摘要:目的:从PTEN/AKT/VEGF信号通路进一步探讨MEBT/MEBO促进大鼠难慢性难愈合创面修复的机制。方法:健康成年SPF级Wistar雄性大鼠90只,12周龄,体重220g250g,适应性喂养1周后,随机分为:空白对照组18只、对照组(急性全层皮肤缺损组)18只、模型组54只。空白对照组大鼠不作任何有损伤处理;对照组大鼠在造模部位行全层皮肤切除,但不注射氢化可的松;模型组大鼠在造模部位行全层皮肤切除后注射氢化可的松制备慢性难愈合创面模型,然后按处理方法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组18只。各组创面制备后立即用药治疗。在造模后第3天、第7天、第14天每组各处死6只,取新鲜创面组织,立即放于液氮罐中,并在取材完毕后迅速转入﹣80℃超低温冰箱。待标本全部收集完成后进行Western Blotting、RT-PCR方法检测PTEN、p-AKT、VEGFR2因子的表达。结果:(1)PCR结果:(1)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中PTEN表达量都呈现出降低-升高的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递减趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组、对照组和模型组各组三个时相点的PTEN表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠三个时相点的PTEN表达量未有明显变化(P>0.05)。(2)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中VEGFR2表达量都呈现出升高-降低的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递增趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组、对照组和模型组各组三个时相点的VEGFR2表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故VEGFR2表达量未有明显变化(P>0.05)。(3)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中p-AKT表达量都呈现出升高-降低的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递增趋势(P<0.05);MEBO组、贝复济组和对照组各组三个时相点的p-AKT表达量均有显著差异(P<0.05);空白对照组大鼠由于未做有损伤处理,其组织乃正常皮肤,故p-AKT表达量未有明显变化。(2)WB结果:(1)MEBO组、贝复济组和对照组的大鼠随时间变化其创面肉芽组织中PTEN表达量都呈现出降低-升高的趋势(P<0.05);模型组则显示呈递减趋势(P<0.05);M...
摘要:目的探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及配套产品湿润烧伤膏(MEBO)对大鼠慢性难愈性皮肤溃疡创面肉芽组织表皮生长因子(EGF)、表皮细胞生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠45只,参照付小兵大鼠慢性性皮肤溃疡创面模型制作方法制作模型,成模后再采用随机数字表法随机分为模型组(15只)、MEBO组(15只)、贝复剂组(15只),造模后第2天开始用药,观察用药后各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况,记录创面愈合时间;常规病理切片观察创面炎症、成纤维细胞数量、血管改变情况;透射电镜观察成纤维细胞及其线粒体形态结构;换药后第7、14天取创面组织,采用免疫组织化学法(SP法)观察MEBO对创面肉芽组织EGF、EGFR表达的影响。结果 MEBO组大鼠的创面愈合情况明显好于模型组与贝复济组;创面愈合时间明显短于模型组及贝复济组(P<0.05;P<0.01);病理学观察:MEBO组与贝复剂组及模型组比较,炎症反应轻、肉芽组织生长良好,纤维增生程度低;换药后第7、14天,MEBO组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数分别较模型组和贝复济组大鼠创面肉芽组织中EGF和EGFR蛋白表达阳性染色指数提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBO能增加慢性皮肤溃疡创面肉芽组织中EGF、EGFR的表达量,从而促进慢性皮肤溃疡愈合。
摘要:目的:本实验主要研究联合美宝湿润烧伤膏(MEBO)与外用重组人表皮生长因子(rhEGF)治疗,并在临床上观察其相对于单用MEBO治疗与单用rhEGF治疗在烧伤创面中的临床疗效差异,从而探寻一种更适合的治疗方案,以减轻患者的精神和经济负担,缩短住院时间,加快创面的愈合,同时为MEBO与rhEGF的应用和发展提供相关的临床依据。方法:本研究按中华烧伤学会制定的烧伤深度“三度四分法”,面积大小“九分法”诊断标准,选取2016年11月至2018年3月在延安大学附属医院烧伤整形手外科病区就诊的Ⅱ°烧伤患者90例作为受试对象。将全部纳入对象完全随机分为3组,依次为:MEBO组、rhEGF组、联用组,每组30例。rhEGF组治疗患者直接用外用重组人表皮生长因子溶液。MEBO组治疗患者直接创面涂MEBO湿润烧伤膏,。联用组治疗患者先用rhEGF溶液局部均匀喷湿创面,待创面吸收后再涂抹MEBO。分别比较三组创面愈合的时间、创面的愈合率、瘢痕形成以及色素沉着情况,得出相关数据,采用SPSS 25.0软件进行数据统计分析。结果:1.一般基本资料的比较rhEGF组、MEBO组以及联用组三组患者的性别、年龄、烧伤面积、致伤因素等基本资料比较,差异无统计学意义,临床资料符合统计学要求(P>0.05)2.愈合时间的比较在对三组患者的观察治疗过程中,共90例患者,失访5人:其中rhEGF组失访2人,MEBO组失访1人,联用组失访2人。在剩下的85例患者中,三组患者浅Ⅱ°创面的愈合时间分别为:rhEGF组8.66±1.63d,MEBO组9.58±1.31d,联用组7.64±1.21d。三组患者深Ⅱ°创面的愈合时间分别为:rhEGF组16.54±2.29,MEBO组18.13±2.75 d,联用组15.85±1.71 d。对于浅Ⅱ°创面和深Ⅱ°创面,三组患者创面愈合时间比较差异均有统计学意义(P<0.05),且联用组<MEBO组0.05),尚不能认为三者痊愈率有差异。三组患者深Ⅱ°创面用药14天后,联用组创面痊愈率明显高于rhEGF组和MEBO组,而rhEGF组与MEBO相比,尚不能认为二者创面痊愈率有差异。深Ⅱ°创面用药21天后,联用组创面痊愈率明显高于rhEGF组和MEBO组,而rhEGF组...
摘要:第一部分:小鼠慢性创面愈合过程中巨噬细胞极化类型及影响创面愈合关键的信号通路研究目的:经由单细胞转录组测序技术(sc RNA-seq)对小鼠创面内巨噬细胞(Mac)极化类型与成纤维细胞(Fib)、上皮细胞(EC)之间的关系,还有影响创面愈合的主要信号途径展开探讨。方法:经由sc RNA-seq法探究小鼠愈合创面(Wound)与未愈合创面(Un_wound)组织在细胞亚群通讯强度、数量与互作方面的不同表现;对2类创面组织中特异性信号途径及其配体-受体加以明确,同时开展比较分析;并探讨小鼠Wound与Un_wound组织中Monocyte亚群类型及其几类关键亚群类型。结果:(1)小鼠2类创面(Wound、Un_wound)的单细胞质控Counts值皆未显示异常,细胞之间表现出较好的整体关联性。Wound组织中的细胞亚群以皮肤组织干细胞(Tissue SC)、EC、软骨细胞(Chondrocytes)、B细胞(B cells)、单核巨噬细胞(Monocyte)、Fib、内皮细胞(Endo)、角化细胞(KC)与T细胞(T cells)为主;Un_wound组织中相关的细胞亚群以皮肤组织SC、T细胞(T cells)、波纹管细胞(CMP)、Monocyte、神经元细胞(Neurons)、Endo、EC、KC、Fibroblasts、软骨细胞(Chondrocytes)与B细胞(B cells)为主;在Wound组织中,Monocyte同EC、Fib、Tissue sc细胞亚群之间皆存在紧密联系;在Un_wound组织内,就Monocyte同EC、Fib细胞亚群的通讯强度与数目而言,相较Wound组织皆偏低;(2)对于小鼠慢性创面组织Fib与Epithelial这2类细胞亚群,皆会受到Monocyte所含EGF信号途径CXCL1-Akr1信号轴的活化效应影响,CXCL信号途径内的不同配体-受体之间的作用性,对于整个信号途径,CXCL16-Akr6以及CXCL1-Akr1配体受体所具备的价值最高。对单个配体受体在不同细胞通信中的调控功能进行分析的结果显示,Cxcl3-Ark1配体受体于Mac与血管内皮细胞(VEC)的信号关联性更为显著,且更为关键;(3)Monocyte亚群由0、1、2、3、4、5这五类构成,前两类在Wound组织中占据主要位置,CD68与CD162特异性表达亚群存在比较明显的优势,同时CD163标记的Mono...