摘要：目的 探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。方法 选取90只SPF级Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后，采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组，每组18只。其中空白组大鼠只做备皮处理，对照组大鼠建立急性创面模型，模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后，空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理，MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理，贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理，对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1蛋白与HO-1、NQO1 mRNA表达水平。结果 干预第3天，各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之(P均<0.05);干预第7、14天，各组大鼠创面愈合率尤以MEBO组最高、贝复新组次之(P均<0.05)。HE染色结果显示，干预第3、7、14天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少，成纤维细胞与毛细血管逐渐增多，而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显；Masson染色结果显示，干预第3、7、14天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整，而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多，但排列仍较紊乱。干预第7天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内MDA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05);干预第3、7天，对照组、MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内SOD表达水平均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7天，MEBO组和贝复新组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1、NQO1蛋白以及HO-1、NQO1 mRNA表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组(P均<0.05),且干预第7天，MEBO组大鼠创面组织内Nrf2、HO-1蛋白以及HO-1 mRNA表达水平均明显低于贝复新组(P均<0.05)。结论 MEBT/MEBO可能能够通过激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤，促进创面再生修复。

摘要：目的研究探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的影响。方法将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(12只)、对照组(12只)、模型组(12只)、贝复新组(12只)及MEBO组(12只),其中,空白组大鼠做背部备皮处理后采用生理盐水纱布湿敷;对照组大鼠做深达筋膜层的全层皮肤缺损创面模型后采用生理盐水纱布覆盖治疗;模型组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用生理盐水纱布覆盖治疗;贝复新组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用贝复新治疗;MEBO组大鼠做慢性难愈合创面模型后采用MEBO治疗。分别于治疗第3、7、14天取各组大鼠相同部位皮肤或创面组织进行HE染色,并用Western blot法检测组织中EGFR的含量,对比观察各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR的表达水平及组织病理变化。结果局部处理后第3、7天,除空白组外,其余各组大鼠创面组织HE染色病理切片均显示炎症细胞增多,有新生血管生成;局部处理后第14天,对照组、贝复新组、MEBO组大鼠创面组织中炎症细胞消失,创面再上皮化。局部处理后第3、7、14天,空白组大鼠背部皮肤组织中EGFR表达水平无明显变化,F=0.667,P>0.05,差异无统计学意义;对照组、模型组、贝复新组及MEBO组大鼠创面组织中EGFR表达水平变化均较明显,F值分别为79.546、89.600、63.036、56.628,P均<0.01,差异具有统计学意义,其中对照组、贝复新组及MEBO组大鼠创面组织中EGFR表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组则呈递增趋势;局部处理后第3、7、14天,各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR表达水平组间两两对比,除贝复新组与MEBO组对比,P>0.05,差异无统计学意义外,其余各组组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;局部处理后第3、7、14天,各组大鼠皮肤或创面组织中EGFR表达水平多个样本均数对比,F值分别为57.036、134.368、92.829,P均<0.01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可通过上调大鼠慢性难愈合创面组织中EGFR的表达水平,促进慢性难愈合创面的愈合,能够为MEBT/MEBO治疗慢性难愈合...

摘要：目的:通过氧化应激有关信号通路NRF2/HO-1/NQO1轴探讨皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist Exposedburn Ointment,MEBT/MEBO)促进大鼠慢性难愈合创面的再生修复机制。方法:90只SPF级Wistar大鼠被随机分为空白组、对照组(急性皮肤缺损)、慢性难愈合创面组(模型组、MEBO组、贝复新组),共5组,18只/组,模型组、MEBO组、贝复新组同时构建慢性难愈合创面模型。(1)于造模的第3、7、14日检测各组大鼠的创面愈合率;(2)采集创面组织,并采用HE染色、Masson染色检查各创面组织的细胞、肉芽、血管及胶原纤维等形态学改变;(3)比色法测定创面组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的浓度及超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,SOD)的活力值;(4)采用免疫组化技术测定各组创面组织中的HO-1、NQO1平均光密度值;(5)采用免疫荧光法测定组织中NRF2蛋白表达量;(6)采用Western-blo法测定组织中HO-1、NQO1的蛋白表达水平;(7)采用Real-time PCR检测法测定组织中HO-1、NQO1m RNA的转录水平。结果:(1)对5组大鼠进行干预治疗第14日后,MEBO组及贝复新组的大鼠创面愈合率优于模型组(P<0.05);(2)对5组大鼠进行干预治疗第7、14日后,MEBO组及贝复新组的新生血管、胶原纤维及成纤维数量较模型组多且整齐(P<0.05);(3)对5组大鼠进行干预治疗第3、7、14日后,除第3日贝复新组外,其余四组创面组织中MDA含量均优于模型组(P<0.05);MEBO组的SOD的活性均优于模型组(P<0.05);(4)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1平均光密度值均比同期模型组高(P<0.05);(5)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的NRF2蛋白表达量均优于模型组(P<0.05);(6)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1蛋白表达水平均优于模型组(P<0.05);(7)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1m RNA转录水平均优于模型组(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO通过激...

摘要：目的:通过对细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的表达水平研究,来探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过影响CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达水平,加快治疗慢性难愈合性创面修复进程,探讨MEBT/MEBO的部分作用机制,为其临床推广应用于慢性难愈合创面的治疗提供参考数据。方法:(1)健康成年SPF级Wistar雄性大鼠60只,用随机数字表法分为:空白组(KB组)12只、急性组(JX组)12只、模型组(MX组)12只、MEBO组(MB组)12只和贝复新组(BFX组)12只。KB组只剃毛,JX组只切除皮肤,后三组建立大鼠慢性难愈合创面模型。每日换药2次。(2)分别在造模后第3、7、14天,每组处死4只大鼠后,再取标本,观察各组大鼠的创面情况,并计算其愈合率,通过HE染色及Masson染色来观察创面组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测各组CollagenⅠ和CollagenⅢ的蛋白表达变化及CollagenⅠ和CollagenⅢ的mRNA转录水平的差异。结果:(1)疗效观察:MB组和BFX组创面修复效果好,创面修复情况与JX组无显著性差异(P>0.05)。HE染色及Masson染色:与MX组相比,JX组、MB组和BFX组的毛细血管、胶原纤维、皮肤及皮肤附属器新生较快。(2)各组大鼠创面组织中Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白表达:造模后第14天,JX组的CollagenⅠ和Collagen Ⅲ蛋白表达水平与KB组无统计学差异(P>0.05),JX组接近愈合状态。造模后第3天,JX组的两种蛋白表达水平最低(P<0.05);造模后第7天,MX组、MB组和BFX组三组的Collagen Ⅰ蛋白表达水平上升,JX组表达仍最低(P<0.05);造模后第14天,JX组的Collagen Ⅰ蛋白表达水平继续保持上升,而MX组、MB组呈下降趋势(P<0.05)。造模后第14天,MX组的CollagenⅢ蛋白表达水平下降,另外三组呈现上升趋势(P<0.05)。到愈合后期,计算Collagen Ⅰ:Collagen Ⅲ的比值,MX组高于MB组...