摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠溃疡创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1表达的影响,探讨其作用机制,为推广临床应用提供理论依据。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组,每组50只。其中空白组大鼠仅予备皮处理,对照组大鼠建立常规创面模型,模型组、康复新组、MEBO组大鼠建立糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,对照组、模型组大鼠创面予生理盐水外敷治疗,康复新组、MEBO组分别予康复新、湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)外敷治疗。各组分别于治疗第1天、第5天、第11天、第18天、第25天观察:(1)创面愈合情况、记录创面面积并计算创面愈合率;(2)创面组织HE染色观察病理改变;(3)免疫荧光法检测创面组织ULK1、p70S6K、4EBP1的表达;(4)电镜观察创面组织细胞自噬体数量、形态、结构的变化;(5)Western blotting法检测ULK1、p70S6K、4EBP1及其磷酸化水平;(6)q RT-PCR分析ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA的表达。结果:(1)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面愈合情况及创面愈合率均优于模型组。(2)治疗过程中,对照组、康复新组、MEBO组创面组织病理形态改善较模型组明显。(3)治疗过程中,各组创面组织中ULK1、p70S6K、4EBP1荧光染色阳性细胞数量及其平均光密度(OD)值均呈上升后下降的趋势,治疗早期MEBO组的阳性细胞数最多、OD值最高,模型组阳性细胞数最少、OD值最低。(4)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组细胞内自噬体数量升高后降低,治疗早期MEBO组胞内自噬体最多。(5)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组创面组织ULK1、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表达均上升后下降,治疗早期,模型组的表达量最低,p-ULK1表达呈下降后上升的趋势,治疗早期模型组的表达量最高。(6)治疗过程中,对照组、模型组、康复新组、MEBO组ULK1、p70S6K、4EBP1m RNA表达均上升后下降,治疗早期模型组的表达量最低。结论:MEBT/MEBO可促进糖尿病溃...