摘要：目的:1.系统地探讨湿润烧伤膏(Moist Exppsed Burn Ointment,MEBO)治疗糖尿病足溃疡(Diabetic Foot Ulcer,DFU)潜在的分子作用机制。2.对分期分级规范化使用皮肤再生医疗技术(Skin regenerative medical technology,MEBT/MEBO)治疗DFU进行临床经验总结。方法:1.网络药理学研究及分子对接验证:从TCMSP数据库中筛选出MEBO中的黄连、黄柏、黄芩、罂粟壳四味中药的主要药物活性成分(MW<500U和DL≥0.18)及其对应靶点。通过Gene Cards、Pharm Gkb、TTD等数据库,筛选出DFU的相关疾病靶点,通过靶点映射获得MEBO治疗DFU的靶点,通过Degree值筛选出MEBO发挥治疗作用的核心靶点,将核心靶点导入STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络。使用Metascape数据库对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,预测MEBO治疗DFU的作用机制。将药物核心有效成分与核心靶点进行分子对接以验证预测结果。2.对2021年9月至2022年12月广西中医药大学第一附属医院创面修复周围血管科的DFU住院患者进行回顾性分析,探讨分级分期使用规范使用MEBT/MEBO治疗DFU的效果并进行经验总结。结果:1.共筛选出MEBO有效成分131个,相关作用靶点261个,共收集DFU相关靶点蛋白2844个。MEBO与DFU的共同靶点蛋白165个,其中预测的核心靶点为HSP90AA1(热休克蛋白90α家族A类成员1)、TP53(细胞肿瘤抗原53)、AKT1(α-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶)、TNF(肿瘤坏死因子)、IL-6(白介素-6)等,GO富集共分析出5274条生物过程,468条细胞组分,846条分子功能,KEGG通路富集得到261条通路的结果。分子对接结果显示Apigenin(芹菜素)和wogonin(汉黄芩素)与HSP90AA1、quercetin(槲皮素)与ESR1均能稳定对接。2.40例纳入研究的病例中Wagner II级黑期者1例,Wagner II级黄期者8例,Wagner II级黑期和黄期者1例,Wagner III级黑期5例,Wagner III级黄期者13例,Wagner III级黑期和黄期者1例,Wagner IV级黑期者7例,Wagner IV级黄期者4例。创面数量和部位统计中,40例患者...

摘要：目的:1.通过网络药理学分析对湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)治疗压疮进行机制研究,探讨MEBO治疗压疮潜在的分子靶点和信号通路,同时利用分子对接技术明确关键分子靶点与有效活性成分的结合稳定性。2.通过病例回顾性研究,总结MEBO在治疗压疮过程中所起的作用。方法:1.通过TCMSP数据库获取MEBO组成中药的有效化学成分及其对应靶点,再利用Uni Prot数据库将其转化为相对应的基因靶点名称(gene symbol)。通过Gene Cards、OMIM、Pharmgkb数据库,检索获取压疮相关基因并取交集。将MEBO对应靶点与Gene Cards、OMIM、Pharmgkb获得的压疮相关基因取交集,得到MEBO治疗压疮的靶点。将MEBO与压疮交集靶点导入至String数据库构建PPI网络,再利用Cytoscape 3.9.1软件中的Cyto NCA插件进行网络拓扑学分析,并基于R软件计算PPI网络中的DC、BC、CC、EC、LAC和NC平均值,基于这些平均值,筛选PPI网络中的核心靶点。运用Metascape数据库对MEBO与压疮交集靶点进行KEGG及GO富集分析,将得到的部分富集结果以气泡图形式可视化。利用Cytoscape 3.9.1软件构建“药物活性成分-作用靶点”网络图,通过计算网络中各成分的Degree值,分析MEBO治疗压疮的核心成分。然后利用CB-Dock平台对接核心成分与核心靶蛋白,预测关键活性成分与核心靶蛋白的结合活性,并对结果进行可视化。2.通过使用广西中医药大学第一附属医院的电子病历系统及临床一体化平台,收集和随访2019年12月至2021年12月入住创面修复科符合压疮诊断的患者的电子病历数据,探讨并总结该院使用MEBO治疗压疮的特点及效果。结果:1.基于TCMSP平台获取MEBO有效化学成分156个及其对应靶标基因282个,共得到1905个与压疮有关的疾病靶点。MEBO与压疮的共同靶点蛋白有182个,其中,预测MEBO治疗压疮的药物活性成分主要包括quercetin(槲皮素)、apigenin(芹菜素)、morphine(吗啡)、wogonin(汉黄芩素)、salutaridine(多花罂栗碱)、baicalein(黄芩苷)等,预测的核心靶点为TP53(细胞肿瘤抗原53)、ESR1(雌激素受体1)、MAPK3(丝裂原活化蛋白激酶3)、IL-6(...

摘要：目的通过湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)对骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic proteins 7,BMP-7)的调控来探讨其对糖尿病创面愈合的影响。方法按照随机数表将75只Wistar雄性大鼠分为空白组(n=15)、对照组(n=15)、模型组(n=15)、重组牛碱性成纤维细胞生长因子(贝复济)组(n=15)以及MEBO组(n=15),对模型组、贝复济组及MEBO组构建糖尿病模型。生理盐水外敷对照组及模型组创面,MEBO组和贝复济组创面分别给予MEBO、贝复济外敷。各组于治疗后的第1、5、11、18、25天观察创面大小变化及愈合情况,并于上述各个时间点各组随机取3只大鼠在麻醉后快速取创面组织并处死大鼠,标本行HE染色观察创面病理变化及免疫荧光法检测BMP-7的表达。结果 (1)在治疗过程中,对照组、贝复济组、MEBO组的病理形态明显改善。(2)BMP-7免疫荧光的变化:除了空白组,其他四组的阳染细胞均升高后降低,具体为第5天出现阳染细胞数的高峰是对照组、贝复济组和MEBO组,而第18天达到峰值的是模型组。(3)在模型组、对照组及MEBO组中,BMP-7表达有差异(P<0.05);而在贝复济组与MEBO组中无差异表达(P>0.05)。结论在糖尿病创面组织中,MEBO可能通过调控BMP-7的表达从而促进溃疡创面的愈合。

摘要：目的:本研究将从环鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(Cyclic guanine nucleotide adenine nucleotide synthetase-Stimulator of interferon genes,cGAS-STING)通路入手,明确湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)能否通过调控cGAS-STING信号通路减轻创面组织炎症反应状态,从而加快糖尿病创面修复的进程,为之后的临床治疗和科学研究提供可靠的参考数据。方法:1.通过网络药理学数据库筛选出MEBT/MEBO治疗糖尿病创面的活性成分和关键靶点,并对其进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析和蛋白质相互作用网络(Protein-protein interaction,PPI)分析,对活性成分和关键靶点进行分子对接验证其结合能力。2.动物实验验证:(1)选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组:空白组、MEBO组、贝复新组、对照组,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。(2)通过HE染色观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化。(3)采用Western Blot、Real-time qPCR检测cGAS-STING通路相关蛋白表达变化差异及mRNA转录水平差异。结果:(1)通过网络药理学方法筛选出77个湿润烧伤膏和糖尿病创面的交集靶点,显示刺槐素、汉黄芩素、槲皮素、吴茱萸次碱等为湿润烧伤膏核心活性成分,对交集靶点进行PPI网络分析筛选出TP53、TNF、HSP90AA1等关键靶点,KEGG富集分析结果显示TNF、PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路在湿润烧伤膏对糖尿病创面的治疗中起到重要作用,GO富集分析结果显示这些交集靶点的生物过程主要涉及炎症反应调节和血管新生过程。我们进一步对核心活性成分和关键靶点进行分子对接,结果显示均具有较强结合活性。(2)创面愈合情况:造模后第3天,各组之间的创面愈合率无明显差异(P>0.05);造模后第7、14天,与对照组相比,空白组、MEBO组和贝复新组的创面愈合...