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学位论文
湿润暴露疗法/湿润烧伤膏通过PTEN/AKT信号通路影响慢性难愈合创面中MMP-2和MMP-9表达
陈端凯; 唐乾利 右江民族医学院 右江民族医学院 2020

摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面的修复作用,并从同源性磷酸酶张力蛋白(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)通路影响慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotease 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotease 9,MMP-9)表达,为MEBT/MEBO临床推广提供可靠理论依据。方法:(1)参照付小兵教授等人的全层皮肤缺损法和沈道修教授等人的改良塑料环肉芽肿定量法的基础上进行精进改良,建立慢性难愈合创面模型。SPF级Wistar大鼠,按随机数字表法分为5个组,分别为美宝组(30只)、贝复新组(30只)、模型组(30只)、急性组(30只)、空白组(30只)。于造模后的第3、7、14d,观察各组大鼠的创面情况及愈合率,并通过HE和Masson染色观察创面组织形态学变化情况;(2)采用ELISA法检测各组大鼠慢性难愈合创面肉芽组织中TNF-α和IL-6蛋白表达变化,观察各组大鼠创面组织中炎症反应变化情况;(3)采用Western Blot法检测PTEN和p-AKT蛋白表达变化情况,观察各组大鼠创面组织受到干预后对PTEN/AKT信号通路的调控影响;(4)采用ELISA法、Western Blot法和RT-PCR法检测各组大鼠慢性难愈合创面肉芽组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达变化情况,以及MMP-2 m RNA和MMP-9 m RNA基因转录情况,观察各组大鼠创面组织受到干预后对MMP-2和MMP-9表达变化的影响。结果:(1)各组大鼠创面的疗效观察:急性组的创面愈合情况最优,且明显优于模型组;而美宝组和贝复新组创面愈合情况也优于模型组(P<0.05);HE染色及Masson染色结果:急性组、美宝组和贝复新组的形态学观察均较模型组好。(2)各组大鼠创面组织中TNF-α和IL-6蛋白表达的变化:(1)急性组、美宝组和贝复新组的标本组织匀浆中TNF-α蛋白表达呈现出先升高后降低的趋势,模型组则呈现出递增趋势;与模型组相比,造...

期刊论文
湿润暴露疗法/湿润烧伤膏对慢性创面组织中MMP-2和MMP-9表达的影响
陈端凯; 冯时; 唐乾利; 姜艳; 唐强; 岑小宁; 黄汉基; 尹星 右江民族医学院临床医学院;广西大学医学院;广西中医药大学第一临床学院; 中国药理学通报 2020

摘要:目的探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)作用MMP-2和MMP-9促进慢性创面愈合的机制。方法 90只Wistar大鼠随机分为5组:MEBO组、贝复新组、慢性组、急性组和空白组,每组18只,构建慢性难愈合创面模型。采用ELISA、Western blot和qRT-PCR技术,检测d 3、14创面组织中MMP-2和MMP-9表达变化。结果 (1)与慢性组相比,MEBO组和贝复新组创面愈合时间明显缩短且愈合率升高(P<0.05);且生长情况及病理形态学改变更好;(2)与慢性组相比,d 3标本匀浆中,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均增高(均P<0.05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9均降低(P <0. 05);(3)与慢性组相比,d 3标本,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达量均增高(P <0. 05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均降低(P <0. 05)。结论 MEBT/MEBO促进慢性创面愈合可能与调控MMP-2和MMP-9,来参与ECM的降解与重塑相关。

慢性创面 溃疡
期刊论文
MEBT/MEBO通过PTEN/AKT通路对慢性难愈合创面中基质金属蛋白酶表达的影响
陈端凯; 岑小宁; 包崇婵; 姜艳; 卓臣义; 黄汉基; 许彦; 唐乾利 右江民族医学院/桂西高发病防治重点实验室;广西大学医学院;广西中医药大学第一临床学院; 中国中西医结合杂志 2020

摘要:目的通过观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)是否通过同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)/磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)通路影响慢性难愈合创面中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,探讨MEBT/MEBO的作用机制。方法 150只Wistar雄性大鼠被随机分为5组,美宝组(30只)、贝复新组(30只)、模型组(30只)、急性组(30只)和空白组(30只),并构建创面模型。于造模的第3、7、14天观察创面愈合情况,并采取创面标本组织,进行HE染色及Masson染色观察各组创面组织形态学变化和Western Blot检测各组PTEN、p-AKT、MMP-2及MMP-9蛋白表达情况。结果(1)贝复新组及美宝组创面愈合时间显著短于模型组(P<0.05),创面愈合率高于模型组(P<0.05),且创面组织染色结果更好;(2)在造模第3天,贝复新组及美宝组中PTEN蛋白表达量明显低于模型组(P<0.05),p-AKT、MMP-2、MMP-9蛋白表达高于模型组(P<0.05);第14天,与模型组比较,贝复新组及美宝组中PTEN蛋白表达增高(P<0.05),p-AKT、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P<0.05)。结论MEBT/MEBO可促进慢性难愈合创面的愈合,其可能作用机制是通过激活PTEN/AKT信号通路影响创面组织中MMP-2、MMP-9表达,及基底膜(BM)的降解与重塑。

慢性创面 溃疡
期刊论文
MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合创面组织中MMP-2、CXCL1、GM-CSF蛋白表达的影响
赵权; 谢嘉敏; 唐乾利; 甘苡榕; 左远娟; 王雪玲; 黄金梅 广西中医药大学研究生院;防城港市中医医院; 现代中西医结合杂志 2023

摘要:目的 观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、趋化因子配体1(CXCL1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白表达的影响。方法 将72只SD大鼠随机分为急性皮损组、慢性创面组、贝复新组、美宝组各18只,除急性皮损组外,其余组皮下注射氢化可的松建立慢性难愈合创面,注射完成后用生理盐水清理创面,贝复新组创面敷贝复新凝胶,美宝组创面敷美宝烧伤膏,均每日上下午各换药1次。观察各组大鼠伤后第3,7,14天创面情况并取创面肉芽组织,Masson染色观察创面中胶原纤维生成情况,ELISA法检测肉芽组织中MMP-2含量,免疫组化法检测创面组织中CXCL1、GM-CSF蛋白表达情况。结果 美宝组大鼠创面愈合速度快于慢性创面组和贝复新组。Masson染色显示各组创面组织中胶原纤维含量随伤后时间的延长逐渐增加;伤后第3,7天,美宝组胶原纤维含量均明显高于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05);伤后第14天,各组胶原纤维含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。创面组织中MMP-2含量,贝复新组随伤后时间延长而增加(P<0.05),美宝组随伤后时间延长而减少(P<0.05);伤后第3天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显高于慢性创面组(P<0.05);伤后第7天,美宝组和贝复新组创面组织中MMP-2含量下降但与慢性创面组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第14天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显低于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05)。贝复新组伤后创面组织中CXCL1表达平均光密度随伤后时间延长降低,伤后第14天明显低于伤后第3天(P<0.05);伤后第3,7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度均明显低于伤后第3天(P均<0.05),且伤后第14天明显低于伤后第7天(P<0.05)。慢性创面组、贝复新组、美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度和伤后第7天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。伤后第3天,美宝组创面组织中GM-CSF表达平均光密度与慢性创面组比较差异无统计学意义...

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