摘要：<正>造血干细胞移植(HSCT)是经过大剂量放化疗,或其他免疫抑制预处理,清除受体体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞,阻断发病机制,然后将自体或异体造血干细胞移植给受体,使受体重建

摘要：目的:研究湿润烧伤膏对脂多糖致大鼠皮肤成纤维细胞损伤的改善作用及其机制。方法:将大鼠皮肤成纤维细胞分为对照组、脂多糖组(5μg/mL)、康复新液组(阳性对照,5μg/mL脂多糖+1.25%康复新液)和湿润烧伤膏组(5μg/mL脂多糖+0.6 mg/mL湿润烧伤膏),每组设置6个复孔。以脂多糖诱导建立炎性损伤细胞模型(对照组除外)。培养一定时间后,检测各组细胞存活率和细胞迁移率,测定细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量,检测细胞内IL-6蛋白定位和荧光强度,检测细胞中同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)、磷酸化p65(p-p65)、TNF-α、IL-6、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,脂多糖组细胞存活率显著升高、迁移率显著降低,细胞上清液中TNF-α、IL-6含量和PTEN、p-p65、TNF-α、IL-6和PI3K蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.01),IL-6蛋白主要在细胞质中表达且荧光强度增强。与脂多糖组比较,康复新液组和湿润烧伤膏组细胞存活率均显著降低、迁移率均显著升高;TNF-α、IL-6含量和PTEN、p-p65、TNF-α、IL-6(除康复新液组外)、PI3K、Akt(除康复新液组外)蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-6蛋白荧光强度减弱,且湿润烧伤膏组细胞中TNF-α、IL-6、PI3K、Akt蛋白的相对表达量均显著低于康复新液组(P<0.05或P<0.01)。结论:湿润烧伤膏可抑制脂多糖诱导的大鼠皮肤成纤维细胞增殖,降低炎性因子水平和炎症反应强度,其机制可能与下调PTEN/核因子κB、PI3K/Akt信号通路有关。

摘要：目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)干预糖尿病性溃疡创面组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)m RNA表达及超微结构的作用机制。方法于2015年6月选取145只12周龄的雄性健康SPF级SD大鼠,采用随机数字表法将其分为空白组(35只)和糖尿病模型组(110只),糖尿病模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法制备糖尿病大鼠模型,8周后选取空白组30只和糖尿病模型组成模大鼠90只,采用随机数字表法将糖尿病模型组成模大鼠分为模型亚组、贝复济亚组及MEBO亚组,各30只,均制备糖尿病性溃疡创面模型。模型制备成功后,空白组及模型亚组给予0.9%氯化钠溶液纱条、贝复济亚组给予贝复济溶液纱条、MEBO亚组给予MEBO纱条局部换药处理,1次/d,共12 d。各组分别于创面干预治疗后第3、6、12天,每次随机选取10只大鼠,取相同位点创面组织,应用荧光聚合酶链式反应(PCR)技术检测ICAM-1、VCAM-1 m RNA表达水平,电镜观察创面组织超微病理结构。结果模型亚组第3天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平低于空白组,第6、12天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平均高于空白组(P<0.05);贝复济亚组第12天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平低于模型亚组(P<0.05);MEBO亚组第3天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平高于模型亚组,第6、12天创面组织ICAM-1m RNA表达水平均低于模型亚组(P<0.05)。模型亚组第3天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平低于空白组,第6、12天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平均高于空白组(P<0.05);贝复济亚组、MEBO亚组第3天创面组织VCAM-1m RNA表达水平均高于模型亚组,第6、12天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平均低于模型亚组(P<0.05)。病理结果显示:干预后第6、12天,与模型亚组比较,贝复济亚组和MEBO亚组细胞结构均逐步改善,能促进各细胞器形态恢复正常。结论 MEBO能够调控糖尿病性溃疡创面组织中糖基化终末产物(AGEs)-AGEs受体(RAGE)信号通路下游因子ICAM-1、VCAM-1的表达,改善细胞超微结构,促进糖尿病性溃疡创面愈合。

摘要：目的:本研究以糖尿病小鼠皮肤溃疡模型为研究对象,观察湿润烧伤膏对模型小鼠皮肤愈合情况的影响,并通过皮肤肉芽组织细胞凋亡及组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平的检测,探讨湿润烧伤膏对糖尿病小鼠皮肤溃疡创面愈合作用机理,为临床治疗糖尿病皮肤溃疡提供实验依据。材料与方法:昆明种SPF级雄性小鼠40只,随机分为4组,分别是空白对照组、模型对照组、康复新液组、湿润烧伤膏组,每组10只。实验前一日,小鼠断食24小时,除空白对照组外,其余各组第二日采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导糖尿病小鼠模型,注射STZ72小时后,随机抽取检测血糖3次,若血糖≥16.7mmol/L,可确定糖尿病小鼠模型造模成功。将全部小鼠背中区域去毛,用手术刀将背中区域皮肤做长约l.5cm的切口,切口深度为暴露肉芽层为度。运用50%冰醋酸刺激创面,使其符合糖尿病皮肤溃疡特点。空白对照组和模型对照组小鼠创面均用无菌生理盐水处理,康复新液组和湿润烧伤膏组分别选取康复新液和湿润烧伤膏进行溃疡面外用干预,每天给药1次,连续7天。观察各组小鼠干预后溃疡面愈合情况;采集创面肉芽组织,制作HE染色切片,进行组织病理学观察;采用TUNEL检测法观察肉芽组织细胞凋亡变化,western-blot法和IHC法检测组织中fas、fasl、caspase3、caspase8的蛋白表达水平。结果:1、溃疡面愈合情况与空白对照组相比,模型对照组创面愈合率明显降低,空白对照组与模型对照组创面愈合存在明显差异性(p<0.01);与模型组对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面愈合情况均明显升高,三组间存在明显差异(p<0.01),以湿润烧伤膏组创面愈合情况升高最为显著。2、HE染色情况与空白对照组比较,模型对照组的创面肉芽组织结构细胞杂乱无序排放,胶原纤维叠加呈团絮状;康复新液组的细胞排列为不整齐;湿润烧伤膏组仅见到纤维细胞肥大,细胞排列相对整齐。康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组更接近空白组。3、TUNEL检测法结果与空白对照组相比,模型对照组细胞凋亡数量明显升高,空白对照组与模型对照组细胞凋亡数量存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的皮肤肉芽组织中细胞凋亡数量明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),尤其是湿润烧伤膏组细胞凋亡数量显示最低。4、IHC法检测结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的胞浆内呈褐色表达,空白对照组与模型对照组创面蛋白表达存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的创面胞浆内褐色表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组胞浆内褐色表达明显更低。5、WB检测法结果fas结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;fasl结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase3结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;caspase8结果显示:与空白对照组比较,模型对照组的阳性表达明显升高,空白对照组与模型对照组存在明显差异性(p<0.01);与模型对照组相比,康复新液组、湿润烧伤膏组的阳性表达明显降低,三组间存在明显差异(p<0.01),康复新液组与湿润烧伤膏组比较,湿润烧伤膏组阳性表达相对最低;结论:1.湿润烧伤膏外用可提高糖尿病小鼠皮肤溃疡的愈合率,加速溃疡面的愈合。2.湿润烧伤膏外用可明显抑制糖尿病皮肤溃疡小鼠细胞凋亡。3.湿润烧伤膏是通过降低糖尿病小鼠皮肤溃疡创面肉芽组织中fas、fasl、caspase3、caspase8蛋白表达,从而抑制细胞凋亡的。