摘要：目的:通过对大鼠慢性难愈性创面组织中基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-Derived Factor-l,SDF-1)、趋化因子受体4(C-X-C Chemokine Receptor Type 4,CXCR4)表达水平的研究,来探讨烧伤疮疡再生技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对加速慢性难愈合创面的修复进程的部分机制。方法:(1)SPF级雄性Wistar大鼠90只按随机数表法将实验动物随机分为空白组(KBZ组)、急性组(JXZ组)、模型组(MXZ组)、贝复新组(BFZ组)和MEBO组(MBZ组),每组十八只,空白组皮肤只剃毛,不作其他皮肤损伤处理,急性组做全层皮肤处理,建立急性创面,模型组、MEBO组和贝复新组参照付小兵等全层皮肤缺损法和沈氏改良塑料环肉芽肿定量法建立慢性难愈合创面模型。(2)造模成功后创面处理:JXZ组、MXZ组创面予以生理盐水纱布覆盖,BFZ组创面予以贝复新药物干预,MBZ组创面予以MEBT/MEBO干预。创面换药前均以1/5000呋喃西林液消毒处理,换药频率2次/日。(3)动物模型制备完成后,分别于3d、7d、14d,每组随机选取6只大鼠,麻醉后切取整个创面肉芽组织,标本一部分放入甲醛中固定,之后行HE染色、Masson染色,余创面组织置入-80℃冰箱,用于之后行Real-time q PCR、Western Blot检测创面组织中SDF-1、CXCR4m RNA表达水平及蛋白表达水平。结果:(1)创面愈合情况观察:造模第3天,四组创面基本未见明显愈合,JXZ组创面少量新鲜肉芽组织,MXZ组、MBZ组、BFZ组创面未见明显肉芽组织,其中MXZ组创面渗出较多,水肿明显。造模第7天,除MXZ组,其他三组创面有缩小,JXZ组最明显,JXZ组创面肉芽组织鲜红色,无渗液水肿,MBZ组与BFZ组创面肉芽较前新鲜,无渗液,MXZ组创面少量渗出、水肿,且可见坏死组织。造模第14天,JXZ组创面基本愈合,部分MBZ组、BFZ组创面接近愈合,创面肉芽组织新鲜,创面上皮化明显,MXZ组创面明显缩小,创面可见较多新鲜肉芽组织,无渗液、水肿。(2)创面愈合率:造模成功后,第3天、7天、14天,MXZ组创面愈合率与JXZ组、MBZ组、BFZ组均有差别(P<0.05),且MBZ组、BFZ组愈合率无明显差别(...

摘要：目的:许多miRNAs对皮肤有特定功能,miRNA广泛参与了机体皮肤发育,包括表皮细胞的增殖、分化、衰老及毛囊的发育,miRNA-203是第一个被发现在表皮及毛囊丰富表达的miRNA, miRNA-203在皮肤中的表达比在其他器官中高出100倍,被称为是"皮肤特异性的miRNA",它可通过直接抑制p63基因表达而促进表皮分化。研究表明,miRNA-203表达与皮肤分化和分层密切相关。临床实践中应MEBT/MEBO治疗慢性难愈合性创面,发现MEBO能显著缩短创面愈合时间,减少瘢痕愈合;进一步研究发现MEBO/MEBO能明显提高创面肉芽组织VEGF、bFGF、EGF基因及蛋白表达,最终加快创面愈合的进程,减少疤痕形成。尽管我们的研究初步揭示了MEBO防治慢性难愈合创面的部分机制,但是MEBO是通过何种途径调节以上基因及蛋白表达的呢?这个问题还有待进行更深入的研究。鉴于miRNA是一类小分子的非编码调控基因,而且人类中大部分的蛋白编码基因受miRNA调控,所以我们研究目的是证明MEBT/MEBO可以通过对miRNA-203的调控来促进慢性难愈合创面恢复。方法:参照付小兵等全层皮肤缺损法和沈氏改良塑料环肉芽肿定量法经改进制成大鼠慢性难愈合创面模型。健康成年SPF级Wistar雄性大鼠250只,12周龄,体重220g～250g,适应性喂养1周后,随机分为:空白组50只、对照组50只、慢性难愈合创面组150只。空白组大鼠不作任何有损伤性处理;对照组大鼠按上述模型建立方法在造模部位行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;慢性难愈合创面组大鼠按上述方法制备慢性难愈合创面模型,然后按处理方法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组50只,各组创面制备后立即用药治疗。模型制备完成后,各组于1d、3d、7d、11d、14d共5个时相点随机取10只大鼠,尾静脉注射适量的多功能纳米探针,然后利用小动物活体成像系统,进行miRNA-203的活体原位荧光成像与分析检测。活体原位荧光成像与分析检测完成后,对大鼠作病理切片,Western Blot检测HIF-1α、PTEN、VEGFR2、PI3K、MMP2、p-Akt蛋白表达。结果:MEBO可以通过PTEN/Akt/VEGF信号通路影响血管内皮细胞的生长,调控血管新生;通过PTEN/Akt/EGF信号通路影响表皮细胞的增殖和爬行,调控再上皮化的过程,进而促进细胞生长因子产生和修复创面。而MEBO可以促进miRNA-203的表达,而miRNA-203又可以调节PTEN表达水平的变化。结论:PTEN-Akt-VEGF/EGF通路可以接受miRNAs调节而发挥相应作用,而MEBT/MEBO可以通过对miRNA-203的调控来促进慢性难愈合创面恢复。所以miRNA-203在MEBO发挥防治慢性难愈合创面作用过程中起到重要的作用。

摘要：目的探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及配套产品湿润烧伤膏(MEBO)对大鼠慢性难愈性皮肤溃疡创面肉芽组织表皮生长因子(EGF)、表皮细胞生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠45只,参照付小兵大鼠慢性性皮肤溃疡创面模型制作方法制作模型,成模后再采用随机数字表法随机分为模型组(15只)、MEBO组(15只)、贝复剂组(15只),造模后第2天开始用药,观察用药后各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,记录创面愈合时间;常规病理切片观察创面炎症、成纤维细胞数量、血管改变情况;透射电镜观察成纤维细胞及其线粒体形态结构;换药后第7、14天取创面组织,采用免疫组织化学法(SP法)观察MEBO对创面肉芽组织EGF、EGFR表达的影响。结果 MEBO组大鼠的创面愈合情况明显好于模型组与贝复济组;创面愈合时间明显短于模型组及贝复济组(P<0.05;P<0.01);病理学观察:MEBO组与贝复剂组及模型组比较,炎症反应轻、肉芽组织生长良好,纤维增生程度低;换药后第7、14天,MEBO组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数分别较模型组和贝复济组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBO能增加慢性皮肤溃疡创面肉芽组织中EGF、EGFR的表达量,从而促进慢性皮肤溃疡愈合。

摘要：目的:探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及产品湿润烧伤膏(MEBO)促进大鼠慢性难愈合皮肤创面组织愈合的机制。方法:建立慢性难愈合创面模型,观察MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。结果:①创面愈合大体情况:观察造模后创面肉芽组织生长情况,发现MEBO组、贝复济组大鼠创面内芽组织生长情况明显好于模型组,MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠创面较苍白,生长缓慢。②创面愈合时间:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合时间为16.28±1.19d,短于贝复济组17.52±1.20d(P<0.05),明显短于模型组27.10±2.90d(P<0.05),差异有统计学意义。③ATF2和p38蛋白的表达:模型组ATF2和p38蛋白的表达明显低于MEBO组、贝复济组(P<0.01),MEBO组在第14天高于模型组(P<0.05)。结论:MEBO能促进大鼠慢性难愈合皮肤创面愈合的速度和质量,功效优于模型组。MEBO能影响p38MAPK信号通路相关蛋白中ATF2和p38的表达,从而激活p38MAPK信号通路,影响和调控细胞效应,进而促进细胞因子的产生以及随后的细胞增殖,血管再生和基质修复,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。