摘要：目的 探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)是否通过调控糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞，影响α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-1)的表达水平，从而促进创面愈合。方法 90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为5组，空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组，每组18只，适应性喂养7 d后构建糖尿病模型，成模后统一制备创面。创面形成后第0天、第3天、第7天、第14天拍照记录创面愈合情况，每组随机取6只大鼠创面组织，进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化，免疫荧光观察创面组织α-SMA、COL-1的分布及表达情况，Western Blot检测创面组织α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。结果 (1)同一时间点组织学观察各组病理形态改善均优于模型组，治疗后期创面愈合率MEBO组、贝复新组优于模型组。(2)WB:与对照组比较，创面发生第3天、第7天、第14天过程中，模型组创面组织α-SMA、COL-1蛋白表达均明显下降(P<0.05);与模型组比较，创面第7天、第14天，MEBO组、贝复新组创面组织α-SMA、COL-1表达显著升高(P<0.05)。(3)免疫荧光：与对照组比较，第3天、第7天、第14天的模型组α-SMA蛋白表达均较低，其中第7天时具有显著性差异(P<0.05);模型组COL-1蛋白表达均显著偏低(P<0.05)。与模型组比较，第7天、第14天MEBO组、贝复新组α-SMA表达均较高(P<0.05),两用药组COL-1表达也较高，而贝复新组与模型组的比较差异有统计学意义(P<0.05),MEBO组COL-1表达介于模型组与对照组之间，但与模型组的比较差异不明显(P>0.05)。结论 MEBT/MEBO可能通过提高α-SMA和COL-1的蛋白表达水平，促进肌成纤维细胞转化及细胞外基质的沉积，从而加速糖尿病难愈合创面修复。

摘要：目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病难愈合创面的作用,并以α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平反映糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞转化程度,影响细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I,COL-1)的生成为切入点,通过动物及细胞实验探讨MEBT/MEBO促进糖尿病难愈合创面的具体机制,为MEBT/MEBO的临床应用及推广提供理论依据。方法:(1)90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为五组,空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组,每组18只,适应性喂养7天后应用STZ腹腔注射法诱导糖尿病大鼠模型,成模后再以全层皮肤缺损法统一制备创面。观察创面愈合情况,拍照记录创面形成后第0、3、7、14天的大鼠创面,并随机切取每组6只大鼠创面肉芽组织,进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化,免疫荧光观察α-SMA、COL-1的分布及表达情况,Western blot检测α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。(2)探讨MEBT/MEBO对大鼠真皮成纤维细胞(rat dermal fibroblasts,RDFs)的作用。首先用双酶法(中性蛋白酶+胰酶)分离提取Wistar大鼠幼崽皮肤真皮成纤维细胞,以HE染色观察细胞形态,免疫荧光法鉴定其波形蛋白(Vimentin)表达情况。以CCK8法摸索MEBO对RDFs的合适剂量,细胞实验分为低糖组、高糖组、溶剂组、低剂量MEBO组、高剂量MEBO组,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,实时定量PCR法检测α-SMA、COL-1的基因转录水平,Western blot法检测RDFs的α-SMA、COL-1蛋白表达水平。结果:(1)大鼠经STZ法诱导糖尿病模型后,出现典型“三多一少”症状,血糖明显升高达到糖尿病标准。与其他组相比,模型组大鼠出现创面愈合延迟(P<0.05),创面肉芽组织持续炎症浸润、血管新生不足、成纤维细胞数量低下及细胞外基质沉积减少等特征;治疗中后期创面愈合率:对照组(29)MEBO组=贝复新组(29)模型组。(2)WB:与对照组比较,创面发生第7、14天过程中,模型组创面组织α-...

摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)结合中医辨证治疗糖尿病足溃疡的临床效果。方法:将确诊为糖尿病足溃疡的患者,按随机数字表法分为观察组和对照组,在基础治疗的基础上,观察组予MEBT/MEBO结合中医辨证治疗,对照单纯组予外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)治疗,治疗2个疗程后,比较两组患者治疗前后临床症状评分与临床疗效。结果:治疗后,观察组的临床症候积分(15.13±2.47)分,高于对照组的(13.87±2.29)分,差异有统计学意义(t=24.892 8,P<0.05)。治疗后,观察组总有效率90%,高于对照组的70%,差异有统计学意义(字2=5.00,P<0.05)。结论:MEBT/MEBO联合中医辨证治疗糖尿病足溃疡的效果确切,优于单纯使用外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗。

摘要：目的观察MEBT/MEBO病证结合治疗糖尿病足溃疡患者的临床疗效,以探讨MEBT/MEBO的治疗优势。方法选择WagnerⅡⅢ级糖尿病足溃疡并具有中医湿热毒蕴、筋腐肉烂证的患者共48例,随机分为观察组（n=25）和对照组（n=23）,对比两组患者的临床疗效,并选取典型案例进行分析。结果观察组患者疗效优于对照组,差异具有统计学意义（P<0.01）。经过8周治疗后,典型案例中的患者症状明显缓解,溃疡部位达到临床愈合标准。该患者湿热毒蕴、筋腐肉烂证的6项主症完全消失,5项次症除了形体消瘦短时间内无法改变,其余4项均有不同程度缓解,舌质由红绛转为舌淡红,苔黄腻转为苔白,寸口数脉消失,滑脉仍存在,趺阳脉较入院前搏动增强。结论 MEBT/MEBO能够有效地促进溃疡创面（病）愈合,同时也能改善糖尿病足湿热毒蕴、筋腐肉烂证,对病证结合治疗糖尿病足溃疡具有极大的临床意义。