摘要：目的探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)干预磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B (Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路促进体表慢性难愈合创面的修复机制。方法将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组34只和MEBT/MEBO组34只。各组分别干预治疗后观察:(1)创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于第3、7、14天固定焦距拍照创面计算愈合率;(2)并同时于第3、7、14天取创面组织,石蜡切片HE常规染色观察第3、14天病理改变;(3)提取第3、7、14天创面组织蛋白,Western Blot法检测PI3K、p-Akt (S473)、p-mTOR (Ser2448)、p-p70 S6K (Thr389)、p-4E BP1 (Thr37/46)蛋白表达水平。结果 (1)与模型组比较,贝复新组及MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.05)。(2)造模及干预治疗14天后,贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织病理学形态学改善明显优于模型组。(3)与模型组比较,造模及干预治疗7天后贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织PI3K和磷酸化Akt蛋白高表达(P<0.05),MEBT/MEBO组mTOR及其下游效应分子p70 S6K和4E BP1磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可促进体表慢性难愈合性创面的愈合,较好改善其组织病理形态学改变,其作用机制可能与激活PI3K-Akt-mTOR信号通路,促进大量与愈合相关的蛋白质合成有关。

摘要：目的:探究湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposure therapy/Moist burn ointment,MEBT/MEBO)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mammalian target of rapamycincomplex,m TORC)信号通路基质金属蛋白酶(MMP3、MMP8)促进体表慢性难愈合创面的修复机制。方法:(1)取60只SPF级Wistar大鼠作为实验对象,将这些大鼠分为五组,即空白组、对照组、模型组、贝复新组以及MEBO组,每组12只。模型组、贝复新组、MEBO组、对照组于背部做一圆形创面,然后模型组、贝复新组、MEBO组立即肌肉注射醋酸氢化可的松注射液,使其形成慢性难愈合创面,而对照组不注射醋酸氢化可的松注射液使其形成急性创面。模型组不涂抹任何药物,贝复新组涂抹贝复新凝胶,MEBO组涂抹湿润烧伤膏,对照组氯化钠溶液纱条覆盖,空白组只备皮不做创伤性处理。(2)分别在造模后的第3、7、14天记录各组大鼠创面愈合率,并进行HE及Masson染色观察创面组织愈合的病理情况。(3)采用Western Blot法分别对MMP3、MMP8、磷酸化m TORC(p-m TORC)进行检测,分析在各组大鼠创面组织中MMPs以及p-m TORC蛋白表达水平。(4)使用实时PCR法检测各组大鼠创面组织中MMP3、MMP8、m TORC m RNA基因转录情况。结果:(1)创面愈合率:四组大鼠造模后第7、14天的创面愈合率显著高于第3天,差异均有统计学意义(均P<0.05)。造模后第3天,对照组、模型组、贝复新组、MEBO组创面愈合率比较,差异无统计学意义(F=2.474,P=0.074);造模后第7、14天,对照组、贝复新组、MEBO组的创面愈合率均优于模型组,差异均存在统计学意义(均P<0.05)。(2)创面组织病理学:HE及Masson染色结果发现,在造模后的第3天,除空白组外,四组的炎症细胞大量生成,新生毛细血管生成较少,成纤维细胞排列紊乱,未生成皮肤附属器。造模后的第7天,对照组、MEBO组及贝复新组中的炎症细胞较之前显著降低,毛细血管生成明显,成纤维细胞排列规则;模型组中可观察到少数新生毛细血管及排列不规则的成纤维细胞,仍有炎症细胞浸润,未生成皮肤附属器。造模后的第14天,对照组、MEBO组与贝复新组新生毛细血管排列有序,未见浸润的炎症细胞,有皮肤附属器生成,胶原纤维明显增加且排列...

摘要：目的 探究皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mTORC)信号通路对慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、基质金属蛋白酶-8 (MMP-8)表达水平的影响:方法 选取SPF级雄性Wistar大鼠60只适应性饲养7 d后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、rb-bFGF组、MEBO组,每组12只,其中空白组大鼠只做备皮处理,对照组大鼠于脊柱两侧建立急性创面模型,模型组、rb-bF-GF组、MEBO组大鼠于脊柱两侧建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)换药处理,对比观察各组大鼠干预第3、7、14天时创面愈合率以及皮肤/创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及相应mRNA的表达水平。结果 干预第7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面愈合率均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组呈持续升高的趋势;干预第3、7天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MM P-8 mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),而干预第14天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8mRNA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),且干预第3、7天rb-bFGF组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8蛋白表达水平均明显低于MEBO组(P均<0.05),而干预第3、7、14天两组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均无明显差异(P均>0.05);干预第3、7、14天,各组大鼠创面组织中mTORC mRNA表达水平均无明显变化(P均>0.05)。结论 MEBT/MEBO可通过调控mTORC信号通路中MMP-3和MMP-8的表达水平促进慢性难愈合创面愈合。