摘要：目的:本研究以糖尿病大鼠创面模型、临床糖尿病足创面为研究对象,观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病创面愈合情况的影响,并通过创面组织中BMP-2、BMP-7、BMPR-IA的检测,探讨其对糖尿病创面愈合作用的机理,为临床推广应用MEBO治疗糖尿病创面提供可靠的理论依据。方法:(1)糖尿病大鼠创面模型:按照随机数表法将125只Wistar雄性大鼠分为空白组(n=25)、对照组(n=25)、模型组(n=25)重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济)组(n=25)以及湿润烧伤膏(MEBO)组(n=25)。空白组大鼠备皮,不建立创面模型;对照组大鼠构建常规创面模型;模型组、贝复济组及MEBO组构建糖尿病模型。生理盐水外敷对照组及模型组创面,MEBO组和贝复济组创面分别予MEBO、贝复济外敷。各组于治疗后的第1、5、11、18、25天观察:(1)观察不同时点大鼠溃疡创面愈合情况,比较愈合率;(2)创面组织病理HE染色观察各组纤维细胞、创面组织炎症、肉芽生长、上皮化等情况。(3)免疫组化法观察溃疡创面BMP-2、BMP-7动态变化的影响。(4)Western Blot法测定BMP-2、BMP-7、BMPR-IA及BMPR-IA磷酸化蛋白表达。(5)q RT-PCR法测定BMP-2、BMP-7、BMPR-IA的表达。(2)临床糖尿病足创面:收集30例2型糖尿病足(T2DMF)患者治疗前和MEBO治疗两周的创面组织。资料收集主要包括以下两个部分:(1)跟踪测量、拍照记录每位患者创面愈合情况;(2)提取创面组织用福尔马林固定液收集并制成蜡块。蜡块切片行HE染色观察病理形态;免疫组化观察BMP-2、BMP-7的表达;免疫荧光定量测量治疗前后BMP-2、BMP-7的OD值。结果:(1)糖尿病大鼠创面模型:(1)创面愈合情况及愈合率:第5天四组的创面愈合率无明显差别。第11天模型组创面平均愈合率低于对照组、贝复济组、MEBO组;MEBO组与贝复济组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。第18天模型组创面平均愈合率仍低于对照组、贝复济组、MEBO组。第25天模型组尚可看到个别大鼠创面未完全愈合,模型组创面平均愈合率低于对照组、贝复济组、MEBO组(P<0.05)。(2)治疗第5天,与对照组比较,模型组可见大量炎症细胞...

摘要：目的:探讨皮肤医疗再生技术对慢性难愈合创面组织中核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响,来探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏影响慢性难愈合创面进程中是否涉及到NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα表达的相互作用,探讨MEBT/MEBO的部分作用机制,为临床应用MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面提供理论依据与技术壁垒。方法:(1)方法:选取SPF级别健康2月龄Wistar雄性大鼠,90只,体重范围235±15g,适应性喂养一周。用随机数法将90只大鼠分为5组,每组18只,分别是:空白组、对照组(急性全层皮肤缺损组)、模型组、MEBO组、贝复新组。慢性难愈合创面组包括模型组、MEBO组和贝复新组。空白组大鼠不作任何有损伤性处理;对照组大鼠行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;慢性难愈合创面组大鼠根据付小兵教授制备全层皮肤缺损模型结合沈氏改良塑料环肉芽肿定量法,经改进,建立大鼠慢性难愈合创面模型。所有组别除空白组外在造模后立刻用药处理。换药前,每组每天用1/5000呋西林溶液清洗两次。(2)在建立模型后的第3天、第7天、第14天分别每组麻醉6只大鼠取单侧标本,继续观察大鼠创面达到完全愈合时间,观察各组大鼠的创面情况、愈合时间及愈合率,通过HE染色观察大鼠模型创面内的炎症细胞变化及数量和Masson染色观察大鼠模型创面肉芽组织病理形态学变化、胶原蛋白的生成、组织中纤维以及炎性因子。(3)采用Western Blot检测细胞外基质成分中的NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα蛋白表达变化差异,观察各组受干预后对创面中NF-κB p65、IKK、IκBα蛋白以及磷酸化蛋白p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα的表达的影响。(4)采用免疫荧光测定NF-κB p65入核荧光强度,间接性半定量观察炎症因子的表达趋势。结果:(1)干预第3、7天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P>0.05);干预第14天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P<0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异(P>0.05)。MEBO与对照组和贝复新组对比,创面愈合时间无明显差别(P>0.05),与模型组相比,MEBO组愈合时间明显短于模型组(P...

摘要：目的 探讨创疡再生医疗技术（MEBT/MEBO）对慢性难愈合创面组织中核因子κB (NF-κB) p65、NF-κB抑制蛋白（IκB）、 IκB激酶（IKK）及其磷酸化蛋白表达水平的影响。方法 选取SPF级雄性Wistar大鼠90只适应性饲养1周后，按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、 MEBO组和贝复新组，每组18只。空白组大鼠仅做备皮处理，对照组大鼠建立急性创面模型，模型组、 MEBO组、贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面采用生理盐水纱布换药处理，MEBO组大鼠创面采用湿润烧伤膏（MEBO）药纱换药处理，贝复新组大鼠创面采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子换药处理，对比各组大鼠干预第3、 7、 14天创面愈合率、组织病理学变化，以及皮肤/创面组织中NF-κB p65、 IκBα、 IKK及p-NF-κB p65、 p-IκBα、 p-IKK蛋白表达水平。结果 （1）干预第3、 7天，各组大鼠创面愈合率均无明显差异（P均> 0.05）；干预第14天，模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、 MEBO组（P均<0.05），其余各组间创面愈合率均无明显差异（P均> 0.05）。（2）干预第7天，MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量均明显增加，可见大量成纤维细胞和新生毛细血管及少量毛囊结构生成；干预第14天，MEBO组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量明显多于模型组，可见整齐排列的毛细血管及成熟的毛囊、皮脂腺等组织，而模型组大鼠创面组织中仍可见少量炎症细胞浸润，但已有大量成纤维细胞生成。（3）干预第7、 14天，空白组、对照组、 MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、 IKK、 p-NF-κB p65、 p-IKK、 p-IκBα蛋白表达水平均明显低于模型组（P均<0.05）；干预第7天，MEBO组大鼠创面组织中NF-κB p65、 IκBα蛋白表达水平均明显高于贝复新组（P均<0.05）, IKK、 p-NF-κB p65、 p-IKK、 p-IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组（P均<0.05）；干预第14天，MEBO组大鼠创面组织中IKK、 IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组（P均<0.05）。结论 MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面愈合的机制可能与创面组织中NF-κB p65、 IκBα、 IKK及其磷酸化蛋白的表达水平有关。

摘要：目的观察原位再生医疗技术(Moist Exposed Bum Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面磷酸化ERK1及c-mye蛋白表达的影响。方法将80只SD大鼠随机分为空白对照组(20只)、MEBO组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只),其中空白对照组大鼠仅作皮肤全层切除,不予药物干预;MEBO组、贝复济组及模型组在皮肤全层切除后,建立慢性难愈合创面模型,其中模型组建模后不予药物治疗,MEBO组及贝复济组建模后分别采用MEBO及贝复济换药治疗,并于治疗第3、7、14天,通过Western Blotting技术检测4组大鼠相同部位创面肉芽组织中磷酸化ERK1及c-myc蛋白的表达水平。结果创面愈合过程中,4组大鼠创面肉芽组织中磷酸化ERK1及c-myc蛋白表达水平均呈先上升后下降的趋势。其中,治疗第3、7、14天,空白对照组创面肉芽组织中p-ERK1及p-c-mye的表达水平均明显高于其他3组,P均<0.001,差异具有统计学意义;治疗第7、14天,MEBO组与贝复济组创面肉芽组织中p-ERK1及p-c-myc的表达水平均高于模型组,P均<0.05,差异具有统计学意义,但MEBO组和贝复济组组间对比,P>0.05,差异无统计学意义。结论 MEBT/MEBO可能是通过提高磷酸化ERK1及c-myc蛋白的表达水平,促进慢性难愈合创面的修复。