摘要：目的探究烧伤创疡再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)对烧伤创面组织中角蛋白19 (keratin 19, K19)表达的影响及可能的作用机制。方法选取15只健康雄性昆明小鼠,按照随机数表法随机选取5只作为对照组,10只建立深Ⅱ度烫伤模型后随机分为模型组与治疗组,其中治疗组小鼠创面采用湿润烧伤膏进行处理、模型组小鼠创面采用生理盐水进行处理、对照组小鼠背部脱毛后不做任何处理,1周后取皮肤或创面组织并通过免疫组织化学染色、蛋白质印迹(Western blot)及定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, Q-PCR)等技术检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3及K19的表达水平。结果治疗第1-7天,治疗组小鼠创面清洁,并始终保持湿润状态,且随着治疗时间的延长逐渐呈现上皮化状态;模型组小鼠创面逐渐加深,并出现感染征象。治疗1周后,免疫组织化学染色法及Western blot法检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P均<0.01,差异具有统计学意义;除Western blot法检测结果显示治疗组与模型组小鼠创面组织中LC3表达水平对比,P>0.05外,其余各检测结果均显示小鼠皮肤或创面组织中Beclin-1、LC3及K19表达水平两两对比,P<0.01,差异具有统计学意义。Q-PCR技术检测结果显示,3组小鼠皮肤或创面组织中K19 mRNA表达水平对比,治疗组>模型组>对照组,P <0.01,差异具有统计学意义;3组小鼠皮肤或创面组织中K19mRNA表达水平两两对比,P均<0. 01,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO促进烧伤创面愈合可能与增加创面组织中K19的表达有关,而诱导自噬相关蛋白的高表达可能是其具体机制之一。

摘要：目的:本研究通过对比单纯使用皮肤再生医疗技术(MEBO/MEBT),观察“补托法”结合MEBO/MEBT处理压疮的疗效、安全性及基础机制。方法:选取符合标准的压疮患者60例,将其均随机分为治疗组和对照组,每组各30例。两组均予以常规治疗,对照组创面规范按照MEBO/MEBT处理,每日2次,并根据情况适当清创。治疗组在对照组基础上服用八珍汤加减,总疗程4周。于治疗前后治疗记录创面面积、渗液量及创面组织类型后进行PUSH评分,评价愈合情况,记录创面新生新生上皮出现时间,记录不良反应,评价其安全性;于第7、14、21、28日取创缘组织,一部分HE染色后观察组织病理形态变化,一部分用western blot法检测压疮组织中CK19的表达水平;对临床观察结果及CK19检测结果进行统计学分析。结果:本次研究脱失或剔除治疗组7个、对照组8个,最终治疗组23人、对照组22人,共45人纳入试验结果。(1)临床观察结果治疗前后两组内压疮PUSH评分进行比较,有统计学差异(两组P均<0.05),两组患者压疮PUSH评分在治疗前后均有变化,即两组压疮较治疗前好转;治疗后两组间PUSH评分比较,有统计学差异(P<0.05),治疗组低于对照组,即治疗组压疮愈合情况优于对照组。(2)基于PUSH评分评价“补托法”结合MEBO/MEBT治疗III、IV期(气血亏虚证)压疮的效果,治疗组有效22例、无效1例,总有效率95.65%,对照组有效12例、无效10例,总有效率54.55%,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组间治疗后新生表皮出现时间差异有统计学意义(P<0.05),新生表皮出现时间:治疗组早于对照组。安全性比较,治疗组及对照组分别出现2例、1例轻度不良反应,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)实验观察结果观察压疮创面组织HE染色后组织病理形态学变化:治疗前两组压疮组织病理情况基本相同,均可见组织疏松水肿,部分区域变性坏死,纤维模糊断裂,部分血管坏死,真皮内出血,巨噬细胞、嗜中性粒细胞及大量淋巴细胞等炎性细胞浸润。研究过程中治疗组新生血管及纤维量生长更快,并在14d时即出现新生上皮,21d时出现毛囊、腺体结构,对照组相同结构新生时间晚于治疗组1周。对压疮组织中CK19表达量进行组间比较:在0d、7d时治疗组及对照组创面中CK19表达量的差异无统计学意义(P>0.05),14d、21d、28d时组间差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组高于对照组。两组创面在不同时间点CK19的表达总体上有差异(P<0.05),两组创面CK19表达量7d与14d、0d与14d之间,治疗组7d与28d之间,对照组0d与21d之间,无明显差异(P>0.05),其余任意同组内两时间点存在统计学差异(P<0.05),并且两组创面中CK19表达量呈现随时间先降低后升高最后再降低的趋势(28d<7d<0d、28d<14d<21d)。结论:(1)MEBO/MEBT联合“补托法”可促进III、IV期(气血亏虚证)压疮患者创面的愈合,且比较安全,其机制可能与促进表皮干细胞的分化及其标志物CK19表达相关。(2)MEBO/MEBT联合“补托法”可促进III、IV期(气血亏虚证)压疮患者创面中表皮组织、肉芽组织及附属器生成。(3)MEBO/MEBT治疗III期、IV期(气血亏虚证)压疮患者过程中,创面中CK19表达量呈先降低后升高再降低的趋势,加用“补托法”不改变其基本趋势,但可在使用2周后促进创面组织中表皮干细胞标志物CK19的表达。

摘要：目的：观察超脉冲CO2点阵激光Active FX、Deep FX治疗兔耳浅表性瘢痕的创面愈合情况并比较湿性创面护理技术和传统外科创面护理技术，创面愈合的差异性。研究CK19、P63在兔耳浅表性瘢痕点阵激光修复中的表达及不同创面护理技术对它们的影响，为临床采用超脉冲CO2点阵激光治疗瘢痕、寻找表皮干细胞参与瘢痕修复的证据。方法:选取新西兰大白兔20只，在兔耳腹侧面制作边长为1.5cm的正方形全层皮肤及软骨膜缺损创面，每只兔耳2个创面，共计80个创面，建立兔耳浅表性瘢痕模型。激光治疗分为两组: UltraPulse CO2Fractional（超脉冲CO2点阵）激光Active FX治疗组和UltraPulse CO2Fractional（超脉冲CO2点阵）激光Deep FX治疗组;激光治疗后创面修复分为两组：传统络合碘治疗方法组和湿润烧伤膏治疗方法组。每天观察创面愈合情况，记录每个创面的愈合时间；收集治疗前、治疗后即刻、1天、4天、7天、14天的瘢痕组织标本作病理组织切片，行HE染色镜下观察，并采用免疫组化检测皮肤干细胞标志分子角蛋白19（cytokeratinsCK19）、转录因子P63的表达，分析超脉冲CO2点阵激光两种不同模式和两种创面修复方法对CK19、P63的影响。结果:1、大体观察：络合碘组Active FX、Deep FX模式治疗后第2～3天创面开始干燥结痂、第9～10天痂皮开始脱落、第14天创面愈合，瘢痕较治疗前平整，颜色变浅；湿润烧伤膏组Active FX模式治疗后创面湿润，第2～3天创面可见散在点状结痂，第5～6天点状痂皮脱落,Deep FX模式治疗后创面未见明显结痂，治疗后第6～7天创面上皮化愈合。点阵激光Active FX模式治疗：络合碘组创面愈合时间为（13.7±0.65）天，湿润烧伤膏组创面愈合时间为（10.4±0.80）天，组间差异有统计学意义（P＜0.05）；点阵激光Deep FX模式治疗：络合碘组创面愈合时间为（9.4±0.28）天，湿润烧伤膏组创面愈合时间为（7.5±0.62）天，组间差异有统计学意义（P＜0.05）；Active FX模式和Deep FX模式治疗创面愈合时间对比，...