摘要:目的 探讨湿润烧伤膏对糖尿病皮肤溃疡小鼠肌肉组织中核因子NF-E2相关因子(nuclear factor E2-related factor 2, Nrf2)、醌氧化还原酶-1(nadph:quinone oxidoreductase-1, NQO1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO1)蛋白表达水平的影响。方法 自2020年12月至2021年5月,北部战区总医院烧伤整形科选取40只健康小鼠,其中30只小鼠采用链脲佐菌素腹腔注射法诱导糖尿病小鼠模型成功,小鼠背部做溃疡创面。分组:湿润烧伤膏组(实验组)、康复新液组(阳性对照组)、模型对照组,空白对照组(健康小鼠),每组10只小鼠。实验组和阳性对照组分别给予湿润烧伤膏及康复新液外用换药干预创面,模型对照组和空白对照组不予处理。2周后,采用Western blot法和IHC法检测Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平,比较4组间的差异。利用凝胶成像分析系统测定目的蛋白灰度值/内参蛋白β-actin灰度值的比值代表该蛋白的相对表达水平,同时数码显微镜下随机视野观察蛋白的平均光密度值作为该蛋白的相对表达水平,并进行对比分析。结果 用药2周后实验组、阳性对照组中Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平高于模型对照组,其差异具有统计学意义(P<0.01);实验组、阳性对照组,模型对照组中Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平与空白对照组比较,其差异具有统计学意义(P<0.01);蛋白表达电泳图提示,实验组中蛋白表达灰度值/内参蛋白β-actin灰度值的对比最明显,数码显微镜下观察实验组胞浆内Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达数量明显增多,4组间差异明显。结论 湿润烧伤膏治疗糖尿病小鼠溃疡创面后,Nrf2、NQO1、HO1蛋白表达水平均明显增高。
摘要:目的:通过氧化应激有关信号通路NRF2/HO-1/NQO1轴探讨皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist Exposedburn Ointment,MEBT/MEBO)促进大鼠慢性难愈合创面的再生修复机制。方法:90只SPF级Wistar大鼠被随机分为空白组、对照组(急性皮肤缺损)、慢性难愈合创面组(模型组、MEBO组、贝复新组),共5组,18只/组,模型组、MEBO组、贝复新组同时构建慢性难愈合创面模型。(1)于造模的第3、7、14日检测各组大鼠的创面愈合率;(2)采集创面组织,并采用HE染色、Masson染色检查各创面组织的细胞、肉芽、血管及胶原纤维等形态学改变;(3)比色法测定创面组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的浓度及超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,SOD)的活力值;(4)采用免疫组化技术测定各组创面组织中的HO-1、NQO1平均光密度值;(5)采用免疫荧光法测定组织中NRF2蛋白表达量;(6)采用Western-blo法测定组织中HO-1、NQO1的蛋白表达水平;(7)采用Real-time PCR检测法测定组织中HO-1、NQO1m RNA的转录水平。结果:(1)对5组大鼠进行干预治疗第14日后,MEBO组及贝复新组的大鼠创面愈合率优于模型组(P<0.05);(2)对5组大鼠进行干预治疗第7、14日后,MEBO组及贝复新组的新生血管、胶原纤维及成纤维数量较模型组多且整齐(P<0.05);(3)对5组大鼠进行干预治疗第3、7、14日后,除第3日贝复新组外,其余四组创面组织中MDA含量均优于模型组(P<0.05);MEBO组的SOD的活性均优于模型组(P<0.05);(4)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1平均光密度值均比同期模型组高(P<0.05);(5)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的NRF2蛋白表达量均优于模型组(P<0.05);(6)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1蛋白表达水平均优于模型组(P<0.05);(7)对5组大鼠进行干预治疗3、7、14日后,MEBO组及贝复新组的HO-1、NQO1m RNA转录水平均优于模型组(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO通过激...