摘要：目的:通过检测不同干预方案下大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白15(cytokeratin-15 CK15)与细胞角蛋白19(cytokeratin-19 CK19)的动态表达,探讨完善皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进创面愈合的部分分子学机制,从而为其在临床治疗上推广应用提供理论支持。方法:将90只健康成年Wistar雄性大鼠(SPF级)随机分为空白组(18只)、急创对照组(18只)、慢创模型组(18只)、MEBO组(18只)和Rb-b FGF(18只)。其中空白组不做损伤处理,急创对照组做急性全层皮肤缺损创面模型,慢创模型组、MEBO组和Rb-b FGF组在急创对照组基础上注射氢化可的松,制备慢性难愈合创面模型。模型建立后给予创面换药,每日两次。急创对照组与慢创模型组创面给予碘伏消毒,MEBO组碘伏消毒后涂抹MEBO治疗,Rb-b FGF组碘伏消毒后涂抹重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel Rb-b FGF)治疗。最后分别于治疗后第3,7,14天在各组中分别随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后,完整切取创面肉芽组织。一部分组织给予甲醛固定,之后进行HE染色。其余组织投入-80℃冰箱。所有时相点组织收集完毕后,应用Western Blotting技术以及Real Time PCR技术统一检测、对比各组大鼠创面组织中CK15、CK19蛋白表达量及CK15、CK19m RNA的转录水平。结果:(1)HE染色,各组样本HE染色后显微镜下观察,空白组未见变化,均为正常皮肤组织学形态。在造模后的第3天,急创对照组组织水肿,同时可见大量中性粒细胞浸润。慢创模型组,MEBO组,Rb-b FGF组组织间水肿,少量淋巴细胞浸润。在造模后的第7天,急创对照组镜下见中性粒细胞减少,组织间水肿减轻,少量毛细血管再生。MEBO组,Rb-b FGF组淋巴浸润情况亦有所减少,组织间水肿有所改善,除血管新生外,还可见少量毛囊。而慢创模型组淋巴细胞浸润程度未见减轻,组织水肿仍明显,缺乏新生毛细血管。在造模后的第14天,急创对照组,MEBO组,Rb-b FGF组组织无炎性细胞浸润,水肿不明显,可见新生的分层表皮结构,同时可见毛囊、皮脂腺...

摘要：目的:通过观察研究不同治疗方案下大鼠创面组织CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量。阐述皮肤原位再生医疗技术(Moist expose burn ointment/moist expose burn therapy,MEBT/MEBO)对慢性难愈合创面的治疗效果。同时进一步揭示MEBT/MEBO在改善慢性难愈合创面的部分作用机制。方法:本研究通过将90只SPF级wistar大鼠随机分为5组,分别为空白组(18只)、急创组(18只)、慢创组(18只)、rb-bFGF组(18只)及MEBO组(18只)。分别按照各组的要求对创面进行处理,于造模治疗后第3、7、14天采取大鼠创面组织。对3个时相点相同部位大鼠创面组织进行石蜡切片和Masson染色,观察对其各组大鼠创面组织形态学差异。运用western blot及RT-PCR法对第3、7、14天的大鼠创面组织的CK10、CK14的蛋白及mRNA表达量进行检测并对比其差异。结果:(1)空白组大鼠创面组织镜下形态学未见明显改变。随着治疗周期的延长,大鼠创面组织水肿逐渐消退,新生血管明显增多,皮肤附属器官逐渐形成。在愈合过程中,急创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织明显优于慢创组大鼠创面组织。(2)Western Blotting:空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14的蛋白表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14蛋白的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7天、14天同组大鼠之间存在较明显的差异,不仅具有统计学意义(P<0.05),而且还呈现出一个逐渐增多的趋势。我们观察实验中第7天和第14天这两个时相点结果发现,rb-bFGF组和MEBO组这两组大鼠创面组织中所测得结果明显要优于慢创组,同样经过统计分析证明了其具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR:其表达结果和Western Blotting相符合,空白组大鼠在实验过程中未对其做任何干预处理,我们所取组织中CK10、CK14 mRNA的表达在实验所采用的3个时相点上并无实质性差异,经统计学计算后也证实了其间的差异是没有统计学意义的(P>0.05)。余下4组大鼠创面组织中CK10、CK14 mRNA的表达量在不同的时相点存在差异,对比发现3天、7...

摘要：目的：观察超脉冲CO2点阵激光Active FX、Deep FX治疗兔耳浅表性瘢痕的创面愈合情况并比较湿性创面护理技术和传统外科创面护理技术，创面愈合的差异性。研究CK19、P63在兔耳浅表性瘢痕点阵激光修复中的表达及不同创面护理技术对它们的影响，为临床采用超脉冲CO2点阵激光治疗瘢痕、寻找表皮干细胞参与瘢痕修复的证据。方法:选取新西兰大白兔20只，在兔耳腹侧面制作边长为1.5cm的正方形全层皮肤及软骨膜缺损创面，每只兔耳2个创面，共计80个创面，建立兔耳浅表性瘢痕模型。激光治疗分为两组: UltraPulse CO2Fractional（超脉冲CO2点阵）激光Active FX治疗组和UltraPulse CO2Fractional（超脉冲CO2点阵）激光Deep FX治疗组;激光治疗后创面修复分为两组：传统络合碘治疗方法组和湿润烧伤膏治疗方法组。每天观察创面愈合情况，记录每个创面的愈合时间；收集治疗前、治疗后即刻、1天、4天、7天、14天的瘢痕组织标本作病理组织切片，行HE染色镜下观察，并采用免疫组化检测皮肤干细胞标志分子角蛋白19（cytokeratinsCK19）、转录因子P63的表达，分析超脉冲CO2点阵激光两种不同模式和两种创面修复方法对CK19、P63的影响。结果:1、大体观察：络合碘组Active FX、Deep FX模式治疗后第2～3天创面开始干燥结痂、第9～10天痂皮开始脱落、第14天创面愈合，瘢痕较治疗前平整，颜色变浅；湿润烧伤膏组Active FX模式治疗后创面湿润，第2～3天创面可见散在点状结痂，第5～6天点状痂皮脱落,Deep FX模式治疗后创面未见明显结痂，治疗后第6～7天创面上皮化愈合。点阵激光Active FX模式治疗：络合碘组创面愈合时间为（13.7±0.65）天，湿润烧伤膏组创面愈合时间为（10.4±0.80）天，组间差异有统计学意义（P＜0.05）；点阵激光Deep FX模式治疗：络合碘组创面愈合时间为（9.4±0.28）天，湿润烧伤膏组创面愈合时间为（7.5±0.62）天，组间差异有统计学意义（P＜0.05）；Active FX模式和Deep FX模式治疗创面愈合时间对比，...