摘要：目的 分析创疡再生医疗技术（MEBT/MEBO）联合八珍汤加减对Ⅲ～Ⅳ期压疮创面组织中细胞角蛋白19 (CK19)表达水平的影响。方法 选取2021年3月至2022年1月湖南中医药大学第二附属医院收治的45例Ⅲ～Ⅳ期压疮患者作为研究对象，采用随机数表法将其随机分为治疗组23例和对照组22例。治疗组患者采用MEBT/MEBO联合八珍汤加减治疗，对照组患者单纯采用MEBT/MEBO治疗，Western blotting法检测创面组织中CK19的表达水平，并对比两组患者创面压疮愈合计分量表（PUSH）评分及临床疗效。结果 治疗2、 3、4周时，治疗组患者创面组织中CK19表达水平均明显高于对照组（Z=-2.407、-2.191、-2.566,P=0.016、0.028、 0.010）。治疗4周后，治疗组患者创面PUSH评分为（9.21±2.15）分，明显低于对照组患者的创面PUSH评分（11.77±1.85）分（t=-4.262,P<0.001）；治疗组患者中有效22例、无效1例，总有效率为95.65%，明显优于对照组患者的有效12例、无效10例，总有效率54.55%(Z=-3.172,P=0.002)。结论MEBT/MEBO联合八珍汤加减可促进Ⅲ～Ⅳ期压疮创面愈合，其机制可能与两者联合应用促进表皮干细胞分化及CK19表达的作用更强有关。

摘要：目的探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中CK14及CK19表达水平的影响。方法按照随机数表法将90只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组,每组18只,空白组大鼠仅做背部备皮处理,急创组大鼠建立急性创面模型,慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠建立慢性创面模型;造模成功后,空白组大鼠备皮处皮肤以及急创组与慢创组大鼠创面予以生理盐水纱布湿敷,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rb-bFGF)凝胶治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)治疗。分别于局部处理第3、7、14天取各组大鼠皮肤或创面组织行Masson染色,观察组织形态学差异,并进行Western blotting及RT-PCR检测,对比CK14、CK19蛋白表达及其mRNA转录水平。结果 (1) Masson染色结果显示,急创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织形态学差异不明显,均可见炎性细胞逐渐减少,新生血管及皮肤附属器逐渐形成,创面组织形态逐渐接近正常,而慢创组大鼠创面组织中炎性细胞消散及新生血管生长较慢,逐渐形成瘢痕组织形态。(2)局部处理第3、7、14天,急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织中CK14蛋白表达及其mRNA转录水平均呈逐渐升高的趋势(P均<0.05),至局部处理第14天,急创组、rb-bFGF组及MEBO组均升高至空白组水平(P均>0.05),而慢创组仍低于其它各组(P均<0.05)。(3)局部处理第3、7、14天,急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织中CK19蛋白表达及其mRNA转录水平均呈先升高后降低的趋势(P均<0.05),至局部处理第14天,急创组、rb-bFGF组及MEBO组均降低至空白组水平(P均>0.05),而慢创组仍高于其它各组(P均<0.05)。结论MEBT/MEBO能够促进慢性难愈合创面愈合,调控创面组织中CK14及CK19的表达水平可能是其部分作用机制。

摘要：目的:通过检测不同干预方案下大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白15(cytokeratin-15 CK15)与细胞角蛋白19(cytokeratin-19 CK19)的动态表达,探讨完善皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进创面愈合的部分分子学机制,从而为其在临床治疗上推广应用提供理论支持。方法:将90只健康成年Wistar雄性大鼠(SPF级)随机分为空白组(18只)、急创对照组(18只)、慢创模型组(18只)、MEBO组(18只)和Rb-b FGF(18只)。其中空白组不做损伤处理,急创对照组做急性全层皮肤缺损创面模型,慢创模型组、MEBO组和Rb-b FGF组在急创对照组基础上注射氢化可的松,制备慢性难愈合创面模型。模型建立后给予创面换药,每日两次。急创对照组与慢创模型组创面给予碘伏消毒,MEBO组碘伏消毒后涂抹MEBO治疗,Rb-b FGF组碘伏消毒后涂抹重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor gel Rb-b FGF)治疗。最后分别于治疗后第3,7,14天在各组中分别随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后,完整切取创面肉芽组织。一部分组织给予甲醛固定,之后进行HE染色。其余组织投入-80℃冰箱。所有时相点组织收集完毕后,应用Western Blotting技术以及Real Time PCR技术统一检测、对比各组大鼠创面组织中CK15、CK19蛋白表达量及CK15、CK19m RNA的转录水平。结果:(1)HE染色,各组样本HE染色后显微镜下观察,空白组未见变化,均为正常皮肤组织学形态。在造模后的第3天,急创对照组组织水肿,同时可见大量中性粒细胞浸润。慢创模型组,MEBO组,Rb-b FGF组组织间水肿,少量淋巴细胞浸润。在造模后的第7天,急创对照组镜下见中性粒细胞减少,组织间水肿减轻,少量毛细血管再生。MEBO组,Rb-b FGF组淋巴浸润情况亦有所减少,组织间水肿有所改善,除血管新生外,还可见少量毛囊。而慢创模型组淋巴细胞浸润程度未见减轻,组织水肿仍明显,缺乏新生毛细血管。在造模后的第14天,急创对照组,MEBO组,Rb-b FGF组组织无炎性细胞浸润,水肿不明显,可见新生的分层表皮结构,同时可见毛囊、皮脂腺...

摘要：目的:本研究通过对比单纯使用皮肤再生医疗技术(MEBO/MEBT),观察“补托法”结合MEBO/MEBT处理压疮的疗效、安全性及基础机制。方法:选取符合标准的压疮患者60例,将其均随机分为治疗组和对照组,每组各30例。两组均予以常规治疗,对照组创面规范按照MEBO/MEBT处理,每日2次,并根据情况适当清创。治疗组在对照组基础上服用八珍汤加减,总疗程4周。于治疗前后治疗记录创面面积、渗液量及创面组织类型后进行PUSH评分,评价愈合情况,记录创面新生新生上皮出现时间,记录不良反应,评价其安全性;于第7、14、21、28日取创缘组织,一部分HE染色后观察组织病理形态变化,一部分用western blot法检测压疮组织中CK19的表达水平;对临床观察结果及CK19检测结果进行统计学分析。结果:本次研究脱失或剔除治疗组7个、对照组8个,最终治疗组23人、对照组22人,共45人纳入试验结果。(1)临床观察结果治疗前后两组内压疮PUSH评分进行比较,有统计学差异(两组P均<0.05),两组患者压疮PUSH评分在治疗前后均有变化,即两组压疮较治疗前好转;治疗后两组间PUSH评分比较,有统计学差异(P<0.05),治疗组低于对照组,即治疗组压疮愈合情况优于对照组。(2)基于PUSH评分评价“补托法”结合MEBO/MEBT治疗III、IV期(气血亏虚证)压疮的效果,治疗组有效22例、无效1例,总有效率95.65%,对照组有效12例、无效10例,总有效率54.55%,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组间治疗后新生表皮出现时间差异有统计学意义(P<0.05),新生表皮出现时间:治疗组早于对照组。安全性比较,治疗组及对照组分别出现2例、1例轻度不良反应,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)实验观察结果观察压疮创面组织HE染色后组织病理形态学变化:治疗前两组压疮组织病理情况基本相同,均可见组织疏松水肿,部分区域变性坏死,纤维模糊断裂,部分血管坏死,真皮内出血,巨噬细胞、嗜中性粒细胞及大量淋巴细胞等炎性细胞浸润。研究过程中治疗组新生血管及纤维量生长更快,并在14d时即出现新生上皮,21d时出现毛囊、腺体结构,对照组相同结构新生时间晚于治疗组1周。对压疮组织中CK19表达量进行组间比较:在0d、7d时治疗组及对照组创面中CK19表达量的差异无统计学意义(P>0.05),14d、21d、28d时组间差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组高于对照组。两组创面在不同时间点CK19的表达总体上有差异(P<0.05),两组创面CK19表达量7d与14d、0d与14d之间,治疗组7d与28d之间,对照组0d与21d之间,无明显差异(P>0.05),其余任意同组内两时间点存在统计学差异(P<0.05),并且两组创面中CK19表达量呈现随时间先降低后升高最后再降低的趋势(28d<7d<0d、28d<14d<21d)。结论:(1)MEBO/MEBT联合“补托法”可促进III、IV期(气血亏虚证)压疮患者创面的愈合,且比较安全,其机制可能与促进表皮干细胞的分化及其标志物CK19表达相关。(2)MEBO/MEBT联合“补托法”可促进III、IV期(气血亏虚证)压疮患者创面中表皮组织、肉芽组织及附属器生成。(3)MEBO/MEBT治疗III期、IV期(气血亏虚证)压疮患者过程中,创面中CK19表达量呈先降低后升高再降低的趋势,加用“补托法”不改变其基本趋势,但可在使用2周后促进创面组织中表皮干细胞标志物CK19的表达。