摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(Moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病难愈合创面的作用,并以α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平反映糖尿病难愈合创面肌成纤维细胞转化程度,影响细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I,COL-1)的生成为切入点,通过动物及细胞实验探讨MEBT/MEBO促进糖尿病难愈合创面的具体机制,为MEBT/MEBO的临床应用及推广提供理论依据。方法:(1)90只SPF级成年雄性Wistar大鼠以随机数表法分为五组,空白组、对照组、模型组、MEBO组、贝复新组,每组18只,适应性喂养7天后应用STZ腹腔注射法诱导糖尿病大鼠模型,成模后再以全层皮肤缺损法统一制备创面。观察创面愈合情况,拍照记录创面形成后第0、3、7、14天的大鼠创面,并随机切取每组6只大鼠创面肉芽组织,进行HE、Masson染色以观察各组创面组织病理形态变化,免疫荧光观察α-SMA、COL-1的分布及表达情况,Western blot检测α-SMA、COL-1的蛋白表达水平。(2)探讨MEBT/MEBO对大鼠真皮成纤维细胞(rat dermal fibroblasts,RDFs)的作用。首先用双酶法(中性蛋白酶+胰酶)分离提取Wistar大鼠幼崽皮肤真皮成纤维细胞,以HE染色观察细胞形态,免疫荧光法鉴定其波形蛋白(Vimentin)表达情况。以CCK8法摸索MEBO对RDFs的合适剂量,细胞实验分为低糖组、高糖组、溶剂组、低剂量MEBO组、高剂量MEBO组,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,实时定量PCR法检测α-SMA、COL-1的基因转录水平,Western blot法检测RDFs的α-SMA、COL-1蛋白表达水平。结果:(1)大鼠经STZ法诱导糖尿病模型后,出现典型“三多一少”症状,血糖明显升高达到糖尿病标准。与其他组相比,模型组大鼠出现创面愈合延迟(P<0.05),创面肉芽组织持续炎症浸润、血管新生不足、成纤维细胞数量低下及细胞外基质沉积减少等特征;治疗中后期创面愈合率:对照组(29)MEBO组=贝复新组(29)模型组。(2)WB:与对照组比较,创面发生第7、14天过程中,模型组创面组织α-...
摘要:目的:1.基于Meta分析探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)在慢性难愈合创面中的临床实践疗效,为其临床推广使用提供循证依据。2.通过运用MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面的临床观察,探讨其在创面修复中的临床疗效以及对患者生活质量的影响。方法:1.在中国知网(CNKI)、维普(VIP)、万方(Wanfang)、中国生物医学文献服务系统(NCBI)、Pub Med、Cochrane Library数据库查找以MEBT/MEBO疗法作为干预措施、以慢性难愈合创面为诊断、随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)为研究方法的文献,时间从2012年1月起至2022年1月。主要结局指标包含完全治愈人数、治疗前后溃疡面积、创面完全愈合时间,次要观察指标各研究组给药频率、治疗周期、患者平均年龄。RCT质量评估分别由一名接受科研培训的专业人员与一名非专业人员在互不干扰情况下独立完成文献的研究方案及数据评分,若对筛选评估过程有争议,则由第三人员进行再次评估,最终得到初始数据。对符合纳入标准要求的文献按照观察结局指标提取数据后通过Review Manager 5.3和Stata17软件对最终纳入文献进行Meta分析。2.将60例患者按入组先后顺序进行编号,按随机数字表法将其分成治疗组(MEBO组)和对照组(贝复新组)各30例。观察两组治疗前、治疗28天后的日常生活活动能力、生活质量、情绪方面的得分,进而评价两种药物的疗效差异。结果:1.Meta分析结果:Meta分析最终纳入23篇文献,合并效应量后结果如下:(1)治疗组(湿润烧伤膏组)治疗慢性难愈合创面在总有效率、创面愈合时间、创面肉芽组织出现时间、创面愈合面积、创面愈合率、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)含量及表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)含量、视觉模拟量表(Visual Analog Scale,VAS)评分等方面均优于对照组,疗效有统计学差异(P<0.01);(2)对照组在复发率方面较治疗组高(OR=0.36,95%CI为[0.16,0.82],Z=2.43,P=0.02);(3)治疗组在创面感染率低于对照组(OR=0.2...
摘要:目的:评价皮肤再生医疗技术治疗慢性难愈合创面的疗效和安全性。方法:计算机检索中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库(Wanfang database)、中国知网(CNKI)、Cochrane library、PubMed数据库中应用湿润暴露疗法(moist exposed burn therapy, MEBT)/湿润烧伤膏(moisture burn ointment, MEBO)治疗慢性难愈合创面的随机对照研究,检索时限为2012年至2022年,筛选文献、提取资料,使用Cochrane评分手册评价纳入文献的质量,并采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入14篇随机对照研究,包括1 228例患者,试验组应用MEBT/MEBO加常规治疗,对照组进行常规治疗。Meta分析结果显示,试验组创面愈合率更高(RR=1.84,95%CI 1.50~2.26,P<0.001),试验组治疗有效率更高(RR=4.81,95%CI 3.18~7.27,P<0.001),试验组创面平均愈合时间更短(SMD=-1.39,95%CI-1.60~-1.17,P<0.001),试验组创面肉芽组织出现时间更早(SMD=-1.85,95%CI-2.15~-1.55,P<0.001),所有纳入研究均无不良反应及并发症病例报道。结论:MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面有良好疗效,且安全性高,但受纳入文献质量和数量的限制,结论仍需更多高质量随机对照研究进一步验证。
摘要:目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的可能机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机分为对照组、模型组和MEBO组,每组30只,其中对照组大鼠建立常规创面模型,模型组和MEBO组大鼠建立糖尿病创面模型。模型建立后,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布外敷治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱外敷治疗。分别于治疗第1、11、18天采用Western blotting法检测ULK1蛋白及qRT-PCR技术检测ULK1 mRNA的表达水平,并对比观察3组大鼠创面愈合情况。结果(1)治疗第1天,3组大鼠创面均淤血水肿,无肉芽组织形成;治疗第11天,对照组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成,模型组大鼠创面高度水肿,无肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成;治疗第18天,对照组大鼠创面完全愈合,模型组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成。(2)治疗第11、18天,3组大鼠创面愈合率对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第1天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组=模型组,对照组与MEBO组及对照组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第11天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第18天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组=MEBO组<模型组,对照组与模型组及MEBO组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,提高创面组织中ULK1表达水平,诱导细胞自噬可能是其作用机制之一。