予MEBO外用,每日换药一次,直至创面愈合。阳性及空白对照组分别予等体积鼠神经生长因子及PBS注射。观察创面愈合时间,计算各组创面各时间点愈合率,棉拭子检测足底感觉恢复情况,分别于干预后7d、14d、21d三个时相各组分别随机抽取6只大鼠,切取组织,制作石蜡切片,免疫荧光染色观察新生皮肤神经纤维生长情况。3)每组大鼠均于造模后第7d、14d、21d时用棉拭子检测大鼠足底缩足反射,记录、统计缩足次数并计算百分比。结果:1)采用中性蛋白酶和胰酶依次消化SD大鼠足底及须垫部位所取皮肤组织可得到较多MCs,以CK20做细胞免疫化学染色可见MCs呈阳性反应。2)实验中应用中性蛋白酶及胰酶双酶消化法可得到MCs,以Ham,s F-12培养基为基础培养基,加入20ng/ml bFGF可使MCs稳定增殖;qPCR结果示MCs中Piezo2 mRNA的表达量为:0.0270±0.0042;酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测检测MCs上清液中降钙素基因相关肽（CGRP）在培养第2、4、6、8、10天浓度随培养时间的延长逐渐增加,培养第6d到8d时增加速率更快,间接提示默克尔细胞增殖情况。3)创面愈合方面,大体观察肿胀程度及炎性反应程度无明显区别,总愈合时间上应用MEBO的两组创面较其他实验组提前,A组E组愈合时间分别为14.33±0.69天、16.44±0.86天、14.83±0.71天、1...

摘要：背景:临床上超脉冲CO2点阵激光治疗浅表性瘢痕的效果优良,但机制不清。目的:进一步验证超脉冲CO2点阵激光干预兔耳浅表性瘢痕的效果,并探讨创面原位再生修复的相关机制。方法:用超脉冲CO2点阵激光干预兔耳浅表性瘢痕,传统络合碘治疗和湿润烧伤膏治疗两种修复方法对创面进行修复。结果与结论:湿润烧伤膏组创面愈合显著短于络合碘组(P<0.01)。超脉冲CO2点阵激光干预兔耳浅表性瘢痕后即刻创缘无表皮干细胞标志分子细胞角蛋白19、P63蛋白表达,24h后细胞角蛋白19、P63蛋白表达。湿润烧伤膏组治疗后第4天细胞角蛋白19、P63蛋白开始增多,第7天达到高峰,第14天逐渐减少;络合碘组治疗后第4天细胞角蛋白19、P63蛋白达高峰,第7天和第14天减少。湿润烧伤膏组细胞角蛋白19、P63蛋白强阳性表达率显著高于络合碘组(P<0.05)。提示超脉冲CO2点阵激光结合湿润暴露疗法治疗兔耳浅表性瘢痕,能更好地启动和保护表皮干细胞,促进创面原位再生修复。

摘要：目的观察湿润烧伤膏(MEBO)外用对大鼠足底创面触觉功能重建的影响并初步探讨其机制。方法将60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为5组:正常组(N组)、创面7d组(D7组)、创面14d组(D14组)、MEBO治疗7d组(MEBO7组)和MEBO治疗14d组(MEBO14组),每组12只。N组大鼠不做任何处理;D7组、D14组、MEBO7组和MEBO14组建立足底全层皮肤缺损开放性创面大鼠模型,D7组和D14组建模后不予药物治疗,分别观察7d和14d;MEBO7组和MEBO14组在建模后分别给予创面涂抹MEBO治疗7d和14d。Von Frey纤维丝检测各建模组大鼠建模侧后足底创面触觉阈值;分别取正常或建模后7d和14d时间点大鼠足底创面新生肉芽组织,采用免疫组织化学和蛋白质印迹法检测正常或建模大鼠建模侧足底创面细胞角蛋白20(CK-20)阳性细胞数及CK-20蛋白的表达水平。结果大鼠建模后,足底创面触觉阈值升高,触觉功能减退,新生肉芽组织中CK-20阳性细胞数减少,CK-20蛋白水平降低,与N组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);MEBO7组和MEBO14组大鼠足底创面经MEBO治疗后,创面触觉阈值下降,触觉功能增强,新生肉芽组织中CK-20阳性细胞数增多,CK-20蛋白水平升高,与同时间点D7组和D14组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论外用MEBO能促进大鼠足底创面触觉功能的重建,其机制与增加创面新生肉芽组织中CK-20阳性细胞的表达有关。

摘要：目的:探讨大黄素对大鼠烫伤创面模型皮肤表皮细胞增殖的作用。方法:选取健康SD大鼠120只,雌雄各半,随机分为对照组、模型组、湿润烧伤膏组、大黄素低浓度组及大黄素高浓度组,各24只。模型组、湿润烧伤膏组、大黄素低浓度组及大黄素高浓度组大鼠采用80℃水浴法建立深Ⅱ度烫伤创面模型,对照组大鼠给予25℃水浴。模型建立后,模型组和对照组给予生理盐水外擦,1次/d;湿润烧伤膏组给予湿润烧伤膏1 g外敷,1次/d;大黄素低浓度组给予150μg/g大黄素软膏1 g外敷,1次/d;大黄素高浓度组给予200μg/g大黄素软膏1 g外敷,1次/d;各组大鼠连续用药21 d。对大鼠创面愈合时间、创面愈合率、创面皮肤组织毛细血管数、细胞角蛋白19(K19)阳性细胞数、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平进行检测。结果:治疗后,与模型组比较,各组大鼠创面愈合时间较短,且大黄素低浓度组>大黄素高浓度组、湿润烧伤膏组,差异有统计学意义(P<0.05)。给药后7、14、21 d,与模型组比较,各组大鼠创面愈合率、EGF水平、VEGF水平较高,皮肤毛细血管数、K19阳性细胞数较多,且大黄素低浓度组<大黄素高浓度组、湿润烧伤膏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大黄素能加速大鼠烫伤模型创面愈合,且药物浓度越高效果越明显,其作用可能与上调EGF、VEGF表达,促进皮肤表皮细胞增殖及毛细血管生成有关。