摘要:目的:从PTEN/AKT/VEGF信号通路进一步探讨MEBT/MEBO促进大鼠难慢性难愈合创面修复的机制。方法:健康成年SPF级Wistar雄性大鼠90只,12周龄,体重220g250g,适应性喂养1周后,随机分为:空白对照组18只、对照组(急性全层皮肤缺损组)18只、模型组54只。空白对照组大鼠不作任何有损伤处理;对照组大鼠在造模部位行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;模型组大鼠在造模部位行全层皮肤切除后注射氢化可的松制备慢性难愈合创面模型,然后按处理方法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组18只。各组创面制备后立即用药治疗。在造模后第3天、第7天、第14天每组各处死6只,取新鲜创面组织,立即放于液氮罐中,并在取材完毕后迅速转入﹣80℃超低温冰箱。待标本全部收集完成后进行Western Blotting、RT-PCR方法检测PTEN、p-AKT、VEGFR2因子的表达。结果:(1)PCR结果:(1)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中PTEN表达量都呈现出降低-升高的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递减趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组、对照组和模型组各组三个时相点的PTEN表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠三个时相点的PTEN表达量未有明显变化(P>0.05)。(2)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中VEGFR2表达量都呈现出升高-降低的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递增趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组、对照组和模型组各组三个时相点的VEGFR2表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故VEGFR2表达量未有明显变化(P>0.05)。(3)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中p-AKT表达量都呈现出升高-降低的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递增趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组和对照组各组三个时相点的p-AKT表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故p-AKT表达量未有明显变化。(2)WB结果:(1)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中PTEN表达量都呈现出降低-升高的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递减趋势(P<0.05);M...
摘要:目的:观察皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、磷酸化smad3(P-smad3)表达及形态学结构的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、贝复济组和MEBT/MEBO组,每组各20只。模型组、MEBT/MEBO组和贝复济组大鼠参照糖尿病模型制备法,采用腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素,建立糖尿病动物模型;空白对照组大鼠则腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。分别于干预治疗后第5、14天各取相同部位创面组织,采用Western blot法检测TGF-β1、Smad3和P-smad3蛋白表达水平,常规病理技术观察溃疡创面组织形态学结构,各组间差异比较采用方差分析和秩和检验。结果:治疗后5 d,各组大鼠Smad3蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(F=1.036,P=0.388);MEBT/MEBO组、贝复济组的大鼠TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平则均明显低于空白对照组(P=0.005、P=0.026,P=0.001、P=0.005);而且,上述2组大鼠的TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平亦明显高于模型组(P=0.000);此外,与第5天结果相比,第14天MEBT/MEBO组与贝复济组的TGF-β1、P-smad3表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P=0.000)。治疗后第5天,MEBT/MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞形态、毛细血管新生情况优于模型组,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,空白对照组胶原纤维增生明显但排列紊乱,模型组胶原纤维呈团状增生。结论:MEBT/MEBO在创面愈合早期可激活TGF-β1/Smad3信号通路,促进创面损伤修复,而在愈合晚期则抑制该信号通路的活化,控制创面组织过度增生。
摘要:目的探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及配套产品湿润烧伤膏(MEBO)对大鼠慢性难愈性皮肤溃疡创面肉芽组织表皮生长因子(EGF)、表皮细胞生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠45只,参照付小兵大鼠慢性性皮肤溃疡创面模型制作方法制作模型,成模后再采用随机数字表法随机分为模型组(15只)、MEBO组(15只)、贝复剂组(15只),造模后第2天开始用药,观察用药后各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,记录创面愈合时间;常规病理切片观察创面炎症、成纤维细胞数量、血管改变情况;透射电镜观察成纤维细胞及其线粒体形态结构;换药后第7、14天取创面组织,采用免疫组织化学法(SP法)观察MEBO对创面肉芽组织EGF、EGFR表达的影响。结果 MEBO组大鼠的创面愈合情况明显好于模型组与贝复济组;创面愈合时间明显短于模型组及贝复济组(P<0.05;P<0.01);病理学观察:MEBO组与贝复剂组及模型组比较,炎症反应轻、肉芽组织生长良好,纤维增生程度低;换药后第7、14天,MEBO组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数分别较模型组和贝复济组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBO能增加慢性皮肤溃疡创面肉芽组织中EGF、EGFR的表达量,从而促进慢性皮肤溃疡愈合。
摘要:目的:探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及产品湿润烧伤膏(MEBO)促进大鼠慢性难愈合皮肤创面组织愈合的机制。方法:建立慢性难愈合创面模型,观察MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。结果:①创面愈合大体情况:观察造模后创面肉芽组织生长情况,发现MEBO组、贝复济组大鼠创面内芽组织生长情况明显好于模型组,MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠创面较苍白,生长缓慢。②创面愈合时间:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合时间为16.28±1.19d,短于贝复济组17.52±1.20d(P<0.05),明显短于模型组27.10±2.90d(P<0.05),差异有统计学意义。③ATF2和p38蛋白的表达:模型组ATF2和p38蛋白的表达明显低于MEBO组、贝复济组(P<0.01),MEBO组在第14天高于模型组(P<0.05)。结论:MEBO能促进大鼠慢性难愈合皮肤创面愈合的速度和质量,功效优于模型组。MEBO能影响p38MAPK信号通路相关蛋白中ATF2和p38的表达,从而激活p38MAPK信号通路,影响和调控细胞效应,进而促进细胞因子的产生以及随后的细胞增殖,血管再生和基质修复,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。