摘要:目的 探讨象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面凋亡因子胱天蛋白酶(cysteine aspartic acid specific protease, Caspase)的影响。方法 36只SD大鼠建立肛瘘模型后,随机选取27只肛瘘大鼠构建肛瘘术后创面模型,随机分为象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组、模型组,每组9只,剩余9只肛瘘大鼠为假手术组。象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组使用生理盐水冲洗创面后外敷相应药物,模型组仅使用生理盐水冲洗创面,假手术组无特殊处理,每日1次,连续干预10 d。造模后3、5、7、10 d,观察创面愈合情况,计算创面愈合率。药物干预10 d后,从各组取创面组织,HE染色观察创面组织病理学变化,TUNEL法检测创面组织中细胞凋亡数目,免疫组织化学法检测创面组织中Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白的表达。结果 与模型组相比,象皮生肌膏组在干预后3、5、7、10 d时创面愈合率均显著升高(P<0.05,P<0.01),湿润烧伤膏组在干预后5、7、10 d时创面愈合率均显著升高(P<0.05,P<0.01),而象皮生肌膏组创面愈合率在干预后7、10 d均明显高于湿润烧伤膏组(P<0.01)。与假手术组比较,象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组、模型组细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),创面组织中Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组细胞凋亡率均显著降低(P<0.01),Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著下降(P<0.01);与湿润烧伤膏组比较,象皮生肌膏组细胞凋亡率均显著降低(P<0.01),Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12蛋白表达水平均显著下降(P<0.01)。结论 象皮生肌膏能通过抑制肛瘘术后创面组织细胞凋亡,抑制凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Caspase-12的表达,促进创面愈合。
摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对糖尿病创面中TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路表达的影响。方法:将48只Wistar雄性大鼠随机平均分为对照组、模型组、美宝组和贝复新组。其中对照组构建急性创面模型,其余组构建糖尿病创面模型。随后美宝组和贝复新组分别采用湿润烧伤膏和重组牛碱性成纤维生长因子进行换药,对照组及模型组采取生理盐水进行换药。通过H&E染色、免疫荧光法及实时荧光定量PCR检测观察各组创面第3、7、14天愈合情况及TXNIP、NLRP3及Caspase-1表达情况。结果:(1)治疗第3天,对照组创面愈合率高于模型组,且具有统计学差异性(P<0.05);治疗第7、14天,对照组、美宝组和贝复新组创面愈合率高于模型组(P<0.05)。(2)治疗第3、7、14天,对照组、美宝组和贝复新组的TXNIP、NLRP3表达量低于模型组(P<0.05):治疗第3、7、14天,对照组和美宝组的Caspase-1表达量低于模型组(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO可通过抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路表达,减轻糖尿病创面的炎症反应,从而促进糖尿病创面的愈合。
摘要:目的:探讨不同干预措施对大鼠慢性难愈合创面细胞焦亡相关因子Caspase-1和IL-18表达的影响,完善皮肤再生医学技术在慢性难愈合创面中的作用机制,为临床应用及推广提供更多的理论依据。方法:(1)取健康成年SPF级Wistar雄性大鼠90只,12周龄,体重220g~250g,适应性喂养1周后,随机分为:空白组(Blank)、急创组(Acute)、美宝组(MEBO)、贝复济组(rb-b FGF)、模型组(Model),每组18只。其中空白组仅做背部脊柱两侧备皮处理,急创组直接进行背部皮肤剪除,建立急性损伤模型,并湿敷生理盐水纱布,其余三组大鼠制备慢性难愈合创面模型,分别用湿润烧伤膏、贝复济,生理盐水湿敷创面治疗。造模后第3、7、14天分别切取创面肉芽组织,部分置于甲醛液及电镜液中固定,待病理HE染色,免疫荧光及电镜实验时取用。其余创面标本置于-80℃冰箱,用于Western Blotting和Real-Time PCR检测,对比各组大鼠创面IL-18及Caspase-1蛋白表达情况及mRNA转录水平。结果:(1)创面愈合情况:治疗后第3天,各组大鼠创面愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后第7天和第14天,急创组、贝复济组、美宝组大鼠创面愈合率和模型组比较均明显升高(P<0.05),美宝组与贝复济组比较无差异(P>0.05)。急创组在第14天愈合效果最好。(2)HE染色情况:急创组、贝复济组、美宝组的组织形态学结构均优于模型组。(3)电镜观察情况:电镜观察显示模型组、美宝组中均存在细胞胀大、细胞破损、胞液稀疏、着色较浅、胞膜不连续,膜孔形成的细胞焦亡特征。(4)免疫荧光染色结果:Caspase-1在造模后第3天的急性组、贝复济组、美宝组,模型组中均有不同程度表达,其中模型组表达明显;造模后第7天和第14天,其余各组表达均明显减少,而模型组相对其他组仍然明显表达。(5)Western Blotting和Real-Time PCR检测情况:(1)治疗后第3、7、14天,空白组各时间点IL-18蛋白表达水平无明显变化,P>0.05,差异无统计学意义;急创组、贝复济组、美宝组、模型组:大鼠创面组织内IL-18蛋白表达水平先升高后降低;各组对比情况:第3天:空白组、模型组分别和其余四组比较有统计学差异P<0.05,急创组、贝复济组、美宝组两两比较无统计学差异。第7天:空白组、模型组分别和其余四组比较有统计学差异...